181973. lajstromszámú szabadalom • Eljárás 3''-helyzetben acilezett makrolid antibiotikumok előállítására
27 181973 közben forraljuk, és vákuumban szárazra pároljuk. A maradékot ismét kromatografáljuk szilikagél oszlopon benzol : aceton (6:1) eleggyel eluálva. A 0,46 RfA-értékű anyagot tartalmazó eluátumot vákuumban szárazra párolva 716 mg terméket kapunk. RfA=0,46. Tömegspektrum adatok (m/e): 827 (M+), 768 (M+-59), 726 (M+-101). A magmágneses rezonanciaspektrum adatai (CDC13, 100 MHz): 1,43 (3"—CH3): 2,00 (3''-OAc); 9,89 (CHO) ppm. 19. példa 3 "-Acetil-leukomicin As : 65 g 2'-acetil-leukomicin A5-öt feloldunk 300 ml vízmentes diklór-metánban, hozzáadunk 44 ml vízmentes piridint és 39 ml trimetil-szilil-kloridot, majd 1 órán át szobahőmérsékleten kevertetjük. A reakcióelegyet 2 liter vízbe öntjük, és 500 ml kloroformmal extraháljuk. Az extraktumot 0,1 n sósavoldattal, vízzel és 3%-os vizes ammónium-hidroxid oldattal mossuk, vízmentes magnézium-szulfáton szárítjuk, és vákuumban szárazra pároljuk, így 69 g nyers 2’-acetil-3,9-bisz(trimetil-sziIiI)-leukomicin A5-öt kapunk. A fenti anyagot feloldjuk 200 ml vízmentes etil-acetátban, hozzáadunk 227 g tribenzil-amint, majd jeges hűtés közben 51 ml acetil-kloridot, és 70 °C-on 40 órát kevertetjük. A reakcióelegyet 2 liter vízbe öntjük, vizes ammónium-hidroxid oldattal 9,5-re állítjuk a pH-t, és 1 liter kloroformmal extraháljuk. Az extraktumot vízzel mossuk, vízmentes magnézium-szulfáton szárítjuk, és vákuumban bepárolva 2',3''-diacetiI-3,9-bisz(trimetil-szilil)-leukomicin A5-öt kapunk, amely kismennyiségű 18,2,3 "-triacetil-3,9-bisz(trimetil-szilil)-17-dehidro-leukomicin A5-ötés nagymennyiségű tribenzil-amint tartalmaz. Ehhez jeges hűtés közben 250 ml ammóniával telített metanolt adunk, és 1,5 órát kevertetjük szobahőmérsékleten. A reakcióelegyet 2 liter vízbe öntjük, és 1 liter kloroformmal extraháljuk. Az extraktumot vízzel mossuk, vízmentes magnézium-szulfáttal szárítjuk, és vákuumban szárazra pároljuk, A maradékot 600 ml hideg metanolban oldjuk, és kiszűrjük az oldatlan tribenzil-amint. A szűrletet 20 órán át visszafolyatás közben forraljuk, majd vákuumban szárazra pároljuk, így 69 g nyers 3"-acetil-3,9-bisz(trimetil-szilil)-leukomicin A5-öt kapunk. Az anyagot feloldjuk 250 ml ecetsav : tetrahidrofurán : víz (3 : 1: 1) elegyben, és 1 órán át szobahőmérsékleten kevertetjük. A reakcióelegyhez 1 liter kloroformot adunk, és 3%-os vizes ammónium-hidroxid oldattal mossuk. A kloroformos réteget vízmentes magnéziumszulfáttal szárítjuk, és vákuumban szárazra párolva 64 g nyers 3"-acetil-leukomicin A5-öt kapunk, amelyet kevés benzolban feloldunk, és szilikagéllel töltött oszlopra öntjük. Az elúciót gradiens módszerrel benzol : aceton (10: 1 — 8:1 — 6:1) eleggyel végezzük. Az egyes frakciókat szilikagél rétegen vékonyréteg-kromatográfiával vizsgáljuk, és a 0,45 RfA-értékű anyagot tartalmazó frakciókat egyesítjük, és vákuumban szárazra párolva 45,5 g tisztított terméket kapunk. (Kitermelés: 70,0%). RfA=0,45; Rffl=0,10. Tömegspektrum adatok (m/e): 813 (M+), 754 (M+-59), 726 (M+-87). Hatásosság : 2850 y/mg (standard leukomicinhez viszonyítva). 