182049. lajstromszámú szabadalom • Eljárás D-homo-szteroidok előállítására
182.049 19,5 g 3'*21-di3cetoxi-17 \-metil-D-homo-5-pregnén-20-ont kapunk, mely éter/pentánból átkristályositva 135,5-137,5°C-on olvad,meg. e/ 24,4 g 3 .21-diacetoxi-17 r-metil-D-homo-5-i;jregnén-20-ont 250 ml metílén-kloridban odlunk, hozzáadunk 250 ml 1%-oa metanolos kálium-hidroxid-oldatot éa 25 percig visszafolyatás közben forraljuk. Ekkor a rekacióelégyhez 3 ml jégecetet adunk, vákuumban bepároljuk, a maradékot; t e t ra hi dr of uránnal felveaazük éa a kapott oldatot vákuumban bepároljuk. A maradékot acetonból átkriatályoaitva 15,8 g 198-202°C olvadáapontu 3 ^,21-dihidroxi-r/yT -metil-D-homo-5~pregnén-20-ont kapunk. f/ 11,7 g 3 -',21-dihidroxi-17^ -metil-D-homo-5-pregnén-20- -onhoz 150 ml dimetil-formamidot, 20 ml ecetsavanhidridet éa 1,1 g ólom-diacetátot adunk és szobahőmérsékleten 90 percig keverjük. Ezután az elegyet jéghideg nátrium-klorid-oldatba öntjük, a kivált terméket leazivatjuk éa metilén-kloridban oldjuk. A metílén-kloridos-oldatot vízzel mossuk, szárítjuk és vákuumban bepároljuk. A kapott terméket metilén-kloríd/diizopropil-éterbol átkriatályoaitva 11,6 g 188,5-191ÖC olvadáspontu 3^-hidroxi-21-acetoxí-17'l -metil-P-homo-5-pregnén-20-ont kapunk. g/ 20,5 g 3 ■*~hídroxi~21-acetoxi-17^~metil~D-homo-5-pregnén-20-onhoz 500 ml toluolt és 20 ml ciklohexanont adunk és addig forraljuk, amig néhány ml-t ledesztillálunk. Ezután az elegyhez 50 ml toluolban oldott 4,4 g alumínium-izopropilátót adunk és az elegyet még 1 óráig olyan erősen melegítjük, amíg némi oldószer átdesztillál. . A reakcióelegyet lehűlni hagyjuk, etil-acetátta.l higitjuk, az etil-acetát-f ázist ÎH kénsavo Idát tál és. vízzel mossuk és vákuumban bepároljuk. A maradékot szilikagéloszlopon kromatog-rafálva tisztítjuk, aceton/hexánból átkrístályositjuk és 15,7g 200,5-202°0 olvadáspontu 21-acetoxi-17cl—metil-D-homo-4-pregnén-3,20-diont kapunk. h/ 1 % corn steep liquorból, 1 % szójaporból és 0,005 % szójaolajból álló, pH 6,2-re beállított, 30 percig 120öC-on autoklávban sterilezett 500 ml tápoldatot tartalmazó 2 literes Erlenmeyer-lombikot Curvularia lunata /NRRL 2380/ liofilizált tenyészetével oltjuk be és 30°C-on 72 óráig rotációs rázógépen rázatjuk. Ezzel az előtenyészettel azután l % corn steep liquorból, 0,5 % keményítőcukorból és 0,005 % szójaolajból álló, pH 6,2-re beállított, 121°C-on éa 1,1 atü-n sterilezett 15 liter médiumot tartalmazó rozsdamentes acélból készült 20 literes erjesztő kádat oltunk be. Silicon SH habzásgátló hozzáadásával 29°C-on, levegőztetés /10 liter pro perc/ mellett, 0,7 atü nyomáson és keverés /220 fordulat pro perc/ közben 24 óráig csiráztatjuk. A tenyésztőié 1 literét steril körülmények között 1 % corn steep liquorból, 1,25 % szójaporból és 0,005 szójaolajból álló, a fentiek szerint sterilezett 14 liter tápoldathoz adjuk hozzá és azonos körülmények között tenyésztjük. 6 óra múlva 150 ml dimetil-formamidban oldott 3 g 21-acetoxi-17■£-metil-D-homo-4-pregnén-3,20-diont adunk hozzá. ; 23 órai kontaktidő után az erjesztő kád tartalmát 2x10 liter jneti 1-izobutil-ketonnai kikeverjük és a kivonatot 50°C-on vízfürdőn vákuumban bepároljuk. A maradékot a szilikonolaj eltávolítása céljából többször hexánnal mossuk és aktiv szén hozzáadásával etil-acetátból átkrístályosit juk. 608 mg 200,3°C olvadáspontu tiszta 11 .- ^l-dihidroxi-r? \í-metil-D-homo-4-pregnén-3,20-diont kapunk. y 5
