182902. lajstromszámú szabadalom • Eljárás vérnyomáscsökkentő hatású dipeptid származékok előállítására
1 182 902 2 34. példa N-(l-Butoxikarbonil-3-fenil-propil)-L-alani]-L-prolin 452 mg N-benziloxikarbonil-L-alanil-L-prolin-3-butilészter 5 ml benzollal készült oldatát 150 mg 10% fémtartalmú szénhordozós palládiumkatalizátor jelenlétében hidrogénezzük a nitrogén-védőcsoport eltávolítása céljából. Szűrés és az oldószer elpárologtatása után a kapott L-alanin-L-prolin-3-butilésztert feloldjuk 8 ml tetrahidrofuránban, majd az így kapott oldathoz 1,41 g 2-oxo- 4-fenil-vajsav-butilésztert és 3 g porított molekulaszitát adunk. Ezt követően néhány óra leforgása alatt 150 mg nátrium-ciano-bór-hidridet adagolunk kis adagokban, majd a reakcióelegyet szobahőmérsékleten egy éjszakán át keverjük. Szűrés és vákuumban végzett bepárlás után a kapott maradékot 25 ml trifluorecetsawal szobahőmérsékleten 2 órán át állni hagyjuk. Ezt követően a trifluorecetsavat ledesztilláljuk, majd a maradékot ioncserélő gyantán végzett adszorbeáltatás és gélszűrés (LH-20) útján tisztítjuk. A termékben gazdag frakciók szárítása és bepárlása után 182 mg mennyiségben a cím szerinti vegyületet kapjuk izomerek keverékeként. Szilikagélen etil-acetát, butanol, víz és ecetsav 1.1:1:1 térfogatarányú elegyével mint futtatószerrel végzett vékonyrétegkromatográfiás vizsgálatban 0,67 és 0,72 Rf-értékekkel két folt észlelhető. A tömegspektrumban csúcs 548-nál (diszililezett molekulaion) és 476-nál (monoszililezett molekulaion) észlelhető. Az izomereket fordított fázisú nagynyomású folyadékkromatografálással választhatjuk el, N-[l-(S)-butoxikarbonil-3-fenil-propil]-L-alanil-L-prolint kapva. 35. példa N- ( 1 -Etoxikarbonil-3 -fenil-propil) -L-alanil-L-prolinetilészter 0°C-on 0,63 g N-(l-karboxi-3-fenil-propil)-L-alanil- L-prolin 9,7 ml etanollal készült oldatát hidrogén-klorid gázzal telítjük, majd a telített oldatot szobahőmérsékleten egy éjszakán át állni hagyjuk. Ezután a fölös hidrogén-kloridot és etanolt vákuumban eltávolítjuk, halványsárga olajat kapva, amelyet gélszűréssel (LH-20 oszlopon) tisztítunk. így 0,39 g mennyiségben a cím szerinti vegyületet kapjuk, amely vékonyrétegkromatográfiásan egyetlen foltot ad. Az NMR spektrumban aromás gyűrűnként két etilcsoport észlelhető. A tömegspektrumban 404 m/e egységnél egy molekulaion észlelhető. 36. példa N-(l-Karboxi-3-fenil-propil)-L-alanil-L-4-alfa-metoxiprolin L-Hidroxi-prolinból Adams, E. és munkatársai módszerével [J. Biol. Chem., 208. 573 (1954)], azaz metanolos hidrogén-klorid-oldattal észterezve L-4-alfa-metoxiprolin-metilészter-hidrokloridot állítunk elő, majd az utóbbi vegyületet metilén-kloridban a korábbiakban ismertetett módon butoxikarbonil-L-alaninnal kondenzáljuk diciklohexil-karbodümid jelenlétében. A közbenső termékként ekkor kapott vegyületet szilikagélen kromatográfiásan tisztítjuk, eluálószerként etil-acetát és hexán 1:1 arányú elegyét használva. Ezt a köztiterméket ezután acetonitril és víz elegyében nátrium-hidroxiddal hidrolizáljuk, majd a reakcióelegy pH-ját 7,5-re beállítjuk és fagyasztásos szárítást végzünk. Az ily módon a metilészterezőcsoporttól megfosztott köztiterméket