182902. lajstromszámú szabadalom • Eljárás vérnyomáscsökkentő hatású dipeptid származékok előállítására
1 182 902 2 majd az eluálást ugyanezzel az oldószereleggyel készült 3 térfogat %-os piridin-oldattal végezzük. A terméket tartalmazó frakciókat összeöntjük, betöményítjük, fagyasztva szárítjuk és metanolos oldás után LH-20 márkanevű gélen végzett gélszűréssel tisztítjuk, 0,54 g mennyiségben izomerkeverékként a cím szerinti vegyületet kapva. A D20 és NaOD elegyében felvett NMR spektrumban 1,18 p.p.m.-nél (3H) központosán egy dublett, 7,3 p.p.m.-nél (10H) 2 egymással fedésben lévő szingulett, 2,95 p.p.m.-nél (3H) egy szingulett, továbbá 1,4^. 2.1 és 2,3-4,'4 p.p.m. tartományokban széles többszörös abszorpció észlelhető. A szililezett termék tömegspektrumában a diszililezett származéknak megfelelő molekulaion jelenik meg 556 m/e egységnél. 39. példa N-(l-Etoxikarbonil-3-fenil-propil)-L-alanil-L-prolinamid L-alanil-L-prolinamidot állítunk elő terc-butoxikarbonil-L-alanint L-prolinamiddal kondenzálva a szokásos módon diciklohexil-karbodiimid jelenlétében, metilénklorid és dimetil-formamid 4:1 térfogatarányú elegyében. Az így kapott amidot LH-20 jelzésű gélen metanolban végzett oldás utáni gélszűréssel tisztítjuk, majd a tercbutoxikarbonil védőcsoport eltávolítása céljából 4 mólos etil-acetátos hidrogén-klorid-oldattal kezeljük. Az ekkor kapott L-alanil-L-prolinamid-hidrokloridból 0,5 g-ot feloldunk 10 ml vízmentes etanolban,majd a kapott oldatot ekvivalensnyi mennyiségű trietil-aminnal semlegesítjük, ezután pedig a felszabadult L-alanil-L-prolinamidot 2,4 g 2-oxo-4-fenil-vajsav-etilészterrel kondenzáljuk a 30. példában ismertetett módon, molekulaszitát és 0,30 g nátrium-ciano-bór-hidridet használva. Ebben a példában a termék a 8,5-es pH-jú kloroformos extraktummal különíthető el. Az extraktumot vákuumban bepároljuk, majd 1:1 térfogatarányú etanol-víz elegyben feloldjuk. Az oldatot ezután H4-formájú Dowex 50 gyantából ugyanezzel az oldószereleggyel készült kromatográfiás oszlopra felvisszük, az eluálást ugyanezzel az oldószereleggyel készült 2 térfogat %-os piridin-oldattal végezve. A terméket tartalmazó frakciókat összeöntjük, majd a terméket elkülönítése után LH-20 jelzésű gélen metanolban kromatográfiásan továbbtisztítjuk. Ezt követően az oldószert vákuumban lehajtjuk, 0,40 g mennyiségben a cím szerinti vegyületet kapva diasztereoizomer-keverékként. A deuterokloroformban felvett NMR spektrumban 1.1 —1,5 p.p.m.-nél (6H) egy dublettet átfedő triplett, 1,5—4,7 p.p.m. tartományban (15 H) 5 multiplett és 7,17 p.p.m.-nél (5H) egy szingulett észlelhető. A szililezett termék tömegspektrumában a fő csúcsok 477 (monoszililezett származék) és 519 (diszililezett származék) m/e egységnél észlelhetők. 40. példa N-(l-Karboxi-3-fenil-propil)-L-alanil-L-prolinamid A 39. példában ismertetett módon előállítható L-alanil-L-prolinamidot a második példában ismertetett módon 2-oxo4-fenil-vajsawal kondenzáljuk nátrium-cianobór-hidridet alkalmazva etanol és víz 1:1 térfogatarányú elegyében. Ioncserélő gyantán végzett kromatografálás után a terméket tartalmazó frakciókat vákuumban kis térfogatra betöményítjük, vízzel átöblítjük és fagyasztva szárítjuk, a cím szerinti vegyületet kapva diasztereoizomer-keverékként. NMR-spektrumában 7,35 delta-értéknél aromás abszorpció és 1,55 delta-értéknél diasztereomer metilcsoportoknak megfelelő duplett-pár észlelhető. 