181745. lajstromszámú szabadalom • Eljárás új vinblasztin- és leurozidin-származékok előállítására
181745 6 összecsapzódva (koaleszkálva), egyetlen sűrű masszában helyezkednek el a sejt közepén. Ez a piknomitózis, vagy „Ball-Metaphase”. A negyedik fokozat, amikor már az interfázis sejteken jelentkezik a hatás oly módon, hogy viszonylag kevesebb a blokkolt 5 sejt, mert nem képes mitózisba lépni. A sejtek citoplazmája (interfázisban) kiterült, a citoplazma szegély szabálytalan, „rojtos”, a sejt gyakran megnyúlt, fiborblaszt-szerű alakot vesz fel. Végül az ötödik fokozat esetén a citoplazmát finom retikuláris struk- 10 túra tölti ki, és egyértelmű, hogy az interfázis sejt a kezelés hatására elpusztult, szinte fixálódott. Ezeket a fokozatokat a jelenlegi anyagok esetében jól el lehetett különíteni. A fentiek alapján a következőt lehetett megálla- 15 pítani: leghatásosabb anyag a heptoxi-származék. Ez már 0,001 Mg/ml dózisban erős metafázisblokkot idézett elő. A pinomitózis 0,1 jug/nú dózisnál, az interfázis-sejt hatás 1— lO/rg/ml dózisoknál jelentkezett. Az izobutoxi-származék egy nagyságrenddel gyen- 20 gébben hatott: a 0,001 jug/ml legalacsonyabb dózisnál még szabályos mitózisok előfordultak. Végül a leggyengébben hatott a benziloxi-származék, amely a legalacsonyabb dózisnál minimális blokkot hozott létre, néhány torz mitózissal, de anafázisok már nin- 25 csenek jelen. 0,01 /ig/ml-nél közepes mértékű a blokk; az erős blokk, valamint a piknomitózis csak 1 Mg/ml dózisban jelentkezik. 5 Az új vegyületek hatását i.p. transzplantálható tumoroläa (P388 egérleukémia és NK/Ly ascites lymphoma) a következőkben ismertetjük. A P388 leukémiát BDFi hybrid egerekben tartjuk fenn és a kísérletekhez 6—6 egérből álló csoportoknak 106 tumorsejt/állat ip. transzplantáljuk. A transzptantálást követő 24 órában kezdjük meg az új vegyületekkel naponta adott ip. kezelést, és az állatok testsúlyát és állapotát minden nap ellenőrizzük. A kezelt állatokon elért hatást a kontroll csoport napokban kifejezett átlagos élettartamának százalékában fejezzük ki. Az előbbi táblázatból kitűnik, hogy a vizsgált származékok a P388 leukémiás egerek élettartamát mind jelentősen meghosszabbítják. Saját tenyészetünkből származó Swiss-H/Riop uotbred egerek 10-es csoportjaiba 5 • 106 asdtes tumorsejtet transzplantáltunk ip. A transzplantációt követő 24. órában kezdtük a kezelést, és a vegyületeket naponta adtuk összesen öt alkalommal. A kontroll csoport átlagos élettartama 15,7 nap volt. A vegyületek hatása jelentős élettartam-meghoszszabbodásban nyilvánul meg, mint azt a következő táblázat mutatja. Vegyidet Dózis mg/kg ip. Tumormentes /\ lldjAJil Cl " a 25.napon a 30. napon N-dezmetil-N-(heptoxi-metil)-vinblasztin 5 x 6,0 10/10 7/10 3/10 N-dezmetil-N-(izobutoxi-metil)-vinblasztin 5x4,0 10/10 10/10 7/10 Az új vegyületek tumorgátló hatása P388 és NK/Ly törzseken 4-8 mg/kg/nap dózisban kifejezett 45 és az ismert diindol-alkaloidokéval egyenértékű. Ugyanakkor lényegesen kevésbé toxikusak, mint az ismert hasonló szerkezetű vegyületek. Humán célra a vegyületek elsősorban intravénásán, vagy infúzióban alkalmazhatók. 50 A találmány tárgya tehát eljárás az (1) általános képletű új vegyületek előállítására — az (I) általános képletben . 55 R4 0-térállású hidroxil-, és R3 a-térállású etilcsoportot, vagy R4 hidrogénatomot és R3 (3-térállású etilcsoportot, R” etiltől eltérő 1-10 szénatomos egyenes, vagy go 3—10 szénatomos olyan elágazó láncú alkilcsoportot jelent, melyben az:=N8—CH2— O-csoporthoz kapcsolódó szénatom terciertől eltérő konfigurációjú, vagy az alkil-részben 1—3 szénatomot tartalmazó fenil-alkilcsoportot jelent — 65 oly módon, hogy egy (II) általános képletű vegyületet vagy savaddíciós sóját — ebben a képletben R3 és R4 a már megadott jelentésű — egy (III) általános képletű alkohol - a (III) általános képletben R” a már megadott jelentésű — 50-150-szeres moláris fölöslegével krómtrioxid, szerves oldószer, valamint ecetsavanhidrid és sav jelenlétében —60 °C és —30 °C közötti, előnyösen —50 °C és —60 °C közötti hőmérsékleten reagáltatunk, majd a reakcióelegy pH értékét 8-10-re állítjuk be, és a kapott (I) általános képletű terméket kívánt esetben tisztítjuk, majd kinyerjük. A találmány szerinti eljárás értelmében egy (II) általános képletű vegyületből vagy savaddíciós sójából indulunk ki. A kiindulási anyagot alkalmas szerves oldószerben, célszerűen acetonban, vagy valamely klórozott szénhidrogénben, előnyösen alkoholmentes diklór-metánban, kloroformban vagy diklóretánban oldjuk. Sav jelenléte mind az oldást, mind a reakciót megkönnyíti. Gyengén savas közegben célszerű dolgozni. 3
