181930. lajstromszámú szabadalom • Eljárás májsejtek szaporodását stimuláló faktor előállítására
MAGYAR NÉPKÖZTÁRSASÁG SZABADALMI LEÍRÁS 181930 Bejelentés napja: 1979. IV. 6. Elsőbbsége: 1978. IV. 7. (P 28 14 981.7) Német Szövetségi Köztársaság ORSZÁGOS TALÁLMÁNYI HIVATAL Közzététel napja: 1982. XII. 28. Megjelent: (45) 1986. IV. 30. Nemzetközi osztályozás: (PA—1349) NSZOj C 07 G 7/00 Feltalálók: Goldberg Michel biológus, München, Prof. dr. Ruhenstroth—Bauer Gerhard kutató, Gräfeliing, München, Dr. Silz Siegfried orvostanhallgató, München, Strecker Wolfgang orvostanhallgató, Eichenau, Német Szövetségi Köztársaság Szabadalmas: Max—Planck—Gesellschaft zur Förderung der Wissenschaften E.V., Goettingen, Német Szövetségi Köztársaság Eljárás májsejtek szaporodását 1 A találmány tárgya eljárás egy májsejtek szaporodását stimuláló új faktor előállítására. Ismeretes, hogy a máj növekedése két szabályozó körtől függ, ezek közül az egyik májsejtek térfogatát és a másik a májsejtek számát szabályozza. Ismeretes az is, hogy ha a máj 5 egy részét műtéti úton eltávolítják, akkor a normál állapothoz viszonyítva erősen fokozódik a májsejtek szaporodása, tehát nagymértékben fokozódik a sejtosztódás aktivitása. Ennek következménye, hogy a májsejtek száma, ami a műtét következtében csökkent, erősen növekedni kezd addig, amíg 10 a májsejtek száma kb. a kiindulási értéket eléri. A májsejtek számának ilyen növekedése ezenkívül megfigyelhető emlősöknél, embrionális állapotban, vagy néhány héttel a születés után. A májsejtek egy bizonyos mennyiségig szaporodnak. Ettől kezdve a máj a sejtek térfogatnövekedése következté- 15 ben fejlődik tovább. Már régebben feltételezték, hogy a májsejtek szaporodásának a szabályozását egy, a májsejtek szaporodására ható faktor végzi. Emellett természetesen azt is fontolóra vették, hogy normál esetben adva van egy sejtosztódást gátló faktor, 20 amely a máj részleges eltávolítása esetében eddig ismeretlen okok következtében elmarad [az eddigi ismeretek állásának összefoglalása: Bucher, N. L. R. und Malt, R. A. Regeneration of Liver and Kidney, Little, Brown and Co. Boston (1971) S. 245.]. 25 A találmány feladata olyan faktorok előállítása, amelyek a sejtosztódási aktivitás fokozásával a májsejtek számát növelik, tehát a májsejtek szaporodását stimulálják. A májsejtek szaporodását stimuláló, találmány szerinti eljárással előállítható faktor részleges májeltávolításnak alá- 30 stimuláló faktor előállítására 2 vetett állatok maradék-májának centrifugált homogenizátumáhak felülúszó részében lévő neuraminsavmentes anyag, amely egy kb. 30 000—50 000 D molekulasúlyú, 5,5 vagy ennél nagyobb pH-értéknél és 95 "C, vagy ennél magasabb hőmérsékleten stabil proteint vagy proteidet tartalmaz. Emellett előállítottunk egy előfaktort is, amely az említett aktivitást neuraminidáz hatására aktiválható formában tartalmazza. A találmány tárgyát képezik tehát az említett faktorokat koncentrált és nagymértékben méregtelenített formában tartalmazó extraktumok előállítási eljárása. 'Ey módon először sikerült egyszerű eljárással előállítani egy, a májsejtek szaporodását stimuláló faktort (a továbbiakban faktor) tartalmazó hatóanyagot a maradék-máj extrakciójával, illetve — előfaktor formájában — a májuktól részben megfosztott kísérleti állatok vérplazmájából, vagy embrionális kísérleti állatok, vagy a születés utáni első hetekben lévő kísérleti állatok májából, illetve vérplazmájából. Ez a faktor proteinekből, vagy protein-tartalmú anyagokból áll, amelyeknek a molekulasúlya kb. 30000—50 000 D. A molekulasúly alsó határa kb. 20 000 vagy 25 000 lehet. így ezek az anyagok egyértelműen előállíthatok és definiálhatók. A leírásban ismertetett előállítási eljárások — bár igen előnyösek és egyszerűek — csupán példaként szolgálnak. Várható, hogy a májsejtek szaporodását stimuláló faktornak ebben a formában történő leírása után, hamarosan további előállítási lehetőségeket — beleértve egy szintézist is — fognak kidolgozni. A találmány értelmében úgy járunk el, hogy a) részleges májeltávolításnak alávetett kísérleti állatok maradékmáját vagy embrionális vagy néhány hetes koruk-181930
