181920. lajstromszámú szabadalom • Eljárás n-(tre-3-amino-2-hidroxi-butanoil)-amino-ecetsavak előállítására
35 181920 36 válnak ki, melyeket leszűrünk és hideg vízzel mosunk és vákuumban szárítunk. 1,48 g (63,8%) (2S, 3R)-3-amino-2- -hidroxi-4-fenil-vajsavat kapunk. [a]&' = +32,5* (c=0,76, n sósav). A vegyület referenciaértéke [J. Med. Chem., 20, 510 (1977)], [a]Sí* = +29,5" (c=l, n sósav). (5) (2S, 3R)-3-benzil-oxi-karbonil-amino-2- -hidroxi-4-fenil-vajsav előállítása 1,45 g (7,44 mmól), (2S, 3R)-3-amino-2-hidroxi-4-fenil-vajsavat, 1,13 g (11,2 mmól) trietil-amint és 2,24 g (8,20 mmól) benzil-S(4,6-dimetil-pirimidin-2-il)-tiokarbonátot 7 ml víz és 7 ml dioxán elegyében oldunk. Az oldatot keverés közben szobahőmérsékleten reagáltatjuk és a reakció 3 óra múlva befejeződik. A reakcióelegyhez 20 ml vizet adunk és az oldatot kétszer 25 ml etil-acetáttal mossuk. A vizes fázist híg sósav hozzáadásával pH= 1—2-re állítjuk be. A kiváló olajos terméket kétszer 30 ml etil-acetáttal extraháljuk. A kivonatokat egyesítjük és háromszor 30 ml konyhasó vizes oldatával mossuk, majd vízmentes nátrium-szulfát felett szárítjuk. A nátrium-szulfátot szűréssel elkülönítjük, a szűrletet csökkentett nyomáson szárazra pároljuk. A maradékot petroléterrel eldörzsöljük. A kivált kristályokat szűréssel elkülönítjük, petroléterrel mossuk és vákuumban szárítjuk. (2S, 3R)-3-benzdl-oxi-karbonil-amino-2-hidroxi-4-fenil-vajsavat kapunk. Termelés: 2,10 g (85,7%). Op: 154—155 °C. [a]”» = +82,5° (c=l, ecetsav). A vegyület referenciaértékei a 136118/1977 számú japán közrebocsátási irat szerint: Op: 154,5 °C [a]»» = +83,5P (c= 1,34, ecetsav). (6) N-[(2S, 3R)-3-benzil-oxi-karbonil-amino-2- -hidroxi-4-fenil-butanoil]-(S)-leucin-benzilészter előállítása 2,00 g (6,00 mmól) (2S, 3R)-3-benzil-oxi-karbonil-amino-2-hidroxi-4-fenil-vajsavat, 2,63 g (6,60 mmól) benzil-(S)-leucinát p-toluolszulfonsav sóját és 0,97 g (7,20 mmól) 1-hidroxi-benzotriazolt 20 ml tetrahidrofuránban oldunk. Az oldatot konyhasó és jég elegyével hűtjük és közben 0,67 g (6,6 mmól) trietil-amint és 1,49 g (7,20 mmól) diciklohexil-karbodiimidet adunk hozzá és az oldatot egy éjjelen át reagáltatjuk. A kivált diciklohexil-karbamidot szűréssel elkülönítjük és a szűrletet csökkentett nyomáson bepároljuk. A maradékhoz 50 ml etil-acetátot adagolunk. Az oldhatatlan részeket szűréssel elkülönítjük és kis mennyiségű etil-acetáttal mossuk. A szűrletet és a mosóoldatot összeöntjük és kétszer 0,5 n sósavval mossuk, majd háromszor konyhasó vizes oldatával és kétszer 5%-os nátrium-hidrogén-karbonát vizes oldattal, továbbá háromszor konyhasó vizes oldatával mossuk, majd vízmentes nátrium-szulfát felett szárítjuk. A nátrium-szulfátot szűréssel eltávolítjuk és a szűrletet csökkentett nyomáson szárazra pároljuk. A maradékot n-hexánnal eldörzsöljük. Az elkülönített kristályokat szűréssel összegyűjtjük n-hexánnal mossuk és vákuumban szárítjuk. 3,19 g (99,4%) N-[(2S, 3R)-benzil-oxi-karbonil-amino-2-hidroxi-4-fenil-butanoil]-(S)-leucint kapunk. Op: 122— 123 °C. [a]«?