181973. lajstromszámú szabadalom • Eljárás 3''-helyzetben acilezett makrolid antibiotikumok előállítására
25 181973 26 hidridet, és 90 °C-on 3 napig reagáltatjuk. A reakcióelegyet vákuumban bepároljuk, és feloldjuk 10 ml kloroformban, majd 10 ml híg sósavoldattal, 10 ml vízzel és 10 ml telített vizes nátrium-hidrogén-karbonát oldattal mossuk. A maradékot kevés benzolban oldjuk, és szilikagéllel töltött oszlopon benzol : aceton (20 : 1) elegygyel kromatografáljuk. A fő eluátumot vákuumban bepároljuk, és 15 ml ammóniával telített metanolban oldjuk, 2 napig szobahőmérsékleten állni hagyjuk, vákuumban bepároljuk, hozzáadunk 20 ml metanolt, és 18 órán át visszafolyatás közben forraljuk. A reakcióelegyet vákuumban szárazra pároljuk, és szilikagéllel töltött oszlopon benzol : aceton (7: 1) eleggyel eluáljuk. A 0,56 RfA-értékű anyagot tartalmazó eluátumokat szárazra párolva 280 mg terméket kapunk. RfA=0,56; RfB= =0,18. Tömegspektrum adatok (m/e): 855 (M+), 796 (M+-59), 782 (M+-73). 16. példa 3 "-Butiril-4"-propionil-leukomicin V: A 4. példában kapott 5 g 18,2'-diacetil-9-(diklór-acetil)-3,18-0-ciklo-leukomicin A5-öt feloldunk 30 ml vízmentes piridinben, hozzáadunk 15 ml propionsavanhidridet, és 100 °C-on 40 órát reagáltatjuk, A reakcióelegyet 500 ml jeges vízbe öntjük, a pH-t vizes ammónium-hidroxid oldattal 9,5-re állítjuk, és kétszer extraháljuk 300 ml kloroformmal. A kloroformos réteget vízzel mossuk, vízmentes nátrium-szulfáttal szárítjuk, majd vákuumban szárazra párolva 5,13 g port kapunk. A port szilikagéllel töltött oszlopon benzol : aceton (18: 1) eleggyel eluálva kromatografáljuk. A 0,63 Rfcértékű anyagot tartalmazó eluátumot szárazra párolva 1,5 g 18,2'-diacetiI-3"-butiril-3,18-0-ciklo-9-(diklór-acetiI)-4"-propionil-leukomicin V-t kapunk. Ezt az anyagot feloldjuk 30 ml ammóniával telített metanolban, 16 órán át állni hagyjuk, és vákuumban szárazra pároljuk. A maradékot 50 ml metanolban oldjuk, 20 órán át visszafolyatás közpen forraljuk, majd vákuumban szárazra pároljuk. A kapott maradékot szilikagéllel töltött oszlopon benzol : aceton (6 : 1) eleggyel eluálva kromatografáljuk. A 0,46 RfA-értékű anyagot tartalmazó eluátumot vákuumban szárazra párolva 1,2 g terméket kapunk. RfA=0,46; RfB=0,ll. Tömegspektrum adatok (m/e): 827 (M+), 754 (M+-73), 740 (M + -87). A magmágneses rezonanciaspektrum adatai (CDCI3, 100 MHz): 1,43 (3"-CH3); 2,57 [3'-N(CH3)2]: 3,54 (4-OCH3) ; 9,87 (CHO) ppm/ 17. példa 3"-Izovaleril-leukomicin A5: 5 g 2'-acetil-leukomicin A5-öt feloldunk 25 ml vízmentes diklór-metánban, hozzáadunk 1,64 ml vízmentes piridint, majd jeges hűtés közben belecsepegtetünk 1,77 ml diklór-acetil-kloridot, és 1 órán át kevertetjük. A reakcióelegyhez hideg vizet adunk, és 25 ml diklórmetánnal extraháljuk. A diklór-metános réteget vízmentes magnézium-szulfáttal szárítjuk, vákuumban szárazra párolva kvantitatív kitermeléssel 2'-acetil-3,9- -(diklór-acetil)-leukomicin A5-öt kapunk. 