182952. lajstromszámú szabadalom • Eljárás 1-formil-indol-dihidroindol-szzármazékok előállítására
1 1*2 952 2 oxidációval, például krómtrioxiddal és ecetsawal állíthatók elő. A 4’-dezoxi VLB „A” és „B”, vagy az 1-formil-származékuk savas vagy bázikus közegben hidrolizálhatók 4-dezacetil-származékokká. Ezek a 4’-dezacetil-származékaí a 4’-dezoxi VLB „A”-nak és ,,B”-nek, ezután oxidálhatok alacsony hőmérsékleten (-60 °C), krómtrioxiddal 4’-dezoxi-4-dezacetil-vinkrisztinné és 4’-dezoxi-4- dezacetil-l-formilleurozidinné anélkül, hogy a4-hidroxicsoport átalakulna ketonná. A találmány szerinti vegyületek előállítását a következő példában részletezzük. 1. példa 4’-Dezoxivinkrisztin előállítása. 582 mg krómtrioxidot feloldunk 5,8 ml ecetsavban és 0,6 ml vízben. Ezt az oxidálószert cseppenként, 5 perc alatt, hozzáadjuk 58 ml acetonban és 2,9 ml jégecetben oldott 462 mg 4-dezoxi VLB „A”-hoz, körülbelül —50 °C-on úgy, hogy az oldatot kevertetjük. A reakciókeveréket körülbelül 30 percig kevertetjük ezen a hőmérsékleten, majd lehűtjük —65 °C-ra, amely hőmérsékletnél a reakciókeverékhez adott 12 ml 14 n vizes ammóniumhidroxid a reakciót leállítja. A meglúgosított reakcióelegyet 400 ml jég—víz keverékbe öntjük, és a vizes fázist 150 ml éterrel extraháljuk, majd az extrakciót megismételjük háromszor 150 ml kloroformmal. A szerves fázisokat egyesítjük, és ezt az egyesített frakciót híg nátrium-biszulfittal mossuk, elkülönítjük, és szárítjuk. A szerves oldószerek elpárologtatása után a 4’-dezoxivink risztin marad vissza. A kívánt vegyület további tisztítása céljából 50 g I. aktivitású szilíciumdioxidon ezt a maradékot kromatografáljuk. A kromatogram kifejlesztése a következő keverékekkel történt: először 300 ml 3:1 arányú etilacetát-metanol, majd 300 ml 1:1 arányú etilacetát-metanol keverékével. Az első (kezdeti) 100 ml frakció után 20 ml-es frakciókat választottunk le. A frakciókat 80-20-ig egyesítettük. Az egyesített frakciókból az oldószerek elpárologtatása után egy világosbarna szilárd anyag 279 mg-ját nyertük, mely anyag tisztaságát vékonyréteg-kromatográfiával megvizsgálva lényegileg csak egy pontot kaptunk (tiszta). Az ily módon előállított 4’-dezoxivinkrisztin szabad bázis a következő fizikai jellemzőkkel (adatokkal) rendelkezik: Tömegspektrum: m/e 808 (NT), 806,707; Infraspektrum: 3465, 1745, 1687, 1220 cm 1 ; Ultraibolya-spektrum: 210, 222, 255, 290, 298 nm; 100 MHz NMR-spektrum: metil szingulett 3,88, 3,67 és 2,07 ő-nál. Ezt a barnás színű, szilárd 4’-dezoxivinkrisztint acetonban feloldjuk, és az acetonos oldatot 0,96 ml (0,36 mólos) 2% térfogat/térfogat kénsavval kezeljük etanolban. A kapott zöld színű oldatot egy éjszakán át körülbelül 0 °C hőmérsékleten tartjuk. Akristályosodás megindítására alkalmazható az edény falának dörzsölése vagy az oldat kristálycsírákkal való beoltása. A szilárd, kristályos 4’-dezoxi-vinkrisztin szulfátot szűréssel választjuk el az oldattól, és hideg acetonnal mossuk. A szül fát só kismértékben oldódik acetonban, ezért a szürletet szárazra pároljuk, és a visszamaradt anyagot etanolból újból kikristályosítjuk. Az etanólból kinyert 4’-dezoxivinkrisztin szulfátot szüljük, és etanollal mossuk. A kapott 4-dezoxivinkrisztin szulfát teljes mennyisége 266 mg. Hasonló módon lehet a 4’-dezoxi VLB „B” 794 mgját oxidálni 10ml jégecetben és Imi vízben oldott 900 mg krómtrioxiddal úgy, hogy 4’-dezoxi-l-formilleurozidint kapjunk. Az oxidációs keverékből közvetlenül, a tisztítás előtt kinyert maradék vékonyrétegkromatogramján egy főfolt, egy kisebb folt és más anyagok igen kis mennyiségére utaló foltok voltak láthatók. Vízmentes etanolból való újabb kristályosítás után olyan, vékonyréteg-kromatográfiával lényegileg egy pontot adó, kristályos anyag nyerhető, amelynek elválasztása szűréssel történik, és a kristályos anyagot szűrés után hideg etanollal mossuk. Az ily módon nyert kristályos szabad bázist 50 g szilíciumdioxidon kromatografáljuk, eluálószerként 1:1 metiléndiklorid/etilacetát oldószert használva, mely 20, 30, 45 és 60 térfogatiban tartalmaz metanolt. Az eluátum mennyisége a következőképpen alakul: Rendszer Mennyiség 1:1 20% 200 1:1 30% 100 1:1 45% 100 1:1 60% 400 Ezek a következő frakciókat adják: Frakció Eluátum térfogata 1 160 ml 2 100 ml 3 50 ml 4 50 ml 5 50 ml 6 120 ml 7 120 ml A 4-7 frakciókat egyesítjük, és ebből 597 mg barna színű maradékot, majd ennek etanolból való átkristályosítása után 435 mg fehér, kristályos 4’-dezoxi-l-formilleurozidint nyerünk. A vegyület fizikai jellemzői a következők: Tömegspektrum: m/e 808 (M*’), 806, 777, 775,336,138, 136; Infraspektrum: j>(CHC13) 3470, 1743, 1690, 1222 cm-1 ; Ultraibolya-spektrum: (C2 Hs OH)210, 222, 254, 290, 298. 100 MHz NMR-spektrum: metil szingulett 3,87, 3,65 és 2,075. pK4 = 9,0 és 4,9 (66% DMF-ben). A szulfátsót úgy állítjuk elő, hogy a szabad bázis 435 mg-ját 10 ml forró etanolban feloldjuk, és ehhez hozzáadunk 1,5 ml 2%-os kénsavat etanolban. Ezt lehűtve nyerjük a kristályos 4-dezoxi-1-formilleurozidin szulfátot. A termék UV-spektruma(HeOH):X = 2985, 290, 263, 255,221 és 209. 2. példa 4’-Dezoxi-4-dezacetil-1 -formilleurozidin előállítása. Az 1. példában megadott módon, a megfelelő 4-dezacetil-vegyületből állítjuk elő a cím szerinti terméket. A vegyület a következő fizikai jellemzőkkel rendelkezik: Tömegspektrum: m/e 766 (Mf), 764, 735, 254, 252, 205, 138, Infraspektrum: (CHC13) 3450, 1734, 1680, 1596, 1495, 1456, 1434 m'1. Az I. általános képletű találmány szerinti vegyületek, különösen azok, melyekben R1 acetoxicsoport, hatásos 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 65 3
