181938. lajstromszámú szabadalom • Eljárás szívglikozidok kémiai módszerrel történő előállítására
3 181938 4 rek alkalmazásának pedig határt szab az enzimműködést gátló hatásuk. Kísérleteink során azt találtuk, hogy ha egy (II) általános képletű vegyületet peroxid- vagy perszulfát-típusú vegyülettel oxidálunk, akkor szelektíven az (I) általános képletű vegyület a- ß-izomerke veréke keletkezik, 40—50%-os összkitermeléssel. A kapott termék mindig izomerkeverék. A (II) általános képletben ugyanis az acetil-digitoxóz-cukorrész nem a láncvégen van, és szférikus okok miatt az acetilcsoport a láncban csak a-helyzetű lehet. Az ebből keletkező (I) általános képletű vegyületekben viszont az acetil-digitoxóz-rész már láncvégen van, így az acetil-csoport már akár a-, akár P-elhelyezkedésű is lehet, és a részbeni átizomerizálódás meg is történik. Ez a jelenség egyébként az ismert eljárások esetében is megvan. A kapott izomerkeverék kívánt esetben átizomerizálással a kívánt egyféle izomerré alakítható, vagy ismert kromatográfiás módszerrel, vagy szétkristályosítással komponenseire választható szét. Kívánt esetben az izomerkeverék 2-3 perc alatt, gyakorlatilag veszteség nélkül egyféle dezacetilezett termékké alakítható. A találmány tárgya tehát eljárás (I) általános képletű vegyületek a- és ß izomerkeverékének előállítására — e képletben A és B azonosan hidrogénatomot, vagy az egyik hidrogénatomot és a másik hidroxilcsoportot, és R olyan tridigitoxóz-csoportot jelent, melyben a végállású digitoxóz a-, illetve ß-helyzetben acilezett — oly módon, hogy egy (II) általános képletű vegyületet — e képletben A és B a megfelelő fenti szubsztituens-kombinációt jelenti, és R' jelentése egy, a 4"'-helyzetben (lia) képletű csoportot tartalmazó a-acetil-digitoxóz-digitoxóz-digitoxóz-lánc valamely peroxid- vagy perszulfát-típusú vegyülettel szerves oldószer jelenlétében reagáltatunk és a kapott, a- és ß-izomer keverékéből álló terméket kinyerjük. A találmány szerinti eljárás egyik foganatositási módja szerint oly módon járunk el, hogy a (II) általános képletű vegyületet poláros és/vagy apoláros szerves oldószerben feloldjuk, hozzáadjuk a peroxid- vagy perszulfát-típusú oxidálószert, az elegyet 10—90 °C-ra felmelegítjük és a reakció lejátszódásáig ezen a hőmérsékleten tartjuk. Az oxidáció előrehaladását vékonyrétegkromatográfiásan követjük. Az oxidáció befejeztével az elegy hőmérsékletét 20—25 °C-ra állítjuk be, majd vizet adunk hozzá, klórozott szénhidrogénnel, előnyösen kloroformmal extraháljuk, az extraktumot nátriumszulfáttal víztelenítjük, szűrjük, majd a szűrletet csökkentett nyomáson szárazra pároljuk. A találmány szerinti eljárás egy előnyös foganatositási módja szerint a (II) általános képletű vegyület oldására szerves oldószerként például 1—5 szénatomos alkanolt, mint metanolt, etilalkoholt, gyűrűs étert, mint például dioxánt, tetrahidrofuránt, klórozott szénhidrogént, mint például kloroformot, aromás szénhidrogént, mint például benzolt, vagy savamidot, előnyösen dimetilformamidot vagy a felsorolt oldószerek elegyeit alkalmazzuk. A találmányt közelebbről az alábbi példákkal szemléltetjük, anélkül, hogy igényünket a példákra korlátoznánk. 