« = +15,2° (c= 1, ecetsav). A 2. példa (3) pontja szerinti vegyület referenciaértékei a japán 136118/1977 számú közrebocsátási irat szerint: Op: 122 °C, [a]S, = 15, r (c=0,77, ecetsav). (7) N-[(2S, 3R)-3-amino-2-hidroxi-4-fenilbutanoil]-(S)-leucin] (Besztatin) előállítása 3,00 g (5,60 mmól) N-[(2S, 3R)-3-benzil-oxi-karbonil-amino-2-hidroxi-4-fenil-butanoil]-(S)-Ieucin-benzilésztert . 50 ml 95%-os ecetsavban oldunk. Ezután az oldathoz katalitikus mennyiségű palládium kormot adagolunk és atmoszféra nyomáson az oldatba hidrogént vezetünk. Ily módon a katalitikus redukció 2 óra múlva játszódik le. A katalizátort szűréssel eltávolítjuk és a szűrletet csökkentett nyomáson szárazra pároljuk. A maradékot 30 ml acetonnal eldörzsöljük. A kivált kristályokat szűréssel elkülönítjük és 1 n sósavban feloldjuk. Az oldhatatlan anyagokat kis mennyiségű aktív szén hozzáadásával szűrjük le és a szűrletet híg ammóniával pH = 5—6-ra állítjuk. A kicsapódott kristályokat szűréssel összegyűjtjük, acetonnal mossuk és vákuumban szárítjuk. N-[(2S, 3R)-3-amino-2-hidroxi-4-fenil-butanoil]-(S)leucint (besztatin) kapunk. Termelés: 1,47 g (85%) [a]m = -21,1° (c= 1, ecetsav) A 2. példa (4) pontja szerinti vegyület referenciaértékei a 136 118/1977 számú japán közrebocsátási irat szerint: [a]TM= -21,8° (c=0,45, ecetsav). A besztatint a példa 6. és 7. lépésében leírt mód helyett a következő módon is előállíthatjuk: A) 330 mg (2S, 3R)-3-Benzil-oxi-karbonil-amino-2-hidroxi-4-fenil-vaj savat, 162 mg 1-hidroxi-benzotriazolt, 217 mg (S)-metil-leucinát-hidrokloridot, 0,17 ml trietil-amint, és 206 mg diriklohexil-karbodiimidet a 6. lépésben leírt módon reagáltatjuk és 293 mg N-[(2S, 3R)-3-benzil-oxi-karbonil-amino-2-hidroxi-4-fenil-butaniol]-(S)-leucin-metilésztert kapunk. Op: 120 °C, [a]5, = -22,1 °C (c=l,09, ecetsav). Analízis a C25H32N206 képlet alapján: számított: C% 65,77 H% 7,07 N% 6,14 talált: C% 65,91 H% 7,16 N% 6,28 250 mg N-[(2S, 3R)-3-benzil-oxi-karbonil-amino-2-hidroxi-4-fenil-butanoil]-(S)-leucin-metilésztert 10 ml metanolban oldunk és az oldathoz 0,61 ml vizes 1 n nátrium-hidroxid oldatot adunk és a kapott elegyet szobahőmérsékleten 6 óra hosszat keveijük. A metanolt ezután csökkentett nyomáson lepároljuk és a maradék folyadékhoz vizet adunk, melyet ezután 1 n kénsavval pH=2-re állítunk be. A kivált csapadékot izoláljuk és etil-acetáttal extraháljuk. A szerves réteget vízzel mossuk, vízmentes magnézium-szulfáttal szárítjuk és az oldószert eltávolítjuk. A kapott szilárd anyagot etil-acetát és petroléter elegyéből kristályosítjuk. Azonos oldószerelegyből átkristályosítva 150 mg N-[(2S, 3R)-3-benziloxikarbonil-amino-2-hidroxi-4-fenil-butanoil]-(S)-leucint kapunk. Op.: 209 °C, [a]S. = +27,2 °C, (c=0,71, ecetsav) Analízis a C2*H30N2O6 képlet alapján: számított: C% 65,14 H% 6,75 N% 6,46 talált: C% 65,29 H% 6,75 N% 6,33. B) 120 mg N-[(2S, 3R)-3-benzil-oxi-karbonil-amino-2- -hidroxi-4-fenil-butanoil]-(S)-leucint 30 ml metanolban oldunk és 3 óra hosszat hidrogénezünk 50 mg palládium korom segítségével. A katalizátort ezután leszűrjük és a metanolt ledesztilláljuk. 54 mg N-[(2S, 3R)-3-amino-2-hidroxi-4-fenil-butanoil-(S)-leucint kapunk metanol és etil-acetát elegyéből. Wcts = “22,7° (c = 0,95, ecetsav) 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 65 18
