181457. lajstromszámú szabadalom • Eljárás azobiciklo-heptén-származékok előállítására
33 181457 34 ban történő szárítás céljából egy gömblombikba visszük át. A maradékot megosztjuk EA-víz és 1 mólos KH2P04 között, majd a vizes fázist kétszer EA-tal és egyszer kloroformmal extraháljuk. A szerves fázisokat sós vízzel mossuk. Az összegyűjtött szerves fázisokat vízmentes magnéziumszulfát- 5 tál szárítjuk, leszűrjük N2 áramban, majd nagy-vákuumban betöményítve nyers (12/7) képletü vegyületet kapunk. Preparatív vékonyréteg kromatográfiával tisztítva (a lemezt kétszer 40%-os aceton-hexán eleggyel eluálva; a megfe- 10 lelő u.v. sávot nagy mennyiségű kloroformmal isméiteken extrahálva) visszanyert kiindulási anyagot és (12/7) képletű vegyületet kapunk. J) lépés (AX reakcióvázlat) 0,7 ml DMSO-ban oldott (CaH2-ről 8 Hgmm nyomáson 15 desztillálva és Linde 4A molekulaszűrő felett tárolva) 49 mg (0,064 mmól) (12/7) képletű vegyülethez 100 pliter diizopropilamint adunk (NaH-ról N2 atmoszférában desztillálva és Linde 4A molekulaszűrő felett tárolva). Az így lezárt reakcióelegyet néhány percig keverjük, majd 2 óráig állni hagy- 20 juk. Az amint és a DMSO nagy részét nagy-vákuumban betöményítjük, külső fűtés nélkül. A maradékot gyorsan áthajtjuk egy szilikagéllel töltött kromatografáló oszlopon (melyet EA-tal készítünk és eluálunk) és így eltávolítjuk a visszamaradt DMSO-t. Az u.v. abszorpcióval rendelkező 25 összes frakciót betöményítjük N2 áramban, és az anyagot vékonyréteg szilikagél lemezen kromatografáljuk. (eluálószer= 50%-os EA-kloroform) a kívánt u.v. sáv ismételt extrakciójára nagy mennyiségű kloroformot használunk. A visszanyert kiindulási anyagot a reakcióban és az izolációs 30 eljárásban még kétszer felhasználjuk további kívánt vegyület előállítása érdekében. K) lépés (AY reakcióvázlat) 5,2 g (12/8) képletű vegyülethez 0,60 ml dioxánt, 0,05 ml etanolt, 0,35 ml ioncserélt vizet és 0,01 ml 1 mólos K2HP04- 3 5 ot adunk. A kapott tiszta oldatba 5 mg 10%-os Pd/C-ot szuszpendálunk. A szuszpenziót N2-vel, majd 5—6-szor 50 psi H2-vel átöblítjük és levákuumozzuk. Végül, 30—40 percig 50 psi H2 atmoszférában összerázzuk. Centrifugálás után a Pd/C-t kimossuk és 2—3-szor 0,5 ml ioncserélt vízadagok- 40 kai centrifugáljuk. Az egyesített centrifugátumokat 5xl— 2 ml éterrel extraháljuk. A maradék étert vákuumban eltávolítjuk és a vizes oldatot XAD-2 oszlopon engedjük át (20 x 104 mm). 100 cseppnyi (6—7 ml) frakciókat gyűjtünk össze folyamatos u.v. ellenőrzés mellett ioncserélt vízzel elu- 45 álva. Az erősen uv abszorbeáló anyag megjelenése a 3—5-ös frakció körül várható és általában a 25—30 frakció körül fejeződik be. A korai frakciók uv vizsgálatával kizárjuk azt a néhány 270—280 mp tartományban igen erősen az abszorbeáló frakciót. A megmaradt frakciókat összegyűjtjük és 50 lioíilizáljuk. A maradékot úgy vizsgáljuk, hogy feloldjuk 10,0ml ioncserélt vízben és mérjük az u.v. abszorbciót 298 mp-nál. A vizsgálat a kívánt termék 10—30%-os kihozatalát mutatja számú zselatin kapszulában. Más esetben 145 mg-nál több komponens összekeverése lehet szükséges nagyobb kapszulában, tablettában vagy pirulában. Az alábbi példák a gyógyászati készítmények előállítását mutatják be: Tabletta 3-(2-aminoetiltio)-6-hidroximetil--7-oxo-1 -azabiciklo(3,2,0)hept-2--én-2-karbonsav kukoricakeményítő U.S.P. Dikalcium-foszfát laktóz U.S.P. magnézium-sztearát Tablettánként 125 mg 6 mg 192 mg 190 mg 800 mg-ra kiegészítve Az aktív alkotót összekeverjük a dikalcium-foszfáttal, laktózzal és körülbelül a kukoricakeményítő felével. Az elegyet ezután 15% kukoricakeményítő péppel granuláljuk (6 mg) és durván megszitáljuk. 45 °C-on szárítjuk és 16-os szitán újra megszitáljuk. A hiányzó kukoricakeményítőt és a magnézium-sztearátot hozzáadjuk és az elegyet közelítőleg 12 mm átmérőjű, 800 mg súlyú tablettává sajtoljuk. Parenterális oldat Ampulla: 3-(2-aminoetiltio)-6-hidroximetiI--7-oxo-1 -azabiciklo(3,2,0)hept-2--én-2-karbonsav Hígító: steril víz Szemhez való oldat 3-(2-aminoetiltio)-6-hidroximetil--7-oxo-1 -azabiciklo(3,2,0)hept-2--én-2-karbonsav hidropropil-metilcellulóz steril víz Fülhöz való oldat 3-(2-aminoetiltio)-6-hidroximetil-7-oxo-azabiciklo(3,2,0)hept-2-én-2-karbonsav benzalkonium-klorid steril víz Helyi kezelésre szolgáló kenőcs 3-(2-aminoetiltio)-6-hidroximetil-7-oxo-1 -azabiciklo(3,2,0)hept-2- -én-2-karbonsav polietilén-glikol 4000 U.S.P. polietilén-glikol 400 U.S.P. Tablettánként 500 mg 2 ml 100 mg 5 mg 1 ml-re 100 mg 0,1 mg 1 ml-re 100 mg 400 mg LO g A fenti készítményekben szereplő hatóanyagot egyedül, vagy más biológiailag aktív hatóanyagokkal kombinálva is használhatjuk, például más antibiotikumokkal mint lincomycin, penicillin, sztreptomycin, novobiocin, gentamicin, neomicin, colistin és kanamycin, vagy egyéb gyógyhatású szerekkel, mint például probenecid. 27. példa Gyógyászati készítmény előállítása Egységdózist készíthetünk úgy, hogy összekeverünk 3-(2- -aminoetiltio)-6-hidroximetil-7-oxo-1 -azabiciklo(3,2,0)hept-2-én-2-karbonsavat 20 mg laktózzal és 5 mg magnéziumsztearáttal, és a 145 mg-nyi elegyet 3-as számú kapszulába helyezzük. Hasonlóképpen, több hatóanyagot és kevesebb laktózt alkalmazva más dózisformát készíthetünk a 3-as 28. példa A találmány szerinti eljárással előállítható I általános képletű vegyületek közül néhány vegyület pg/ml dimenzióban kifejezett minimális gátlási koncentrációit (MIC-értékeit) a következő táblázatban adjuk meg. A vegyületek azonosítására a 15. példában közölt táblázatban megadott sorszámokat használjuk. 60 65 17