5 g fenti terméket feloldunk 50 ml vízmentes dioxánban, hozzáadunk 7,87 ml y-kollidint, majd hűtés közben belecsepegtetünk 6,62 ml izovaleril-kloridot, és 90 °C-on 80 órát kevertetjük. A reakcióelegyet 500 m! hideg vízbe öntjük, és kétszer extraháljuk 400 ml benzollal. A benzolos réteget vízmentes magnézium-szulfáton szárítjuk, és vákuumban szárazra pároljuk. A maradékot 20 ml metanolban oldjuk, hozzáadunk 20 ml ammóniával telített metanolt, és szobahőmérsékleten 30 percig kevertetjük. A reakcióelegyet 500 ml hideg vízbe öntjük, kétszer extraháljuk 400 ml benzollal, vízmentes magnézium-szulfáton szárítjuk, és vákuumban szárazra pároljuk. A maradékot szilikagéllel töltött oszlopon kromatografáljuk benzol : aceton (15 : 1 ; 7 : 1 és 5 : 1) eleggyel végzett gradiens elúcióval. A fő frakciókat egyesítjük, és vákuumban szárazra párolva 1,25 g nyers 2'-acetil-3''-izovaleril-leukomicin A5-öt kapunk. Ezt feloldjuk 20 ml metanolban, 20 órán át visszafolyatás közben forraljuk, és vákuumban szárazra pároljuk. A maradékot újra kromatografáljuk szilikagéllel töltött oszlopon benzol : aceton (9:1) eleggyel eluálva. A 0,48 RfA- értékű anyagot tartalmazó frakciókat bepároljuk, így 830 mg terméket kapunk. RfA=0,48. Tömegspektrum adatok (m/e): 855 (M+), 768 (M + -87), 754 (M + -101). A magmágneses rezonanciaspektrum adatai (CDC13, 100 MHz) : 1,42 (3 "-CH3) ; 9,89 (CHO) ppm. 18. példa 3"-AcetiI-leukomicin A, : 5 g 2'-acetil-leukomicin A,-et feloldunk 25 ml vízmentes diklór-metánban, hozzáadunk 1,64 ml vízmentes piridint, jeges hűtés közben belecsepegtetünk 1,77 ml diklór-acetil-kloridot, és 1 órát kevertetjük. A reakcióelegyhez 25 ml hideg vizet adunk, és 25 ml diklórmetánnal extraháljuk. A diklór-metános réteget vízmentes magnézium-szulfáttal szárítjuk, és vákuumban szárazra párolva kvantitatív kitermeléssel 2'-acetil-3,9- -(diklór-acetil)-leukomicin A,-et kapunk. 5 g fenti termék 50 ml vízmentes etil-acetáttal készített oldatához hozzáadunk 9,4 ml y-kollidint, és jeges hűtés közben belecsepegtetünk 4,6 ml acetil-kloridot, majd 72 órán át 70 °C-on kevertetjük. A reakcióelegyet 250 ml jeges vízbe öntjük, és kétszer extraháljuk 150 ml kloroformmal. A kloroformos réteget híg vizes sósavoldattal (pH 2), vízzel és telített vizes nátrium-hidrogén-karbonát oldattal mossuk, vízmentes nátrium-szulfáton szárítjuk, és vákuumban szárazra pároljuk. A maradékot 10 ml metanolban oldjuk, hozzáadunk 10 ml ammóniával telített metanolt, majd szobahőmérsékleten 30 percig kevertetjük. A reakcióelegyet 250 ml jeges vízbe öntjük, és kloroformmal kétszer extraháljuk. A kloroformos réteget vízmentes magnézium-szulfáttal szárítjuk, és vákuumban szárazra pároljuk. A maradékot szilikagéllel töltött oszlopon benzol : aceton (8:1) eleggyel eluálva kromatografáljuk, ai eluátumot bepárolva 1,4 g nyers 2,3"-diacetiI-leukomicin A,-et kapunk porként. A porszerű nyersterméket feloldjuk 20 ml metanolban, 20 órán át visszafolyatás 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 65 13