28 20. példa 3 "-Propionil-leukomicin A5 : 65 g 2'-acetil-Ieukomicin A5-öt feloldunk 300 ml diklór-metánban, hozzáadunk 44 ml vízmentes piridint és 39 ml trimetil-szilil-kloridot, majd 1 órán át kevertetjük szobahőmérsékleten. A reakcióelegyet 2 liter vízbe öntjük, és 300 ml kloroformmal extraháljuk. Az extraktumot 0,1 n sósavoldattal, vízzel és 3%-os vizes ammónium-hidroxid oldattal mossuk, vízmentes magnéziumszulfáttal szárítjuk, és vákuumban szárazra párolva 70 g nyers 2'-acetiI-3,9-bisz(trimetil-szilil)-leukomicin A5-öt kapunk. A fenti nyersterméket feloldjuk 200 ml dioxánban, hozzáadunk 230 g tribenzil-amint, majd jeges hűtés közben 65 ml propionil-kloridot, és 90 °C-on 24 órát kevertetjük. A reakcióelegyet 2 liter vízbe öntjük, a pH-t vizes ammónium-hidroxid oldattal 9,5-re állítjuk, és 1 liter kloroformmal extraháljuk. Az extraktumot vízmentes magnézium-szulfáttal szárítjuk, és szárazra párolva 2'-acetil-3,9-bisz(trimetil-szilil)-3 "-propionil-leukomicin A5-öt kapunk, amely kismennyiségű 2'-acetil-3,9-bisz(trimetil-szilil)-18,3'-dipropionil-17-dehidroleukomicin A5-öt és nagymennyiségű tribenzil-amint tartalmaz. Ehhez hozzáadunk 250 ml ammóniával telitett metanolt, és szobahőmérsékleten 1,5 órát kevertetjük. A reakcióelegyet 2 liter vízbe öntjük, és 1 liter kloroformmal extraháljuk. Az extraktumot vízzel mossuk, vízmentes magnézium-szulfáttal szárítjuk, és vákuumban szárazra pároljuk. A maradékot hideg metanolban oldjuk, és kiszűrjük az oldatlan tribenzil-amint. A szűrletet 20 órán át visszafolyatás közben forraljuk, és vákuumban szárazra párolva nyers 3,9-bisz(trimetiI-szilil)-3''-propionil-leukomicin A5-öt kapunk. Az anyagot 250 ml ecetsav : tetrahidrofurán : víz (3 : 1 : 1) elegyben oldjuk, és 1 órán át kevertetjük szobahőmérsékleten. A reakcióelegyhez 1 liter kloroformot adunk, és 3%-os vizes ammónium-hidroxid oldattal mossuk. A kloroformos réteget vízmentes magnézium-szulfáttal szárítjuk, és vákuumban szárazra párolva 60 g nyers 3"-propionil-leukomicin Aröt kapunk, amelyet kevés benzolban feloldunk, és szilikagéllel töltött oszlopba öntjük. Az eluálást gradiens módszerrel benzol : aceton (15 : 1 — 10 : 1 — 8:1) elegyekkel végezzük. Az egyes frakciókat szilikagélen vékonyréteg-kromatográfiával vizsgáljuk, és a 0,57 RfA-értékű anyagot tartalmazó frakciókat egyesítjük, majd vákuumban szárazra párolva 52,5 g tisztított terméket kapunk. (Kitermelés : 79,4%). RfA=0,57;RfB=0,14. Tömegspektrum adatok (m/e): 827 (M+), 754 (M + - 73), 740 (M+-87). Hatásosság : 2850 y/mg (standard leukomicinnel összehasonlítva). Citrátjának olvadáspontja 122—127 °C. 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 65 14
