182554. lajstromszámú szabadalom • Eljárás intrvénásan alkalmazható szérumfehérje-készítmény előállítására
1 182554 2 A találmány intravénásán alkalmazható szérumfehérje-készítmény előállítására szolgáló eljárásra vonatkozik, melynek során emberi vérfehérje-oldatból kiindulva olyan új, stabilizált, univerzálisan alkalmazható készítményt állítunk elő, amely vizes, izotóniás oldatban proteineket tartalmaz oldva, amely proteineknél a globulin albumin arány lényegesen magasabb megfelel a natív vérszéruménál. A szérumfehérje-készítmények értékes vér-származékok. A bennük levő albumin transzport-proteinként szerepel. A készítmények olyan további funkcionális proteineket tartalmaznak, mint amilyenek a transzferrin, a cöruloplazmin, az aj-antitripszin és különösen az immunglobulinok. Jelentősek az antitestek, amelyek a y-globulinban vannak. Az általuk kiváltott passzív immunizálás folytán alkalmasak profilaktikus felhasználásra és segítik a vérveszteség folytán legyengült szervezetet. Az embereknél intravénásán alkalmazható szérumfehérje-készítménynek két fontos követelményt kell kielégítenie : 1. Az eljárásnak tárolható terméket kell eredményeznie; 2. A kórokozókat (vírusokat vagy baktériumokat) megbízhatóan semlegesíteni kell. Ez különösen a vírushepatitisz kórokozójára vonatkozik. A szérumfehérje-készítményeket általában a stabil proteineknek a szervezet által elviselhető elektrolittartalmú vizes oldata formájában bocsátják rendelkezésre. Az összes protein-tartalom szokásosan 5 súlyszázalék (azaz 5000 mg 100 ml-re). Az irodalomból ismeretes egy, intravénásán alkalmazható szérűmfehérje-készítmeny előállítására szolgáló eljárás, amelyben a szérumfehérjét többlépéses eljárással közvetlenül emberi vérből nyerik (W. Stephan ; „Hepatitis-Free and Stable Human Serum for Intravenous Therapy; XXIV th Sc. Meeting of the Blood Research Institute, Vox Sanguin., V. 20; 442— 457. oldalak). Az ismert eljárás a következő lépésekből áll : a) donor vérből az alakos elemek eltávolítása (vértestecskék, vérlemezkék) után természetes szérum nyerése és mintegy 7,5% protein-koncentrációjú 7,2— 7,8 pH-jú szérum nyerése. b) A könnyen denaturálódó lipoproteinek eltávolítására 100 ml szérumra számolva 2,0 g Aerosil 2491/ 380-at adagolnak hozzá. (Az Aerosil a Degussa cég szilikagél termékének védjegye.) A szuszpenziót 45 °C-on 4 órán át keverik, lehűtik és az üledéket centrifugálják. A lipoproteinek kvantitatív mennyiségben megkötődnak az Aerosilen és elválnak a vérszérumtól. c) Az oldatot a még jelenlevő lebegő részecskéktől finom szűrőn történő átszűréssel megszabadítják. d) Sterilizálás céljából az oldathoz 5 °C-on 100 ml-re számolva 0,3 g ß-propiolaktont adnak (pH = 8,0) és UV-fénnyel besugározzák. A nyert szérum összetétele a következő (100 ml térfogatban levő 5,000 g anyagra vonatkoztatva): Anyag: Mennyiség: Funkció : albumin 3,060 g onkotikus hatékonyság, a tápanyagok, vitaminok, hormonok, gyógyszerek szállítása IgG 0,820 g vírusok és baktériumok elleni antitest IgA 0,185 g nyálkahártyavédő antitest IgM 0,075 g baktériumok és toxinok elleni antitest prealbumin 0,017 g tiroxin megkötés a1-antitripszin 0,162 g proteolitikus enzimek inot2-makroglobulin 0,141g hibitorai haptoglobin 0,110 g a szabad hemoglobin megkötése és szállítása hemopexin 0,075 g a szabad hemin megkötése és szállítása transzferrín 0,195 g az Fe2 + szállítása cöruloplazmin 0,014 g a Cu2+ peroxidázként való szállítása kolinészteráz 3,0 E/ml a szukcinilkolin hasítása. A táblázatból kitűnik továbbá az egyes szérumfehérje-készítmény komponensek funkciója is. Az ismert eljárás szerint előállított készítmény a kereskedelemben kapható. Komplikációmentesen alkalmazható. Az előállítás és alkalmazás szempontjából azonban hátrányos, hogy az értékes kiindulási anyag — emberi vér — folytán a készítmény nagyon költséges és nem áll kielégítő mértékben rendelkezésre, ezenkívül hogy a különösen hatásos IgG, IgA és IgM antitest-tartalom ezen anyagoknak az emberi vérben levő koncentrációjának megfelelően viszonylag csekély. A 19 20 423 számú NSZK-beli közzétételi irat eljárást ismertet vérplazma és vérszérum frakcionálására, melynek során albumint, a- és ß-globulint és hemopigmenteket állítanak elő. Az elválasztott frakcióban a fehérje-koncentráció víz hozzáadásával változtatható. A denaturált hőérzékeny globulinok és károsodott hemopigmentek elválasztását hőkezeléssel és hidrogénperoxidos kezeléssel végzik. Az eljárással tehát stabil plazma fehérjeoldatot kapnak, mely hemopigmenteket és hőre érzékeny globulinokat nem tartalmaz. Ezen szabadalmi leírásban nem tesznek említést a Cohn-frakciók keveréséről, és olyan szérum fehérje-készítmény .előállításáról, amelyekben a hatékony antitestek aránya — mely a gamma-globulintartalom függvénye — magasabb. Az 572 745 számú svájci szabadalmi leírás eljárást ismertet plazma proteinek frakcionálására. Bizonyos globulinoknak a kiindulási anyagból polietilén-glikollal történő kicsapása után a csapadékot kation- illetve anioncserélőkön végzett abszorpciós és deszorpciós lépések után, majd ezt követő kiesapás után az egyes alkotórészeket az eluátumokból frakcionálják. így például stabil IgG-oldatot kapnak, amely klinikai célokra alkalmas. Ezen hivatkozás ugyancsak nem említ re5 10 i5 20 25 30 35 40 45 50 55 60 3
