182011. lajstromszámú szabadalom • Eljárás új antigén-származékok és az azokat tartalmazó gyógyászati készítmények előállítására
182.011-/rövldszénláncu/~alkil-csoportot jelent, és R„ éa Rg együttes jelentése 2 vaçy 4 szénatomot tartalmazó alkiléncsoport ia lehet, Rg hidrogénatomot vagy rövIdazénlánca alkilcaoportot éa . RlO, Rpi éa Rj_2 egymástól függetlenül adott esetben észterezett vagy amidált karboxllcsoportot jelent, éa R^ jelentése hidro-' génatom ia lehet, ujj vegyületek. Ezeket a vegyületeket agy állíthatják elő, hogy az önmagukban ismert módszerek szerint egy XI általános képletü vegyületet egy tri-/rövidszénláncu/-alkil-szilil-vegyület reakcióképes észterével reagáltatunk. Tri-/rövidszénláncu/-alkil-szilil-vegyületek reakcióképea észtereiként főként a tri-/rövidszénláncu/-alkilhalogenidek, főként a -kloridok vagy a -bromidok, bisz-/rövidszénláncu/-al~ kilacetamidok vagy -azalfamidok említhetők. A reakoiót előnyösen egy olyan oldószerben végezzük, mely aem reakcióképea hidroxll- aem reakcióképes aminocaoportot nenv tartalmaz, például dioxánban, dimetilformamidban, tetrahidrofuránban, dimetoxietánban vagy kloroformban. A következőkben a találmány szerinti eljárást részletesen ia ismertetjük. A hőmérsékleti értékeket Celsius fokokban adjuk meg. 1. példa 1 g marha-szérumalbumin 100 ml 0,1 mól nátriumhldrogénkarbonátot tartalmazó 0,5 mólca nátriumklorid-oldattal készített oldatához keverés közben 50° mg 2-acetamino-5~0-£/S-l-/D-l-karbamoil-5-szukcinimidooxikarbonil-propil/-karbamoil-etií7- -karbamoil-metil3-2-dezoxi-D-glükózt adunk. Az oldatot 4- óráír . át keverjük szobahőmérsékleten, majd szűréssel sterilizáljuk /MF - Milipore, 0,á5 m/u filter/. A konjugált marha-szérum-albumint egy Amikon UM-10 jelű szűrőn választjuk el az alacsony molekulasulyu reakciótermékektől, illetve a sóktól, végül fagyasztva szárítjuk. A marha-szérumalbuminhoz kapcsolódó muramil-peptid menynyiségi meghatározását J.M. Gbuysen és munkatársai által módosított Q-ásd ’’Methods in Bnzimology", 8, /1966/ 6297 Morgan- Elson reakcióval végezzük. Átlagosan 6Ü /ug muramil-peptid található 1 mg marha-szérumalbuminban. A kiindulási anyagként alkalmazott szukcinimidoészter a következőképpen állítható elő: 1 mmól 2-acetamino-5-0-{/Íí-l-/D-l-karbamoil-5“karboxiprop i1/-kar b amo i1-e t iU -karbamoiI-met itf-2 -dez oxi-D-glükóz, 1 mmól diclklohexilkarbodiimid és 1,1 mmól H-hidroxiszukcinimid 3 ml dimetilf or mamiddal készített oldatát egy lezárt edénybei/ a nedvesség kizárása mellett 20 órán át keverjük. A kicsapódó diciklohexilkarbamidot szűrjük, az oldószert nagyvákuumban lepároljuk, a maradékot éterrel kezeljük, majd szűrjük és szárítjuk. Az igy keletkezett szukcinlmidooxiésztert a nedvesség kizárása mellett, például nitrogénampullában tárolhatjuk. 2. példa Az 1. példában leirt eljárással előállított antigén-származékot egy aktivált agarozra kondenzáljuk. Aktivált agarőzként BIO-RAD tipusu, kereskedelemben kapható agaroz-szármázékot, az Affi-Gel 10-et használjuk. Ez egy agarozvázon N-alkil** 14
