183022. lajstromszámú szabadalom • Eljárás 4-androsztén-3,17-dion-származékok előállítására
1 183 022 2 történő átalakítása után redukálhatjuk, vagy valamely (IV) általános képletű szefves féni-vegyülettel reagál táthatjük - ahol R4 valamely rövidszén láncú telített vagy telítetlen szénhrdrogéncsoportot jelent és Me valamely aftáfifématomot vagy magnéziumhafogenidcsoportot képvisel —, így az adott esetben jelenlevő két alcsoport tehasítása után a (III) általános képletíí 17/3-hkiroxi-4-androsztén-3 on-származékokat kapjuk, ahol X a fenti jelentésű és R» jelentése megegyezik R4 jelentésével vagy jelenthet még hidrogén a tó mo't is. R3 jelentésében rövidszénláncú telített vagy telítetlen szénhrdrogéncsoporton előnyösen metil-, etil-, vinilvagÿ etrníf csoportot kefl érteni. Az (l) általános képletű 4-ándrosztén-3,l 7-dion-származékok 17-ketocsopo ríjanak redukcióját a szakember számára ismert eljárásokkal végezzük (lásd például Fried, John: Organic Reactions in Steroid Chemistfy, van Mostrand Reinhold Comp., New York, l. kötet 61. oldal (1972)]. így például ezeket a vegyületeket ketállá történő átalakítás után nátriumbórhidríddel vagy Htium-aluirtfniuinhidridde 1 reagáltathatjuk, és a ketálcsOport elbontása után a megfelelő, (Iff) általános képletű 17^-hidroxi-4-amIrusztén-3-on-származékokat kapjuk, amelyek ismert módon anabolikus és/vagy androgén hatásúak. Ugyanígy ismertek módszerek a 17-ketocsoport alki lezésébe {lásd például Fried, John: Organic Reactions in Steroid Chemistry, van Nostrand Reinhoid Comp., New York, 2. kötet 53. oldal (1972.)]. így az (1) általános képletű 4-androsztén-3,l 7-dion-származékokat adott esetben a 3-oxoésoport ketálcsoporttá történő átalakítása után például alkilmagnéz.iumhalogenidekkel, vimffitinmmal vagy alkdlifémacetilrdekkel reagáltathatjuk, és az adott esetben jelenlevő ketálcsoport fehasítása után a (Hl) általános képletű 17aR-I70-hidroxi-4-androsztén-3-on-származékokat kapjuk, amelyek ismerten farmakológiailag hatást« anyagok vggy farmakológiailag hatásos szíerokíok előállítására használhatók kiindulási anyagokként. A találmány szerinti eljárásban kiindulási anyagokként alkalmazott (II) általános képtető szterin származékokat a megfelelő szterinekből állíthatjuk elő olyan módszerek segítségével, amelyeket a megfelelő 1 - és/vagy 2-helyzetben levő szubsztituensek szteroidokba történő bevitelére általánosan alkalmasak. A találmány szerinti eljárás foganatosítására az alábbi kiviteli példákat adjuk meg. A) Mikrobiológiai oldallá nctebon tás J. példa 750 ml-es Erlenmeyer lombikban levő, 200 ml térfogatú steril táptalajt, amely 1% élesztőextraktumot, 0,45% dinátriumhidrogénfoszfátot, 0,34% káfiumhidrogénfoszfátot és 0,2% Tween 80 emulgeátort tartalmaz, és amelynek pH-értékét 6,7-re állítottuk, a Mycobacterium spec. NRRL-B-3805 törzs kultúrájának szuszpenziójával beoltunk, és három napon át rázzuk 30 °C hőmérsékleten, percenként 190 fordulattal. Egy 50 literes fermentoxban levő 40 liter steril táptala}t, amely 1,23% élesztőextraktumot, 0,68% káliumdihidrogénfoszfátot és 0,2% Tween 80 emulgeátort tartalmaz és amelynek pH-értékét 6,0-ra állítottuk, beoltjuk a Mycobacterium spec, tcnyészkultúrájának 200 ml-évci. és 48 órán át inkubáljuk 30 ( liíimíi sékleten, levegőztetés közben (2 in'/óra). Egy 50 literes fermentorban levő 40 liter táptalajt, amely 2,0'7o kukoricalckvárt. 