181008. lajstromszámú szabadalom • Eljárás 1-helyzetben szarkozil-csoportott és 8 helyzetben alfa -hidroxi karbonsavat tartalmazó antagonista hatású angiotenzin-II analógok előállítására
5 181008 6 kalmas szervetlen vagy szerves vivőanyag kíséretében tartalmazzák. A gyógyszerkészítmények lehetnek szilárd liofilizátumok, ezekben vivőanyagként a peptidekkel nem reagáló anyagok, például szénhidrátok jöhetnek tekintetbe, lehetnek továbbá híg vagy tömény szuszpenziók és emulziók, amelyek különböző tartósító és stabilizáló segédanyagokat is tartalmazhatnak. 1. táblázat A 8-helyzetben a-hidroxi-karbonsavakat tartalmazó angiotenzin-II analógok hatása a vérnyomásra i. V. s. c. fiz. só s. c. CMC s. c. zselatin Analógok d n % P d n % P d n % P d n % P (Sár1 2 3 *, L-Lac8 )Ang-II 10 5 23 15 50 5 29 90 50 6 25 45 50 5 24 90 20 5 29 15 100 5 33 120 100 6 27 90 100 5 32 90 200 5 47 180 200 5 22 45 200 5 28 120 (Sár1, L-Lac-OEt8)Ang-II 10 5 27 12 100 6 15 45 100 5 41 90 20 8 40 25 (Sár1, HMV8)Ang-II 10 5 33 45 100 5 18 30 100 5 35 300 20 6 40 20 Saralasin 10 5 32 15 100 6 29 60 100 5 23 45 200 4 23 200 5 24 45 200 7 28 90 n = dózis #xg/kg; n = kísérletek száma; p = perc A gyógyszerkészítmények a különböző eredetű hipertenziók differenciált diagnosztizálására, továbbá terápiásán a renális eredetű magas vérnyomás normalizálására, hipertenzív krízisekben, szekunder szívelégtelenségben stb. alkalmazhatók. A találmány szerinti eljárás foganatosítási módjait az alábbi példák szemléltetik. A példákban alkalmazott rövidítések a szakirodalomban használt rövidítéseknek felelnek meg [J. Biol. Chem. 247 977 (1972)]. További rövidítések: Lac a tej sav, és HMV a 2-hidroxi-3-metil-valeriánsav acilgyöke, amelyek a hidroxilcsoport oxigénatomján és a karbonilcsoporton keresztül kapcsolódnak a szomszédos csoportokhoz, Pfp = pentafluorfenil. A vegyületek előállítása során a bepárlásokat mindig Büchi-féle Rotavapor készülékben végeztük. Az olvadáspont-meghatározások Dr. Tottoli-féle (Büchi) készülékben történtek. A vékonyréteg kromatogrammokat Stahl szerint készített „Kieselgel-6” márkanevű szilikagél-rétegen készítettük. A kromatogrammok kifejlesztésére a következő oldószerelegyeket használtuk: (1) n-hexán : etilacetát = 4:1 (2) etil-acetát : (piridin : ecetsav : víz = = 20:6: 11) = 95 :5 (3) etil-acetát : (piridin : ecetsav : víz = = 20: 6: 11) = 90: 10 (4) etil-acetát : (piridin : ecetsav : víz = = 20: 6: 11) = 80:20 40 (5) etil-acetát : (piridin : ecetsav : víz = = 20 : 6 : 11) = 70 : 30 (6) n-butanol : ecetsav : víz 4 : 1 : 5 (felső fázis) (71 n-butanol : ecetsav : piridin : víz = = 30 : 6 : 20 : 24 45 (8) n-butanol : etil-acetát : ecetsav : víz = =1:1:11 A vékonyréteg kromatogrammok előhívása ninhidrinnel illetőleg a klórtolidin-káliumjodidos mód- 50 szerrel történt. A végtermékek tisztítására az alábbi általános módszert alkalmaztuk: 0,5 g szabad peptidet 4 ml 0,01 mólos ammó- 55 nium-acetát-oldatban oldunk, majd az oldatot egy 0,5 liter karboximetil-cellulózt (CMC-52) tartalmazó, előzőleg a fenti pufferral egyensúlyba hozott oszlopra rétegezzük. Gradians-keverővel 1,5 liter 0,01 mólos és 1,5 liter 0,4 mólos ammónium-acetát- 60 -oldatokat összekeverve gradiens-elúciót alkalmazunk. Az áramlási sebesség 25 ml/óra; az eluátumból 10 ml-es frakciókat gyűjtünk. Az oszlopról lejövő eluátumot LKB Uvicord-II segítségével folyamatosan regisztráljuk, majd a kapott görbe alapján a főfrak- 55 ciót Leybold-Hereus liofilező készülékben liofilez-3
