181535. lajstromszámú szabadalom • Eljárás a spektinomicin új analógjainak előállítására
17 181535 18 PMR (CDCI3): 8 2,07 (3H, 2), 2,15 (3H, s), 3,08 (6H, s), 5,12 (4H), 5,40 (1H, s), 5,95 (1H, s) és 7,32 (10H, s). CMR(D6-aceton):8 182,5, 172,9, 169,5,137,6,137,5, 128,6, 127,8, 102,7, 95,5, 93,1, 75,0, 74,0, 66,8, 65,6, 60,3, 59,6, 56,7, 31,1 és 20,4 p. p. m. Molekulasúly a C3eH52N2012 képletre: számított: 784,3059, talált: 784,3097. 4. referenciapélda N, N'-bisz-(Benziloxi-karbonil)-4',5'-didehidro-spektinomidn előállítása (S reakcíóvázlat) O, 4 g kálium-hidrogén-foszfát 20 ml vízmentes metanollal készült szuszpenziójához 1,0 g N,N'-bisz-(benziloxi-karbonil)-2'-0-acetil-4',5'-didehidro-spektinomicint adunk, majd az így kapott reakcióelegyet szobahőmérsékleten 1,5 órán át keverjük. Az oldószert ezután csökkentett nyomáson lehajtjuk, majd a maradék szerves részét 1,5% metanolt tartalmazó kloroformban feloldjuk. Az így kapott oldatot 225 g szilikagélen kromatográfiásan tisztítjuk, eluálószerként 1,5% metanolt tartalmazó kloroformot használva. A terméket tartalmazó frakciókat összeöntjük, majd bepároljuk, 0,51 g (55%) mennyiségben a cím szerinti vegyületet kapva. CD (CH3OH): (6)!m = —8300±2100, (0)S* = + 1O5OO±21OO Fajlagos forgatóképesség [a]D = -56° (1,0%, metanol). CMR (D6-aceton): 5 187,6, 175,8, 157,2,138,1, 128,4, 101,7, 99,3,87,7,76,3,64,6,63,8,67,3,66,7,66,3,65,3 60,8,60,0, 31,5 és 21,3 p. p. m. Tömegspektrum a tri-TMS-származékra [m/e]: 814 (M+ ) és 799 (M—15). 5. referenciapélda N,N'-bisz.(Benziloxi-karbonil)-6'-hidroxi-spektinomicin-3'-metilenol előállítása (SZ reakcióvázlat) 103,9 mg (0,154 millimól) N,N'-bisz-(benziloxi-karbonil)- 6'-acetoxi-spektinomicin-3'-metilenoléter 6,8 ml metanollal készült oldatát 115 mg kálium-hidrogén-karbonáttal szobahőmérsékleten 24 órán át keverjük, majd a reakcióelegyet bepároljuk, a maradékot kloroformban újraoldjuk, a kloroformos oldatot szűrjük és a szűrletet ismét bepároljuk, 90 mg mennyiségben a cím szerinti vegyületet kapva. PMR- és CMR-spektrumában nem észlelhető az acetát-csoportnak megfelelő metilcsoportra utaló jel. PMR (CDClj): 8 7,31 (s), 5,10 (s), 5—3,75 (m), 3,5 (s) és 3,1 (s). CMR (CDCI3): 8 158, 152,5, 136,5, 128,2, 95,1, 94,9, 88,7, 77,2, 67,5, 67,2, 55,0, 34,1 és 29,72 p. p. m. Tömegspektrum a tetra-TMS-származékra [m/e]: 918 (M' ) és 903 (M—15). 1. példa Spektinomicin előállítása (T reakcióvázlat) 480 mg (0,8 millimól) N,N'-bisz-(benziloxi-karbonil)-4',5'-didehidro-spektinomicin 40 ml izopropanollal készült oldatához 480 mg 10% fémtartalmú, bárium-szulfát hordozós palládiumkatalizátort és 0,48 ml (5,9 millimól) piridint adunk, majd az így kapott reakcióelegyet atmoszférikus nyomáson 5 órán át hidrogénezzük. Ezután a reakcióelegyet szűrjük, a szűrletet vákuumban bepároljuk és a maradékot izoprepanolban újraoldjuk. Az így kapott oldathoz 2,0 ml (2,0 millimól) 1 n izopropanolos hidrogén-klorid-oldatot adunk, majd az oldószert vákuumban lehajtjuk, 440 mg mennyiségben fehér csapadékot kapva. Ezt azután vizes acetonból átkristályosítjuk, 164 mg (0,33 millimól, 41%) mennyiségben spektinomicin-dihidroklorid-pentahidrátot kapva. E termék fizikai és biológiai tulajdonságai megegyeznek a természetes úton képződött tennék megfelelő tulajdonságaival. A 3c. referenciapélda szerint előállított enolacetátból kiindulva és az előző bekezdésben ismertetett módon eljárva 35%-os hozammal ugyancsak kristályos spektinomicin-dihidroklorid-pentahidrát állítható elő. 2. példa 5'-Demetil-spektinomicin előállítása (U real dó vázlat) Parr-féle hidrogénező edényben 300 mg 10% fémtartalmú szénhordozós palládiumkatalizátor 4S ml izopropanollal készült szuszpenziójához hozzáadjuk 333 mg (0,57 millimól) N,N'-bis’-(benziloxi-karbonil)-5'-demetil-spektinomirin 5 ml izopropanollal készült oldatát, majd ezután 1,36 ml (1,36 millimól) 1 n izopropanolos hidrogén-klorid-oldat adagolását követően a reakdóelegyet 2,8 at nyomáson és szobahőmérsékleten 16 órán át hidrogénezzük. Ezt követően a reakcióelegyet szűrjük, a kiszűrt katalizátort pedig először izopropanollal, ezután pedig a termék még jobb hatásfokú eltávolítása céljából vízzel mossuk. Az egyesített szűrletet és mosófolyadékot vákuumban szárazra pároljuk, majd a kapott csapadékból a vízoldható részt elkülönítjük. Az oldószer vákuumban végzett eltávolítása után fehér színű maradékot kapunk, amelyet vizes acetonból átkristályositunk. így 112 mg mennyiségben fehér csapadékként a cím szerinti vegyületet kapjuk, amely csapadék olvadáspontja 196— 205 °C (bomlik). Molekulasúly a penta-TMS-származékra felvett tömegspektrum a:apján a C23H62N202Si5 képletre: számított: 578,3403, talált: 678,3378. CMR (D3O, extemális tetrametil-szilán referendaanyagra vonatkoztatott): 8 95,3, 94,9, 93,6, 71,1, 67,4, 67,0,62,9, 62,5, 61,0, 56,9, 35,9, 32,2 és 31,7. 3. példa 6'-Hidroxi-spektinomicin előállítása (V reakcióvázlat) 36 mg N,N' bisz-(benziloxi-karbonil)-6'-hidroxi-spektinomicin és 20 mg palládiumkorom 35 ml izopropanollal készült keverékét 1,8 kg/cm2 hidrogéngáz-nyomáson 2,25 órán át rázzuk, m ajd a katalizátort kiszűrjük és izopropanollal mossuk. A szirletet a mosófolyadékkal egyesítjük, majd 10 ml össztérfogatra betöményítjük. A koncéntrátumhoz 0,12 ml 1 n izopropanolos hidrogén-klorid-oldatot adunk, majd bepároljuk a kapott elegyet. Az ekkor kapott fehér csapadékot deutérium-oxidban újraoldjuk a 13C clkülöníté-5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 65 9
