182011. lajstromszámú szabadalom • Eljárás új antigén-származékok és az azokat tartalmazó gyógyászati készítmények előállítására
182.011 A G típusu poliazacharidhoz kapcsolódó dezmetil-muiamil-dlpeptid mennyiségi meghat ár ozás át az 1. példában Ismertetett Mórgan-TCIson reakció szerint végezzük. 1 mg poliszacharidhoz 80 xig dezmetíl-muramil-dlpeptid kapcsolódik. Az alkalmazott 2-acetamino-3-0£/L-l-/D-l-karbamoil-3-N-aminoetil-kar bamoil-propil/-karbamoi.U-etiï7-karbamoil-metil3- -2-dezoxi-D-glükóz-hidrokloridőt például a következőképpen állíthatjuk elő: 1 mm 61 2-acetamino-3-0-£/jíj-l-/I>-l-karbamoil-3-karboxIpro~ pil/~karbaraoil-etilj-karbamoil-metil3-2-dezoxi-D-glükózt és 2 mmól N-etil-N,-/3-dimötilamino-propll/-karbodiimid-hidrokloridot oldunk 10 ml vízben és a pH értéket sósavval 5-re állítjuk. Ezután 5 mmól etiléndiamin-dihldroklorid 10 ml vizzel készített oldatát adjuk a reakcióelegyhez, melyet 5»0 pH érték tartása mellett 6 órán át keverünk szobahőmérsékleten. Ezután egy enyhén savas Amberlit CG 50 II jelű, 2,5 x 45 cm méretű kationcserélő oszlopra visszük fel a keveréket. Az eluálást 0,05 mólos piridinacetáttal. pH 6 /300 ml/, kezdjük, és az eluáló anyag töménységét lineáris gradiens figyelembevételével 0,5 mólosig, pH 5»7 /300 ml/, növeljük. Ezeket a 2-aoetamlno-5-0-£/jj-l-/D-l-karbamoi1-3-N-arainoeti1-karbamoi1-propil/-karbamoil-etil^-karbamoil-metil3-2-dezoxi~D-Glükóz-acetátot tartalmazó frakciókat- mely frakciókat ninhidrin, illetve nagyfeszültségű elektroforézls tesztnek vetjük alá és jellemezzük - fagyasztva azáritjuk. A hldrokloriddá történő átalakítást a következőképpen végezzük: A liofilizátumot 6 ml 0,2 n sósavban oldjuk, és krómatografáljuk egy 2,5 x 90 cm méretű Bio-Gel P2 oszlopon, és eluálószerként vizet alkalmazunk. A 2-acetamino-3-0-££L-Î-/I)-l-karbamoil-3-N-aminoetil-karbamoi1-propil/-karbamoil-etil7-karbamoil-mötilj-2-dezoxi-D-glükóz-hidrokloridot tartalmazó frakciókat fagyasztva szárítjuk. A termék nagyfeszültségű elektrofoxézis alapján egységes. Az alkotórészek totálhidrolizátumban történő meghatározása alapján a mólarány a következő: 1 muraminsav: 1 L-alanin : 1 D-glutaminsav : 1 etiléndiamin. A megfelelő muramil-dipeptidekből kiindulva nyerjük a megfelelő ft*-aminoetilamid-hidroklorid-vegyületeket, név szerint* 2-acetamino-5-0-£D-l-£L-l-/D-^l-karbamoil-5-N-amlno-etil-karba-- moil-propil/-karbamoil-eti£7-karbamoil-etil5 -2-dezoxi-D-glükóz-hidroklorld 2-ben z o i1-ami n o-5-O-ÍD-l-/L-l-/D-l-kar bamoi1-3-H-amino-e t i1- -karbamoil-propil/-karbamoil-etil7’’karbamoil-etil3-2-dezoxl-D-glükóz-hidroklorid 2-benz oi 1-amin o-3~0-££Íj-1-/D-1-kar bamoil-3~N-ami nö-et il~kar bamoil-propil/-karbamoil-etiï7-karbamoil-metil3-2-dezoxi-D-glükóz-hidroklorid 2-ac e t amin o-3-0- ClL-1-/D-1-N-kar b amo i1-me t i1-kar b amo i1-3-N-a- , min o-e t i1-kar b amo i1-pr op1l/-kar b amo i1-e t i0-kar b amo i1-me t i 33 - -2-dezoxl-D-glükóz-hiűroklorid 2-benz ol1-amino-3-0- L&r1 -/D-l-karbamoil-3-N-amino-etil-karbamo i1-pr opil/-kar bamoi1-pr opi g -karbamoil-metiIJ-2-dezoxi-D- ’ -glükoz-hidroklorid 2-propioni1-aminO-3-0- fÆr1 -/D-l- kar b amo i 1—3-N-am t n o-e t i 1- kar-* bamoil-propil/~karbamöil~eti£7-karbamoil-metil3-2-dezoxi-D-glükóz-hidr oklorid 16