ezután az 10 alanil-rész nitrogénatomját védő csoport eltávolítása céljából etil-acetátban szokásos módon 4 mólos hidrogénklorid-oldattal kezeljük. Az így kapott L-alanil-L-4-alfametoxi-prolinból 0,54 g-ot ezután 2 g 2-oxo-4-fenil-vajsawal kondenzálunk 6 ml vízben, a 21. példában ismertetett módon, 0,43 g nátrium-ciano-bór-hidrid alkalmazása mellett. Az ugyanebben a példában említett módon ezután a terméket elkülönítjük, 0,92 g mennyiségben diasztereoizomerek keverékét kapva. A D20-ban felvett NMR spektrumban 1,58 p.p.m.-mél központosán felhasadt dublett (3H), 3,37-nél (3H) és 7,35 p.p.m.-nél (5H) szingulettek, 1,9-3,5 tartományban komplex abszorpció és 4,0—4,6 p.p.m.-nél széles multiplett észlelhető. A tömegspektrumban a legfontosabb csúcsok 360 m/e egységnél (M-18) és 256 m/e egységnél (M-122) észlelhetők. 37. példa N- ( 1 -Benzilaminokarbonil-3 -fenil-propil) -L-alanil- L-prolin 2-Oxo-4-fenil-vajsav-benzilamid előállítása céljából feloldunk 3,0 g 2-oxo-4-fenil-vajsavat, 2,4 ml benzil-amint és 4,7 ml difenil-foszforil-azidot 60 ml hideg dimetilformamidban, majd a kapott oldathoz cseppenként hozzáadjuk 2,6 ml trietil-amin dimetil-formamidos oldatát. Ezután a reakcióelegy hőmérsékletét -10 °C körüli értéken tartjuk 2,5 órán át, majd a reakcióelegyet szobahőmérsékleten hagyjuk egy éjszakán át állni. Ezt követően a dimetil-formamidot vákuumban lehajtjuk, majd a maradékot víz és etil-acetát között megosztjuk. A szerves fázisból elkülönített anyagot szilikagélen oszlopkromatografáljuk, etil-acetát és hexán 1:4 térfogatarányú elegyét használva eluálószerként. A terméket tartalmazó frakciók bepárlásakor 2,2 g mennyiségben kristályos N-benzil-2-oxo-4-fenil-butiramidot kapunk. Az utóbbi vegyületből 1,26 g-ot 0,19 g L-alanil-L-prolinnal kondenzálunk 0,125 g nátrium-ciano-bór-hidridet használva etanolban a 33. példában ismertetett módon. A nyers termék gélszűréssel (LH-20) végzett tisztítása után diasztereoizomerek keverékeként a cím szerinti vegyületet kapjuk. A deuterokloroformban felvett NMR spektrumban 1,1 p.p.m.-nél (3 H) dublett, 7,3 p.p.m.-nél (10 H) szingulettek egymáshoz közeli párja, továbbá 1,6-2,3 (6H), 2,3-2,9 (2H), 2,9 3,8 (4H) és 4,0-4,6 (3H) p.p.m. tartományokban komplex abszorpció észlelhető. Á szililezett anyag tömegspektrumában a fő csúcsok 509 (monoszililezett származék) és 581 (diszililezett származék) m/e egységeknél észlelhetők. 38. példa N-(l-Karboxi-3-fenil-propil)-L-alanil-L-N-metilfenilalanin Ha a 19. példában ismertetett módon járunk el, de az ott használt tiazolidin-karbonsav-észter helyett N-metil-L-fenilalanin-metilészterből indulunk ki, akkor L-alanil-N-metil-L-fenilalanint kapunk. Az utóbbi vegyületből 0,85 g-ot 3,02 g 2-oxo-4-fenil-vajsawal kondenzálunk 0,64 g nátrium-ciano-bór-hidrid jelenlétében a korábbiakban ismertetett módon vizes közegben. A reakcióelegyet ezután 1,5-es pH-ra savanyítjuk, majd dietiléterrel extraháljuk. Az extraktumot bepároljuk, majd a maradékot 70% metanol és 30% víz elegyében oldjuk. VC-formájú Dowex 50 gyantából ugyanezzel az oldószereleggyel készült oszlopra a kapott oldatot felvisszük, 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 65