4L példa N- [ 1 -(S)-Hidroxiaminokarbonil-3-fenil-propil ] - L-alanil-L-prolin 0,19 g. a 31. példában ismertetett módon előállítható N-(l -etoxikarbonil-3-fenil-propil)-L-alanil-L-prolinmaleátsó 1 ml etanollal készült hideg oldatához hozzáadjuk 0,85 g kálium-hidroxid 0,57 ml etanollal készült oldatát, majd cseppenként beadagoljuk 0,07 g hidroxiamin-hidroklorid 0,9 ml, 0,06 g kálium-hidroxidot tartalmazó etanollal készült s/.uszpenzióját. Az így kapott reakcióelegyet ezután jeges fürdőben 2 órán át, majd szobahőmérsékleten egy éjszakán át állni hagyjuk. Ezt követően a felülúszó fázist dekantáljuk, 10 ml vízzel hígítjuk és az így kapott vizes elegy pH-ját sósavval 2.5-re beállítjuk. Kloroformmal végzett mosás, semlegesítés cs fagyasztásos szárítás után a kapott terméket XAD-2- jelzésű gyantán kromatográfiásan tisztítjuk, a kromatografáláshoz 0„1 mólos ammónium-hidroxid-oldatból és metanolból kialakított gradienst használva. így a cím szerinti vegyületet kapjuk. Szililezése után a tömegspektrumban 579 m/e egységnél a triszililezett származéknak megfelelő molekulaion észlelhető. NMR spektruma megfelel a várt szerkezetnek. 42. példa N-(l-Karboxi-3-metil-butil)-L-alanil-L-triptofán 414 mg 4-metil-2-oxo-pentánkarbonsavas-nátriumsó és 150 mg L-alanil-L-triptofán vizes oldatának pH-ját bázissal 7-re beállítjuk, majd 103 mg nátrium-ciano-bórhidridet adunk hozzá. Az így kapott reakcióelegyet szobahőmérsékleten néhány napon át állni hagyjuk, majd a terméket erősen savas ioncserélő gyantán adszorbeáltatjuk. A gyantát 2 térfogat % piridint tartalmazó vízzel eluáljuk. A termékben gazdag frakció fagyasztásos szárításakor 189 mg mennyiségben pelyhes fehér csapadékot kap\mk. A tömegspektrumban 389 m/e egységnél a molekulaionnak megfelelő csúcs, 187 m/e egységnél a 2-(3-indolil)-l-karboxi-l-etilcsoportnak megfelelő csúcs és 158 m/e egységnél l-metil-2-aza-3-karboxi-5-metilhex-l-il-csoportnak megfelelő csúcs észlelhető. A D20- ban felvett NMR spektrum a várt szerkezetet igazolja. 43. példa N-(l-Karboxi-3-metil-butil)-L-hisztidil-L-leucin A 42. példában ismertetett módon 4-metil-2-oxo-pentánkarbonsavat és L-hisztidin-L-leucint kondenzálunk nátrium-ciano-bór-hidrid jelenlétében a cím szerinti vegyületet kapva. Ebben az esetben a terméket az ioncserélő gyanta alkotta oszlopból 10 %-os ammóniumhidroxid-oldattal eluáljuk. A tömegspektrumban 408 m/e egységnél molekulaion észlelhető, amely a diszililezett származék mínusz 18 értéknek megfelelő. Az NMR spektrum a várt szerkezetet igazolja. 44. példa N-(l-Karboxi-3-metil-butil)-L-fenilalanil-L-arginin A 42. példában ismertetett módon 4-metil-2-oxo-pentánkarbonsavat és L-fenilalanil-L-arginint nátrium-cianobór-hidrid jelenlétében kondenzálunk, a cím szerinti vegyületet kapva. A terméket az ioncserélő gyanta alkotta II 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 65
