182916. lajstromszámú szabadalom • Eljárás 1,3-benzoxazin-2,4-dion-származékok előállítására
1 182916 2 Analgetikus hatás vizsgálata Az (I) általános képletű vegyületek analgetikus hatását 20-25 g súlyú hím egereken vizsgáljuk. A vizsgálandó vegyületbŐl gumiarábikum segítségével 5 %-os szuszpenziót készítünk és ösophag-szonda segítségével adjuk be az állatoknak. A beadott oldat térfogata: 25 ml/kg; az oldat koncentrációját a kívánt dózis értékétől függően változtattuk. Az állatoknak 20 g testsúlyra számítva 0,2 ml acetilkolinbromid-oldatot (amely 0,32 mg/ml hatóanyagot tartalmaz) adunk be intraperitoneálisan. Az acetilkolinoldatot 5 perccel a vizsgálati anyag beadása előtt adjuk egy 5 állatból álló csoportnak. Ezt követően 5 perc eltelte után injekció formájában beadjuk a vizsgálandó vegyület oldatát, majd 20, 40, 80, 120 és 160 perc után ismételten acetilkolint adunk be. Az 5 percen belül fellépő, fájdalomból eredő görcsöket megszámoljuk. Az analgetikus hatást az alábbi képlet alapján számítjuk ki: It = 100 - (Nt/No) • 100 = 100 (1-Nt/No) ahol It jelentése fájdalomcsillapító hatás t perc után No jelentése görcsök száma a vizsgálati anyag beadása előtt, Nt jelentése görcsök száma a vizsgálati anyag beadása után t perccel. A DA50, azaz az 50 %-os analgetikus dózisérték megállapításához minden egyes vizsgálati anyagból több dózisértékkel végeztünk vizsgálatot. Minden egyes dózisérték esetében meghatároztuk 20, 40, 80, 120 és 160 perc eltelte után az It értékét. Analgetikus hatás értékelésére ennek az 5 értéknek a középértékét vettük minden egyes dózis esetében. Az analgetikus hatás értékét a megfelelő dózis logaritmusának függvényében ábrázoltuk. A fenti görbéből megállapíthatjuk az 50 %-os analgetikus hatás értékét, azaz azt a dózist, amely 50%-os fájdalomcsillapító hatást fejt ki. A találmány szerinti vegyületek DA50 értékeit a 2. táblázat foglalja össze. 2. táblázat Példa száma Vegyület neve Dózis DA50 mg/kg-ban DLso í. 6-klór-3-metil-l ,3-benzoxazin-2,4-dion 30 233 2. 6-bróm-3-metil-l ,3-benzoxazin-2,4-dion 90 717 3. 6-klór-3-propil-l ,3-benzoxazin-2,4-dion 240 >650 8. 6-klór-3-furfuril-l ,3-benzoxazin-2,4-dion 280 >550 9. 6-klór-3-(o-fenoxi-fenil)- 1,3-benzoxazin-2,4-dion 675 >750 10. 6-klór-3-(o-feniltio-fenil)- 1,3-benzoxazin-2,4-dion 650 >1500 11. 6-klór-3-etil-l ,3-benzoxazin-2,4-dion 172 >250 Akut toxicitás vizsgálata Az akut toxicitás értékét 20-25 g súlyú egereken orális úton állapítjuk meg. A vizsgálathoz 6 állatból álló csoportokat alkalmazunk. Az állatoknak geometrikus sor szerint növekvő mennyiségű dózisokat adunk. A vizsgálati idő 72 óra. Az 50 %-os letális dózis értékét (DLso) logaritmuspapírra felvitt adatokból grafikusan állapítjuk meg. A DLS0 értékeket ugyancsak a 2. táblázatban tüntettük fel. Gyulladásgátló hatás Sprague—Dawley törzshöz tartozó hím patkányokat alkalmazunk a gyulladásgátló hatás értékelésére. Az állatok talpán 1%-os Carragenin-oldat szubplantáris beadásával ödémát idézünk elő. A talp méretének változását 2 és 5 órával a vizsgálati anyag beadása után orális módon értékeljük (pletizmométerrel). A gyulladásgátló hatást a kontroll csoporthoz viszonyítva számítjuk ki. Az 1. példa szerint előállított származék vizsgálata során kapott eredményeket a 3. táblázat tünteti fel. 3. táblázat Példa száma Vegyület Dózis (mg/kg) Gyulladásgátló hatás 2 óra 5 óra 1. 6-klór-3-metil-l,3-benzoxazin-2,4-dion 100 26% 30% Az (I) általános képletű vegyületek kiváló farmakodinamikus tulajdonságokkal rendelkeznek, ennek következtében állatgyógyászatban, továbbá humán kezelésben fájdalomcsillapító, lázcsillapító és gyulladásgátló szerként nyernek alkalmazást. A gyógyászati készítményeket oly módon állítjuk elő, hogy valamely (I) általános képletű vegyületet gyógyászatilag megfelelő hordozó anyagokkal elegyítünk. A gyógyászati készítményeket elsősorban a traumatológiai, sebészeti, reumatológiai, sztomatológiai, orr-fül-gégészeti, tüdőgyógyászati, kardiológiai, nőgyógyászati, urológiai kezelésekhez alkalmazhatjuk. A találmány szerinti vegyülettel készült gyógyászati készítmények különféle megbetegedések, így például fejfájás, migrén, fogfájás, neuralgia, menstruációs fájdalmak, gyulladásos reumatizmus, izületi fájdalmak, lázas állapotok, reuma, influenza és egyéb fertőzések esetében alkalmazhatók eredményesen. A humán gyógyászathoz javasolt dózis nagysága napi 100—300 mg. A hatóanyagot tabletta, kapszula vagy kúp formájában adhatjuk be. A találmány szerinti vegyületekkel előállított galenusi készítmények összetételét adjuk meg a továbbiakban. Tabletta 6-klór-3-metil-l,3-benzoxazin-2,4-dion 100 mg Avicel pH-102 100 mg Primojel 10 mg Aerosil-200 1 mg magnézium-sztearát 2 mg A tabletta súlya: 213 mg 3 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 65
