181008. lajstromszámú szabadalom • Eljárás 1-helyzetben szarkozil-csoportott és 8 helyzetben alfa -hidroxi karbonsavat tartalmazó antagonista hatású angiotenzin-II analógok előállítására
181008 4 .1 A találmány értelmében a fenti meghatározásnak megfelelő X—Arg—Val—Tyr—Ile—His—Pro—Y—OA (I) általános képletű vegyületeket oly módon állítjuk elő, hogy a) az A helyén hidrogénatomot tartalmazó vegyületek előállítása esetén valamely (II) általános képletű védett oktapeptid-származékról B-X-Arg(C)-Val—Tyr(D)-Ile-His(E)—Pro-Y-OF (II)- e képletben B valamely, a szarkozin aminocsoportjának átmeneti védelmére alkalmas acidolízissel vagy katalitikus hidrogenolízissel eltávolítható csoportot, előnyösen benziloxikarbonil- vagy t-butiloxikarbonil-csoportot, C az Arg guanidinocsoportjának átmeneti megvédésére alkalmas védőcsoportot, előnyösen nitrovagy tozilcsoportot, D a Tyr aromás hidroxilcsoportjának átmeneti védésére alkalmas védő csoportot, előnyösen benzil- vagy szubsztituált benzilcsoportot, E a His imidazolcsoportjának átmeneti védésére alkalmas védőcsoportot, előnyösen dinitro-fenil-csoportot, F a C-terminális aminosav karboxilcsoportjának védésére alkalmas enyhe savas behatásoknak ellenálló, de katalitikus hidrogenolízissel vagy erősebb savak hatására eltávolítható védőcsoportot képvisel — vagy b) az A helyén 1-5 szénatomos alkilcsoportot tartalmazó vegyületek előállítása esetén valamely (III) általános képletű védett oktapeptid származékról B-X-Arg(C)-Val-Tyr(D)—Ile— —His(E>-Pro—Y—OA (III)- e képletben A, B, C, D és JE a fent megadott jelentésűek - a védőcsoportokat szelektíven vagy egyszerre eltávolítjuk és kívánt esetben az (I) általános képletű vegyületet savaddíciós sójává vagy komplexévé alakítjuk. A szintézishez felhasznált (II), illetőleg (III) általános képletű oktapeptid-származékokat bármely, a peptidkémiában használatos módszerrel például a 168 431 számú magyar szabadalmi leírásban ismertetett eljárás alkalmazásával állíthatjuk elő. Az eljárásban az oldalfunkciós csoportok védésére olyan védőcsoportokat kell használni, amelyek a kapcsolás utáni N-védőcsoport eltávolításakor alkalmazott acidolízis körülményei közt stabilisak. A találmány szerinti eljárás egyik előnyös kiviteli módja szerint a (II), illetőleg (III) általános képletű védett oktapeptid-származékokat a lépésenkénti felépítés elve alapján építjük fel, amikor is az egyes aminosav származékok NH2-csoportjának átmeneti megvédésére acidolízissel könnyen eltávolítható védőcsoportot, például t-butiloxikarbonil-csoportot használunk, majd a többi védőcsoportot — a dinitro-fenil-csoport tiolízissel történő eltávolítása után - egy lépésben, katalitikus hidrogenolízissel távolítjuk el. A 8-helyzetű alfa-hidroxikarbonsav beépítése célszerűen úgy történik, hogy valamely (IV) általános képletű alfa-hidroxikarbonsavésztert H-Y-OZ (IV)- e képletben Z alkil- vagy aralkil-csoportot képvisel valamely amino csoportján - célszerűen t-butiloxi-karbonil-csoporttal - védett prolinnal reagáltatunk. Az így kialakított -CO-O— -csoport a szintézis további lépései során stabil. Az (I) általános képletű vegyületeket önmagukban ismert módszerekkel, célszerűen karboximetil-cellulózos ioncserélő kromatográfiával tisztítjuk. Ennek során a vegyületeket liofilezett porok alakjában kapjuk, melyek alkalmasak különböző gyógyszerkiszerelési formák előállítására. Az (I) általános képletű vegyületek antagonista hatását altatott hím macskákon vizsgáltuk. A vizsgálatok úgy történtek, hogy mindkét oldali nyaki vagus átmetszése és ganglionblokkolás után Hypertensin (CIBA) infúziót adtunk (0,5 pg/kg/perc), majd az emelkedett vérnyomás stabilizálódása után adtuk a vizsgálandó anyagokat intravénásán vagy szubkután, vizes fiziológiás, illetve vivőanyagot tartalmazó oldatban. A vérnyomásesést Hgmm-ben értékeljük, a kezelés előtti érték %-ában. A statisztikai értékelés Student-féle egymintás „t” teszttel történt a vérnyomás különbségekből. A hatástartam az utolsó, még szignifikáns vérnyomásesést (p = 5%) jelenti. Az eredményeket az alábbi 1. táblázatban foglaltuk össze. A táblázat adataiból látható, hogy valamennyi 8-helyzetben a-hidroxilkarbonsavat és az 1-helyzetben Sar-t tartalmazó angiotenzin-II analóg jelentős vérnyomáscsökkentő hatással bír. A hatás mértéke szubkután adagolási mód esetén is jelentős; vivőanyagot tartalmazó oldatokban a hatás időtartama egyes esetekben több órát is elér. Gyógyászatilag felhasználható komplexen a találmány szerinti eljárással készített peptidek oly vegyületei értendők, amelyek bizonyos szerves vagy szervetlen anyagok hozzáadására keletkeznek és az anyagnak elnyújtott hatást biztosítanak. Ilyen szerves vegyületek lehetnek bizonyos zselatinok, karboximetil-cellulózok, alginsav-észterek, polifloretin-foszfátok, aminosav-polimerek és kopolimerek stb. A szervetlen vegyületek közül bizonyos fémek, például a cink hidroxidja és nehezen oldódó sói, például foszfátjai jöhetnek számításba. A találmány szerinti peptideket, valamint ezek sóit és komplexeit a szokásos gyógyszerkészítmények formájában használhatjuk fel a gyógyászatban. Az ilyen gyógyszerkészítmények a találmány szerinti vegyületeket enterális vagy parenterális beadásra al-5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 65 2
