182544. lajstromszámú szabadalom • Eljárás hidroxi-alkil-purinok aminoalkanollal és p-acetamido-benzoesavval alkotott komplexei előállítására
182 544 19 20 Vizsgált vegyület NPT száma Szubsztituensek R1 R2 X Y Hemadszorpció gátlás %-a. Vizsgált vegyület konoentrációja (,«(g'ml) 10 10—100 100 15432 H-ch3-NH2 DIPPAcBA 48 62 15433-ch3 H-nh2 — 32 0 15434-ch3 H-nh2 DIP-PAcBA 41 62 15443-ch3 H —OH — 0 0 15444-ch3 H —OH DIP-PAcBA 44 54 15417-c»h13 H —OH — 18 58 60 15418-C6H1s H —OH DIPPAcBA 16 46 52 15392 —c6h13-ch3 —OH — 86 100 100 15410-c6h13-ch3 —OH DIP-PAcBA 58 96 96 15426 C«Hi3-ch3-nh2 — 50 96 100 15110 — — DAIP-PcBA 0 0 20 3. tábláza* Herpes vírus replikációjának gátlása IA, illetve Ib általános képletű 9-(hidroxi-alkil)-purin-szárrnazékokkal X Í'T Szubsztituensek Foltok szám R1 Rz X Y vizsgálat kontroll (15—150) g/ml 15392-c9h13-ch3 —OH — 98% 15417-c6h13 —h —OH 15418-c6hí3 — —OH DIPPAcBA 15410-^6Hí3-ch3 —OH DIPPAcBA 98% Biológiai aktivitás. Módszerek. Tnfluenzaellenes hatás. (Hem adszorpció meghatározása.) Egyrétegű szövetkultúra sejtek influenzavírussal való fertőzésére a sejtfelület úgy változik meg, hogy tengeri malac eritroeiták adszorbeálódhatnak a sejtfeliiletre. Az adszorbeált sejtek gócainak száma (hemadszorpciós gócokat képező egységek, HAFFU) a fertőzők<'>pesség kvantitatív mértéke. A módszer a követ kező. Az egyrétegű kultúrákat másodlagosan a következő módszerrel tenyésztjük tovább: A táptalajt kiöntjük, és az egyrétegű kultúrát kétszer mossuk körülbelül 50—50 ml kalcium- és magnéziummentes, foszfáttal pH 7,2-re pufferolt sóoldattal (PBS) (GIBCO No. 419). fd. Exp. Med. 98, 167 (1954)]. Minden egyes palackhoz 1 ml fripszin—EDTA (etilén-diamin-tetraecetsav) oldatot (GIBCO No. 530L) adunk 37 °C-on, amely 0,5 g (1:250) tripszint és 2,0 g EDTA-t tartalmaz literenként módosított Puck A sóoldatban [J. Exp. Med. 106, 145 (1957)] és óvatos rázással eloszlatjuk az egyrétegű kultúra felett. A palackokat utána 37°C-os 40 inkubátorba helyezzük körülbelül 3—5 percre a sejtek fellazulásától függően. Időnkénti rázás szükséges. Minden egyes palackhoz 10 ml szaporító táptalajt adunk, és a sejteket szétoszlatjuk a szuszpenziónak a pipettába való beszívatásával és kifolyatásával. Egy 45 sorozat palackot megtöltünk, és a sejtszuszpenziót szaporító táptalajjal 7—8,5-104 sejt/ml-re hígítjuk. A szaporító táptalaj Earle-sókat [Natl. Cancer Inst. 4, 167 (1943)] és HEPES-puffert (GIBCO No. 236) tartalmazó Eagle-féle minimál táptalajból (MÉM) 50 [Science 174, 500 (1971)] áll, amelyhez az alább felsorolt kiegészítő anyagokat adjuk, és 87 ml-re feltöltjük MEM-mel : 10 ml borjúembrió szérum (FCS, GIBCO No. 614 Hl) 1 ral L-glutamin oldat (200 mólos, GIBCO No. 503), 55 1 ni klór-tetraciklin oldat (5000 pg/ml) (GIBCO No. 528), 1 ml 10000 egység penicillint, 10000 pg sztreptomicint és 10000 pg neomicint tartalmazó oldat (PSN, GIBCO No. 564). 60 A sejteket Linbro-féle sejtkultúra tálcákon (sejt-Százalékos gátlás
