183108. lajstromszámú szabadalom • Eljárás új aceetofenon-származékok előállítására
1 183 108 2 Teszt-vegyület 2 ' -(L-alaniloxi) 4 ,4 ' ,6 ' -trimetoxi-kalkon 2'-(4-karboxibutaniloxi)-4,4',6'-trimetoxikalkon 4-e toxi -2 ',4 ' -d imetoxi-6 ' -(propioniloxi)kalkon 2',4'-dimetoxi-6'-(propioniloxi)4-propoxikalkon 2',4'-dimetoxi4-metil-6'-(propioniloxi)kalkon 2',4'-dimetoxi4-(metiltio)-6'-(propioniloxi)-kalkon 4-{alliloxi)-2',4'-dimetoxi-6'-(propioniloxi)-kaikon 2',4,4’-trietoxi-6'-(propioniloxi)-kalkon 2',4'-dimetoxi-6'-(propioniloxi)-kalkon 4-klór-2',4'-dimetoxi-6'-(propioniloxi)kalkon 2'-etoxi4,4'-dimetoxi-6'-(propioniloxi)kalkon 2',4'-dimetoxi-6'-(propioniloxi)-3-(2-tienil)-akrilofenon 2',4'-dimetoxi-3-(5-metil-2-furil)-6'(propioniloxi)-akrilofenon 2,,4,-dimetoxi-3^1-metil-pirrol-2-il)-6'-(propionil-oxi)-akrilofenon 3 -(2 -furil)-2 ' ,4'-dimetoxi-6' -(propioniloxi)-akrilofenon 2',4'-dimetoxi-3,4-(metiléndioxi)-6'(propioniloxi)-kalkon 4,4'-dimetoxi-2’-(propioniloxi)-6'propoxi -kaikon 2'-izopropoxi4,4'-dimetoxi-6'(propioniloxi)-kalkon 4'-etoxi-2'-hidroxi4,6'-dimetoxikalkon 4,4'-dietoxi-2'-hidroxi-6'-metoxi-kalkon 2 '-hidroxi -3,4',6 '-trimetoxi-kalkon 2,4'-dietoxi-6'-hidroxi-4'-metoxi-kalkon 2'-hidroxi-3,4',5,6'-tetrametoxi-kalkon 2,2'-dihidroxi-3,4',6'-trimetoxi-kalkon 4'-etoxi-2'-hidroxi-6'-metoxi-3-(5-metil- 2 -furilj-akrilofenon 2 '-e toxi -6 ' -h i d roxi4' -me toxi-3 -(5 -me til- 2-furil)-akrilofenon 2',4'-dietoxi-6'-hidroxi-3-{5-metil-2-furilakrilofenon 2',4,4'-trimetoxi-6'-(pivaloiloxi)-kalkon 2' ,4 ' -d iet oxi -6 ' -hid roxi 4 -me to xi -kaikon 2',3-dihidroxi4,4',6'-trimetoxi-kalkon 2-hidroxi-3,4,4’,6-tetrametoxi-kalkün 2' hidroxi-2,4,4’,6'-tetrametoxi-kalkon 2'-hidroxi-2,3,4',6'-tetrametoxi-kalkon IC50 (üg/ml) rhinovírus HGP ellen 0,03-•0,1 0,03 0,03-0,1 0,1 ~ 0,3 0,03 0,03--0,1 0,03 '-0,1 0,1 ~ 0,3 0,3 ~ 1 0,1 ~ 0,3 0,02 ~ 0,06 0,1 ~ 0,3 0,03 ~ 0,1 0,3 0,1 ~ 0,3 0,1 0,03-0,1 0,01-0,03 0,002-0,006 0,006 ~ 0,02 0,1 0,1 0,3 0,15-0,5 0,03 0,04 0,04-0,12 0,01-0,03 0,03-0,1 0,1 -'0,3 0,1" '0,3 0,1 0,1 B) Vírusos szaporodás gátlása Meghatározzuk a 2'-hidroxi4,4',6'-trimetoxi-kalkonnak a rhino vírus HGP szaporodására He La sejtekben kifejtett hatását. 2'-hidroxi4,4’,6’-trimetoxi-kalkont különböző koncentrációkban HeLa sejtekből (4X105) álló monorétegekhez adunk, majd 60 percen át rhinovírus HGP-el (4X104 VKE) megfertőzzük. Ezután a sejteket Eagle-minimum táptalajjal mossuk, majd tenyészt- 5 jük a fenti táptalajon, mely 2% borjúszérumot, 1% triptóz-foszfát táptalajt, 100 /rg/ml sztreptomicin-szulfátot és 20 egység/ml penicillin G-t tartalmaz. A táptalajban a vírusszaporulat összhozamát 2 nappal a fertőzés után határozzuk meg. 10 Az eredményeket az 1. ábrán tüntetjük fel. Az adatokból kitűnik, hogy a 2'-hidroxi4,4',6'-trimetoxi-kalkon 0,1-1,0 pg/ml koncentrációban lényegesen csökkenti a vírusos szaporodást, ugyanakkor citotoxikus tüneteket nem okoz. 15 Hasonlóképpen meghatározzuk a 4'-etoxi-2'-hidroxi- 4,6'-dimetoxi-kalkon hatását a rhinovírus 21 típus szaporodására HeLa sejtekben. A 2. ábrán feltüntetett eredmények azt mutatják, hogy a 4’-etoxi-2'-hidroxi4,6'-dimetoxi-kalkon 0,03 pg/ml koncentrációban nagyon haté-20 konyán csökkenti a vírusos szaporodást, ugyanakkor citotoxikus tüneteket nem okoz. 2) In vivo vírus-ellenes hatás 25 A teszt-vegyületek aktivitását egéren halálos fertőzést okozó Coxsackievirus Bi -gyei szemben határozzuk meg. Kb. 15 g súlyú DDY egereket az LD50 érték mintegy tízszeresének megfelelő dózisban alkalmazott vírussal intra- 30 peritoneálisan megfertőzzük. A fertőzött egereket a teszt-vegyülettel orálisan kilencszer 0, 2, 5, 18, 24, 42, 48, 66 és 72 órával a fertőzés után, ill. intraperitoneálisan 1, 2, 4, 18 és 28 órával a fertőzés után kezeljük. A túlélést 21 napig jegyezzük fel. 35 Az eredményeket a 2. táblázatban tüntetjük fel. A kezeletlen (kontroll) egerek a fertőzés után 3-5 napon belül elpusztultak. 2. táblázat Coxsackievirus Bl-gyel szemben kifejtett vírus-ellenes aktivitása egéren Teszt-vegyület Dózis és adagolás módja Túlélés (%) 2'-hidroxi4,4',6'-trimetoxikaikon 40 mg/kgX9 p.o. 60 20 p.o. 40 2'-acetoxi4,4',6'-trimetoxikaikon 40 mg/kgX9 p.o. 70 2'-hidroxi4',6'-dimetoxi-3-20 p.o. 40 (2-tienil)-akrilofenon 40 mg/kgX9 p.o. 70 20 p.o. 30 Kontroll «■ — 20 65 4
