180926. lajstromszámú szabadalom • Eljárás a központi idegrendszerre ható, új TRH-analóg tripeptid-amidok előállítására
23 180926 24 punk, R{5 =0,10, [cí]d = + 13,5° (c=1, vízben), aminósav-analízis: His: 1,00 (1,0); Pip: 0,96 (1,0). 17. példa Orotü-L-hisztidil-L-homoprolin-amid 5,0 g (16,28 mmól) Oro-His-N2II:;-t szuszpendálunk 135 ml DMFA-ban és a szuszpenzióhoz 5,99 ml (48,84 mmól) 8,1 n sósavas dioxánt öntünk. A kapott oldatot —15 °C-ra hűtjük és keverés közben 2,13 ml (17,9 mmól) terc-butil-nitritet csepegtetünk hozzá. Ezután a reakcióelegyet 20 percig —10 °C-on keverjük, majd 4,56 ml (32,56 mmól) trietilamint, 10 ml DMFA-ban oldott 2,05 g (16,28 mmól) H-HPro-NH2-ot, végül még 2,28 ml (16,28 mmól) trietil-amint csepegtetünk hozzá.—10 °C-on. Becsepegtetés után a reakcióelegyet további 1 óra hosszat keverjük —10 °C-on, majd éjszaka 2 °C-on állni hagyjuk. Másnap a csapadékot kiszűrjük, a szűrletet vákuumban bepároljuk és a maradékot etilacetáttal eldörzsöljük. Az így kapott 4,2 g (67%) nyers termékből 1,3 g-ot karboxi-metil-cellulóZr-23 és karboxi-metil-cellulóz-52 1:1 arányú keverékéből készített oszlopra visszük és 0,005—0,1 mólos ammónium-acetát-oldattal (pH 5) eluáljuk. A tiszta terméket tartalmazó frakciókat liofilizáljuk. így 802 mg amorf Oro-his-HPro-NH2-t kapunk, R® =0,10, [«]d=—12,8° (c=l, vízben), aminósav-analízis: His: 1,00 (1,0); Hpro: 0,91 (1,0). 18. példa L-6-Ketopiperidin-2-karbonil-L-norvdlü-L-tiazolidin-4-karbonsav-amid 2,55 g (9,5 mmól) H-Nva-Tca-NHo. HCl-ot 30 ml DMFA-ban szuszpendálunk és a szuszpenzióhoz, jeges hűtés és keverés közben 3,09 g (10 mmól) Kpc-OPFP-t és 1,33 ml (9,5 mmól) trietilamint adunk. 5 perc keverés után újabb 1,33 ml (9,5 mmól) trietilamint adunk a reakcióelegyhez, majd további 20 perc keverés után vákuumban bepároljuk. A maradék olaj éter alatt éjszaka hűtőszekrényben állva kikristályosodik. Másnap a kristályokat kiszűrjük, éterrel és hideg alkohollal mossuk. A 3,25 g nyers terméket vízben oldva derítjük, a víztiszta oldatot bepároljuk és a kristályos maradékot 20 ml etanollal eldörzsöljük és éjjelen át hűtőszekrényben állni hagyjuk, maid kiszűrjük. így 2,0 g (59%) Kpc-Nva-Tca- NH2-ot kapunk, olvadáspont : 183—185 °C, R,- = 0,47, [a]^5=—136,0° (c=l, ecetsavban). 19. példa L-6-Ketopiperidin-2-karbonil-L-norválü-L-homoprolin-amid 1. lépés terc-Butiloxikarbonil-L-homoprolin-amid 2,29 g (10 mmól) BOC-HPro-OH-t feloldunk 30 ml etilacetátban, az oldathoz 1,4 ml (10 mmól) trietilamint adunk, majd —10 °C-on hozzácsepegtetünk 1,3 ml (10 mmól) klórszénsav-izobutilésztert. 15 perc keverés után a reakcióelegybe —10 °C-on fél órán át ammónia-gázt vezetünk, majd 2 órát 0—5 °C-on állni hagyjuk. Ezután a csapadékot kiszűrjük, a szűrletet bepároljuk, a maradék olajat feloldjuk 30 ml kloroformban és az oldatot kétszer 10 ml n sósavval, kétszer 10 ml n nátrium-hidrogén-karbonát-oldattal és egyszer 10 ml vízzel kirázzuk. Vízmentes nátrium-szulfáttal történő szárítás után a kloroformos oldatot bepároljuk és a maradék olajat nhexánnal kristályosítjuk. Az 1,95 g nyers terméket etilacetát-éter elegyből átkristályosítva 1,78 g (78%) BOC-HPro-NH2-ot kapunk, olvadáspont: 138—140 °C, Rf =0,43, [a]o=—24,85° (c=l, ecetsavban). Elemzési eredmények a CnH2o03N2 összegképlet (molekulasúly: 228,29) alapján: számított: C 57,87%, H 8,83%, N 12,27%; talált: C 57.60%, H 8,89%, N 12,11%. 2. lépés L-Homoprolin-amid-hidroklorid 1,6 g (7 mmól) BOC-HPro-NH2-ot melegen feloldunk 10 ml etilacetátban. Az oldatot szobahőmérsékletre hűtjük és 10 ml 6 N sósavas etilacetátot öntünk hozzá. A reakcióelegyet 1 óra hosszat állni hagyjuk, majd éterrel hígítva a csapadékot eldörzsöljük és kiszűrjük. így 1,05 g (91%) H-HPro-NH2. HCl-ot kapunk, olvadáspont: 178—180 °C, Rf6 =0,32, [afD5 = +26,2° (c=l, metanolban). 3. lépés L-Norvalü-L-homoprolin-amhl-hidroklorid 0,£9 g (6 mmól) H-HPro-NH2.HCl-ot szuszpendálunk 20 ml DMFA-ban és a szuszpenzióhoz keverés közben, 0,84 ml (6 mmól) trietilamint és 2,3 g (6 mmól) BOC-Nva-OPFP-t adunk. 15 perc után újabb 0,84 ml (6 mmól) trietilamint adunk a reakcióelegyhez, majd további 1 óra keverés után vákuumban bepároljuk. A maradékot feloldjuk 50 ml kloroformban és az oldatot kétszer 10 ml n sósavval, kétszer 10 ml n nátriumhidrogén-karbonát-oldattal kirázzuk, vízmentes nátrium-szulfáttal szárítjuk és bepároljuk. A maradék olajat feloldjuk 6 ml etilacetátban, és az oldathoz 10 ml 6 n sósavas etilacetátot öntünk. A reakcióelegyet 1 órai állás után éterrel hígítjuk, az amorf csapadékot eldörzsölés után kiszűrjük és vákuumban, vízmentes nátriumhidroxid felett szárítjuk. így 1,22 g (89,5%) HNva-HPro-NH2. HCl-ot kapunk, R^ =0,12. 4. lépés L-6-Ketopiperidin-2-karbonil-L-norvalil-L-homoprolin-amid 1,22 g (5,37 mmól) H-Nva-HPro-NH2. HCl-ot feloldunk 20 ml DMFA-ban és az oldathoz 0,75 ml (5,37 mmól) trietilamint és 1,7 g (5,5 mmól) Kpc-OPFP-t adunk. 5 perc keverés után a reakcióelegyhez újabb 0,75 ml (5,37 mmól) trietilamint adunk, majd további 20 perc keverés után vákuumban bepároljuk. A maradékot éterrel eldörzsöjük és az 1,8 g amorf nyers terméket 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 65 12