0,3% diamnióniumhidii' génfoszfátol cs 0.25Ti Twccn 80 emulgeátort tartalma/, és amelynek pH-értékét 6.5-rc beállítottuk, indukál.icéljából összekeverünk 5 g 6a-fliior-4-kolcsztcn-3-on nal, és 24 órán át 30 °C hőmérsékleten inkubáljuk levegőztetés (2 nv'/óra) és keverés (200 fordulat/itère) közben. Ezután a kultúrához hozzáadjuk 20 g 6a-fluor-4 kolesztén-3-on 150 ml dimetilformamiddal készített, sterilre szűrt oldatát, és további 56 órán át fermentáljuk keverés és levegőztetés közben 30 °C hőmérsékleten A fermentáció végrehajtása után a kultúrát 3X5 liter etilénkloriddal extraháljuk, az extrakttrniokat vákuumban bepároljuk, és a maradékot kovasavosztopon tisztit juk. így diizopropifé térből végzett átkristályosítás után 8,7 g 6a-fluor-4-androsztén-3,I7-diont kapunk, anrelynek olvadáspontja 22() 231 °C. A kiindulást anyagot az alábbi módon állítjuk elő. a) 60 g 3/Mudroxi-5-kotesztént 360 ml abszolút tetrahidrofurán és 120 ml metilénklorid elegyében jeges hűtés közben összekeverünk 60 g N-brómszukcinnőiddel, és ezt követően részletekben hozzáadunk 120 ml, 70%-os pitidin-fluorhuirogén reagenst. A rcakcióetcgyet f órán át keverjük hűtés közben, majd keverés közben hozzáadjuk jeges víz és kálíunákarbonát oldatához. Éterrel végzett extraháíás után a kapott nyerstermékei szilikagclen kromatografáljuk, és metanolból átkristályosítjuk. így 40,8 g 5-bróm-6/5-fluoT-5a-köfesztán-3/?olt kapunk, amelynek olvadáspontja 114,5 1Í6°C. b) 30 g 5-br0m-6ß-fluor-5<* kotesztán-3(}-olt 730 ml acetonban feloldunk, és 10 °C hőmérsékleten összekeverjük 24,1 ml krómkensav-oldattal (amelyet 267 g króm(VI)oxidból, 400 ml vízből cs 230 ml tömény kén savból állítottunk elő és vízzel 1000 mi re feltöltöttük). A reakcióelegyet 15 percen át keverjük 10 °C hőmérsékleten, majd jeges vízbe keverjük, a maradékot leszűrjük és metilénkloridban felvesszük Szárítás és bepárfás után a kapott nyersterméket 290 ml ecetsavban feloldjuk, 3 órán át keverjük 30 °C-on, majd hozzáadunk 4,65 g nátriumacetátot.és további 15 percen átkeverjúk -30 °C hőmérsékleten. Ezután jeges vízben kicsapjuk, a csapadékot leszűrjük, és metilénkloridban felvesszük. A bepárlás után kapott maradékot sziltkagélen kromatogra faljuk, és metanolból átkristályosítjuk. így 14,5 g 6o flnor-4-kolesztéB-3-OBt kapunk, amelynek olvadáspontja 111—115 °C. Hasonlóképpen eljárva alakíthatjuk át az 5-sztigmasztén 3/Folt 6 a- fluort -sz t igmasztén -3-onn á. 2. példa 20 g 6a-fluor-4-sztigmasztén-3-ort (91,5%-os nyerstermék) az 1. példa szerinti körülmények között a Mycobacterium spec. NRRL-B-3805 törzs kultúrájával reagál tatunk, így 6,1 g 6a-fluor-4 androsztén-3,I7-diont kapunk, amelynek olvadáspontja 228-231 °C. 3. példa 20 g 6a-fluor-4-kolesztén-3-ont az 1. példa szerinti körülmények között a Mycobacterium phlet ATCC 354 törzs kultúrájával reagáltatunk. Az elegy feldolgozása 3 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 65
