181458. lajstromszámú szabadalom • Eljárás parazita ellenes C-076 vk 13-halogén- és 13-dezoxi-származékainak előállítására
19 181458 20 12,5 ml metilén-kloriddal hígítjuk és 200 g szilikagél GF-ből (0,210—0,062 mm szemcseméretű) álló oszlopra felvisszük. Az oszlopot ezután 1,4 ml metilénkloriddal eluáljuk. Az eluálás eredményeképpen a tri-n-butil-ón-hidrid és a tri-n-butil-ón-klorid teljes mennyiségét eltávolítjuk. Az eluálószert ezután etil-acetátra változtatjuk, majd az oldószerfronttal eluálódó terméket tartalmazó oldatot vákuumban bepároljuk. A visszamaradó olajat 2,0 ml metilén-kloridban oldjuk, majd a kapott oldatot egyenletesen felhordjuk négy darab 20 x 20 cm méretű, 500 p vastag, szilikagél GF jelzésű vékonyrétegkromatográfiás lemezre. Futtatószerként metilén-klorid és 30—60 °C forráspontú petroléter 1:1 térfogatarányú elegyét használjuk. A 0,11—0,28 Rf-értékű terméksávot lekaparjuk, majd etil-acetáttal eluáljuk. Az eluátumot bepároljuk, majd a visszamaradó üveges anyagot benzolból liofilizáljuk, 84 mg mennyiségben fehér port kapva. IR-spektrum (tiszta film): 3600—3200 (w, OH), 1710 (s, C = O), cm UV-spektrum (5,0 x 10 ‘5 M, CH3OH): Xmax: 253 nm (e = 27 000). Nagynyomású folyadékkromatográfiás elemzés eredményei: Vegyület A keverékben a %-os menynyiség Retenciós idő (perc) 1,3 2,3 ismeretlen 8 3,5, 7,5 8,1 (13R)-13-klór-l 3-dezoxi-5-(0-tercbutil-dimetil-szilil)-22,23-dihidro-C-076-Bla-aglükon és (13R)-13~ -klór-13-dezoxi-5-(0-terc-butil- • -dimetil-szilil)-22,23-dihidro-C-076-Blb-aglükon 5 14,4 13-dezoxi-5-(0-terc-butil-dimetilszilil)-22-23-dihidro-C-076-B 1 baglükon 12 17,4 13-dezoxi-5-(0-terc-butil-dimetil-szilil)-22-23-dihidro-C-076-B 1 a-aglükon 75 20,1 12. példa 13-Dezoxi-5-(0-terc-butil-dimetil-szilil)-22,23-dihidro-C-076-Blb-aglükon elkülönítése 32 mg, 75% 13-dezoxi-5-(0-terc-butil-dimetil-szilil)-22,23- -dihidro-C-076-Bla-aglükont és 12% 13-dezoxi-5-(0-tercbutil-dimetil-szilil)-22,23-dihidro-C-076-B 1 b-aglükont tartalmazó kiindulási anyag 400 pl metanollal készült oldatát két 200 pl-es aliquotra osztjuk, majd az aliquotokat a Whatman cég által szállított Partisii M9 10/50 ODS—2 jelzésű fordított fázisú nagy nyomású folyadékkromatográfiás oszlopon kromatografáljuk szobahőmérsékleten, eluálószerként 4,0 ml/perc sebességgel metanol és víz 39:1 térfogatarányú elegyét használva. Az eluálást refraktometriásán követjük, és a 13-dezoxi-5-(0-terc-butil-dimetil-szilil)-22,23-dihidro-C-076-Blb-aglükonnak megfelelő, 31,2 perc retenciós idejű csúcsot elkülönítjük. Az így elkülönített eluátumot szárazra pároljuk, majd 15 cm x 20 cm méretű, 250 p vastag, szilikagél GF jelzésű vékonyrétegkromatográfiás lemezen kromatografáljuk, futtatószerként metilén-kloridot használva. A 0,33—0,39 Rf-értékü terméksávot lekaparjuk, majd 2—2 ml etil-acetáttal ötször eluáljuk és az eluátumot szárazra pároljuk. Az üvegszerű maradékot benzolból liofilizáljuk, 300 pg fehér port kapva. IR-spektrum (tiszta film): 3600—3300 (w, OH), 1720 (s, C = O) cm A. UV-spektrum (3,2 x 10 5M, CH3OH): X max: 245 nm (s = 28 000) 252 nm (e = 27000) Nagynyomású folyadékkromatográfiás elemzés eredményei: Vegyület A keverékben a %-os menynyiség Retenciós idő (perc) ismeretlen 13-dezoxi-5-(0-terc-butil-dimetilszilil)-22,23-dihidro-C-076-B 1 b-32 1,3, 2,7, 3,5, 5,6, 6,8, 15,3-aglükon 68 17,9 13. példa 13-Dezoxi-22,23-dihidro-C-076-Bla-aglükon és 13-dezoxi-22,23-dihidro-C-076-B 1 b-aglükon előállítása 50 mg, 75% 13-dezoxi-5-(0-terc-butil-dimetil-szilil)-22,23- -dihidro-C-076-Bla-aglükont és 12% 13-dezoxi-5-(0-terc-butil-dimetil-szilil)-22,23-dihidro-C-076-Bl b-aglükont tartalmazó kiindulási anyag 1 vegyes%-os metanolos p-toluolszulfonsav-oldattal készült oldatát szobahőmérsékleten 3 órán át keverjük, majd 36,2 ml dietil-éterrel hígítjuk és 7,3 ml telített vizes kálium-hidrogén-karbonát-oldattal elegyítjük. A fázisokat elválasztjuk egymástól, majd a vizes fázist 14,5 ml dietil-éterrel mossuk. Az egyesített szerves fázisokat 20 ml vízzel mossuk, majd vízmentes nátrium-szulfát fölött szárítjuk és vákuumban bepároljuk. A visszamaradó olajat feloldjuk 2,0 ml metilén-kloridban, majd az így kapott oldatot egyenletesen felvisszük négy 20 cm x 20 cm méretű, 500 p vastag, szilikagél GF jelzésű preparatív vékonyrétegkromatográfiás lemezre. A futtatást metilén-klorid és 30—60 °C forráspontú petroléter 2:1 térfogatarányú elegyével végezzük. A 0,04—0,12 R-értékű terméksávot lekaparjuk, majd 25—25 ml etil-acetáttal ötször extraháljuk. Az eluátumot szárazra pároljuk, majd a visszamaradó üveges csapadékot benzolból liofilizáljuk. így 32,6 mg mennyiségben fehér port kapunk. IR-spektrum (tiszta film): 3600—3200 (m. OH), 1710 (s, C = O) cm A UV-spektrum (1,9 x 10 '5M, CH3OH): Umax: 245 nm (e = 28 000) 252 nm (e = 27 000). Nagynyomású folyadékkromatográfiás elemzés eredményei: Vegyület A keverékben a %-os menynyiség Retenciós idő (perc) ismeretlen 4 4,2 15,1, 16,8 13-dezoxi-22,23-dihidro-C-076--B1 b-aglükon 17 18,3 ismeretlen 6 19,2 13-dezoxi-22-23-dihidro-C-076--Bla-aglükon 73 20,7 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 65 10
