180881. lajstromszámú szabadalom • Eljárás vér és fehérjék frakcionálására használható, aggregált polieleaktrolitok előállítására
180881 17 18 Példa eljárása Hozzáadott összes, víz Vízeltávolító műveletek Albuminmegkötő kapacitású aggregált nem-aggregált Nincs vízhozzáadás MIBPA-val; 1,0 ml víz hozzáadása DMAPA-' /al 11 1,0 1 1,35 — 1 1,0 2 1,63 — 10 1,0 1 — 0,87 8 1,0 2 — 1,28 / 1,5 ml víz hozzáadása MIBPA-val; 4,5 ml víz hozzáadása DMAPA-val 11 6,0 1 2,75 1 6,0 2 2,40 — 10 6,0 1 — 1,80 8 6,0 2 — 2,10 16. példa A leírt típusú aggregált termékek a szintézisfolyamatnál nemcsak jobb szűrési tulajdonságokat mutatnak, hanem a 25 plazma-frakcionálás során jó folyási jellemzőkkel is rendelkeznek. így ha plazma-frakcionáláskor a kívánt fehérjéket a plazmaoldatokból nem-aggregált polimeren adszorbeáltatjuk, a polimert az anyalúgtól centrifugálással kell elválasztani, mivel a szűrőpapír vagy szűrőkendő azonnal eltömödik. A találmány szerinti aggregált termékek jó és stabil szűrési tulajdonságaik következtében alkalmazhatók plazma-frak- 5 cionálási célokra és az anyalúgtól szokványos vákuumszűrési eljárásokkal, rövid szűrési idő alatt, a szűrő jelentősebb eltömődése nélkül választhatók el a fehérjetartalmú anyag jelenlétében, ezáltal fölöslegessé téve a költséges centrifuga-jellegű készülékek használatát. A leírt polielektrolitok gyors szűrési tulajdonságai töltött oszlopokon is kimutathatók, csak gravitációs átfolyást alkalmazva. Ebből a célból 2,2 cm belső átmérőjű, 30 cm hosszú üvegoszlopokat készítünk, melyeket az alsó kivezetésnél kis üveggyapot-dugóval megfelelően bedugaszolunk a 15 gyanta benntartása céljából. A következő táblázatban leírt gyantákat éjszakán át 0,04 mólos sóoldattal (pH 4) egyensúlyba hozzuk és az oszlopot 8,5—10 cm magasságig megtöltjük. Minden alkalmazott gyanta 5% MIBPA-t tartalmaz, így a keresztkötés-sűrűségi tényezőt állandó értéken tartjuk. 20 A duzzadásban megmutatkozó különbségek a hozzáadott viz és a vízeltávolítási műveletek különbségeiből ered, a fentebb leírtak értelmében. Megmérjük a 0,04 mólos sóoldat folyási sebességét aggregált és nem-aggregált polielektrolit-típusok esetén. A „relatív folyási sebesség” értékét cm3 per óra per gyantaágyegységtérfogat alakjában adjuk meg a gravitációs áramlású oszlopra, a próba alatt a gyanta tetején 20 cm magas sóoldatszintet fenntartva. Táblázat — 16. példa Példa eljárása Hozzáadott víz, ml Víze!tá\olító műveletek Duzzadás! index Albuminkapacitás Folyási sebesség MIBPA-val DMAPA-val 8* 1,5*** 4,5 2 9,4 2,10 0,22 11 nincs 1,0 1 9,3 1,70 0,59 1 1,5 4,5 2 11,5 2,14 0,88 1 3,4 3,0 2 13,1 2,89 1,39 1** 3,4*** 3,0 2 16,4 3,31 1,75 9* nincs nincs 2 3,05 — 0,12 5 nincs nincs 2 2,20 — 1,88 I Folyási sebesség = cm3/óra (gyantaágy-egység) cm3/térfogat * Nem aggregált minden többi aggregált ** 7 órán át aggregált - minden többi 1 órán át aggregált *** 90 "C-on hozzáadott MIBPA minden többinél 120- 125 °C-on hozzáadott MIBPA 17. példa DM APA mellett a 4. példában használt HOEtA-t más aminokkal helyettesítjük. Ezen aggregált termékek összetételét Több aggregált polielektrolitet állítunk elő a 4. példa mód- és esetleges egyéb változásait a következő táblázatban foglalszerével, azzal a különbséggel, hogy az anhidridekkel reagál- 50 juk össze, tatott harmadik amint változtatjuk, azaz a MIBPA és Próba”* összetétel, mól% Termék formája MIBPA DMAPA Harmadik amin 1 5(10,9 g) 5(7,66 g) 85(107,3 g) 3-hidroxi-propil-amin Sz. A. 2 5 5 85(107,3 g) 3-hidroxi-propil-amin HCl** 3 5 5 85(113 g) 2-hidroxi-propil-amin Sz. A. 4 5 5 85(127 g) 3-metoxi-propil-amin Sz. A. 5 5 5 85(127 g) 3-metoxi-propil-amin HCl** 6 20(43,57 g) 5 55(86,9 g) 3-metoxi-propil-amin Sz. A * Hexametilén-diamin ** A 4. példa módszerével előállítva; az 5. példa eljárással feldolgozva. *** Az l 11. próbában 1,5 mól (193 g) EMA-t használunk, a 4. példa szerint; a 12. próbában EMA helyett 0,5 mól (101 g) sztirol/maleinsavanhidrid kopolimert használunk; és a 13. próbában EMA helyett 1,0 mól (154 g) izobutilén-maleinsavanhidrid kopolimert alkalmazunk kiindulási polimer nyersanyagként 9