1. példa 0,99 g 4"'—O—[6-(dihidroxi-metil)-3-hidroxi-l,4-dioxán-2-il]-3"'-acetil-digitoxint (Lanatozid-A nátrium-perjodátos oxidációjával nyert oly (II) általános képletű vegyületet, melyben A=H, B=H és R' = a 4"'-helyzetben lia képletű csoportot tartalmazó acetil-digitoxóz-digitoxóz-digitoxóz láncot jelent 10 ml dimetilformamidban oldunk, teljes oldódás után 3,0 ml 30%-os vizes hidrogénperoxid-oldatot adunk hozzá. Az elegyet 80—90 °C-ra felmelegítjük, és ezen a hőmérsékleten tartjuk, míg a reakció lejátszódik. Az oxidáció menetét vékonyrétegkromatográfiásan ellenőrizzük standard anyagok segítségével. Amikor az elegyből reagálatlan kiindulási anyag már nem mutatható ki, az oxidációt befejezzük, az elegyet szobahőmérsékletre hűtjük. A lehűtött elegyhez 15,0 ml vizet adunk és háromszor 20,0 ml kloroformmal kivonatoljuk, a kloroformos fázisokat elválasztjuk, egyesítjük, nátriumszulfáttal víztelenítjük, szűrjük, majd a szűrletet csökkentett nyomáson max. 50 °C-on szárazra pároljuk. Tisztaságát vékonyrétegkromatográfiásan vizsgáljuk, adszorbensként 5553—DC-Alufolien Kieselgel 60-at, futtatóelegyként kloroform-metanol 90:10 arányú elegyét alkalmazzuk. Előhívás: SBC13 20%-os kloroformos oldatával. Értékelés: szűrt ultraibolya fényben, standarddal összehasonlításban. A terméket az alábbiak szerint tisztítjuk: 0,87 g száraztermékre 20,0 ml etilacetátot öntünk, az elegyet felforraljuk, majd szobahőmérsékletig hűlni hagyjuk, továbbá jégszekrényben 0 °C-on tartjuk, ekkor a melléktermékek az etilacetátból kiválnak. A kivált anyagot kiszűrjük, kétszer 20 ml etilacetáttal a fenti módon extraháljuk. Az etilacetátos oldatokat egyesítjük és csökkentett nyomáson, maximum 50 °C- on, szárazra pároljuk. 0,57 g acetildigitoxint kapunk, mely a- és ß-izomerek keveréke és amelyet ismert módon kristályosíthatunk. A kristályosítás során, melyet metanol-víz 70: 30 arányú elegyéből végzünk, 50 g (56%) 90% tisztaságú acetildigitoxint kapunk, mely a- és ß-izomerek keveréke. Rf: 0,75 (a fenti módon meghatározva). A tennék önmagában is hasznosítható, vagy kívánt esetben dezacetilezéssel ismert módon digitoxinná alakítható, vagy az izomerkeverék önmagában ismert módon egyféle izomerré (vagy csak a-acetil-, vagy csak ß-acetil-term6kk0) átizomeri/álható [Chem. Pharm. Bull. 17 (7), 1456—1461 (1969)], v&gy a két izomer elválasztható. Az elválasztás egyszerűbb módja a következő: 10 g acetil-digitoxint, mely 85%-ban a-acetil- és 15%-ban ß-acetil-izomert tartalmaz, 50 °C körüli hőmérsékleten 280 ml kloroformban oldunk, majd az oldatot 40—60 ml térfogatún sűrítjük be. A sűrítményt a kristályosodás megindulása után 5 °C-on kb. 4 órán át állni hagyjuk, szűrjük, kloroformmal mossuk, szárítjuk. így 8 g a-acetil-digitoxint kapunk. Az anyalúg bepárlásával a ß-acetil-digitoxin kinyerhető. A példa kiindulási anyagát a következőképpen állítjuk elő: 1,0 g lanatozid-A-t 15 ml metanolban oldunk, majd az oldathoz hozzáadjuk 0,8 g nátrium-perjodát (NaJO+) 8 ml vízzel készült oldatát. A reakció lejátszódása után az elegyet 10 °C-ra hütjük, és 4 órán át állni hagyjuk. A reakciókeverékből ezután a nátriumjodátot szűréssel eltávolítjuk, és a szűrletet vízzel 1 : 1 metanol-víz arányig hígítjuk. A hígított szűrletet kétszer 20 ml kloroformmal kivonatoljuk, a kivonatokat egyesítjük, nátriumszulfáttal víztelenítjük, szűrjük, majd a szűrletet legfeljebb, 50 °C hőmérsékleten szárazra pároljuk. Kitermelés: 0,99 g 4"’—O—[6-(dihidroxi-metil)-3-hidroxi-1,4-dioxán-2-il]-3"'-acetil-digitoxin. 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 65 7
