180881. lajstromszámú szabadalom • Eljárás vér és fehérjék frakcionálására használható, aggregált polieleaktrolitok előállítására
15 180881 16 Oldószer Aggregé lás körülményei Ülepedési idő perc Hőmérséklet *C idő óra : perc 145 0:30 1 perc, 14 mp 150 0:00 1 perc, 10 mp 150 0: 15 0 perc, 36 mp 14. példa A diszperzióban levő részecske nagyságának mértéke — akár aggregált, akár aggregálatlan állapotban — a duzzadási index; ez a víz vagy egyéb diszpergálószer mennyisége grammokban, amelyet egyensúlyi állapotban 1 gramm polimerszármazék abszorbeál. Alkalmas méretű mintát fölös menynyiségű diszpergálószerben diszpergálunk és pH-ját 4-re vagy más kívánt értékre állítjuk be. A diszperziót 1 óráig az egyensúly beállásáig állni hagyjuk, majd 30 percig 750 x g sebességgel lemért súlyú centrifugacsőben centrifugáljuk A felülúszót leöntjük és lemérjük a leülepedett, duzzadt gél súlyát. A kísérletekhez diszpergálószerként 0,04 mólos sóol datot és pH = 4,0-et alkalmazunk. A duzzadási index így az 1 gramm polimer által abszorbeált 0,04 mólos sóoldat súlya Ismeretes, hogy a duzzadás fordítva arányos a térhálós oldhatatlan gyanták keresztkötéseinek sűrűségével. Növekvő mennyiségű MIBPA-val előállított származékok sorozatánál a duzzadás a várakozásnak megfelelően csökken, míg minden más paraméter azonos marad. A találmány szerinti aggregált anyagoknál azonban azt találtuk, hogy bármilyen konstans MIBPA-koncentrációnál és azonos keresztkötés-sűrűségnél az aggregátum duzzadása könnyen változtatható és a duzzadás jelentősen eltér a nem aggregált származékoktól, ha változtatjuk az aggregált polielektrolit előállítása folyamán a hozzáadott víz mennyiségét és változtatjuk a reakcióban képződött víz eltávolítására szolgáló műveletek számát. Az 1, 8, 10. és 11. példa szerint MIBPA-val és DM APA - val számos aggregált és nem-aggregált polimer készítményt állítunk élő, de változtatjuk a MIBPA-val vagy DM APA-val hozzáadott víz mennyiségét. A termékek duzzadásában tapasztalt különbségeket a következő táblázat mutatja. Vízeltávolító műveletek Duzzadási index Példa eljárása Hozzáadott összes víz Aggregált nem-aggregált Nincs vízhozzáadás MIBPA-val; 1,0 ml víz hozzáadása DMAPA-val íi 1,0 1 10,71 i 1,0 2 11,23 10 1.0 1 — 8 1,0 2 — 1,5 ml víz hozzáadása MIBPA-val; 4,5 ml víz hozzáadása 15 DMAPA-val 11 6,0 1 12,98 1 6,0 2 13,00 — 10 6,0 1 — 8,88 8 6,0 2 — 9,43 15. példa 25 Ahogy a duzzadás változik a MIBPA-val és DMAPA-val hozzáadott víz mennyiségétől és a vízeltávolítás módjától függően, ugyanúgy változik a gyanta-termék fehérjeadszorbeáló kapacitása. 30 A fehéijemegkötő képességet a következő módon vizsgáljuk. 40 mg humán albumint és 10 mg amin- vagy sóformájú polimer terméket 1,0 ml 0,04 mólos sóoldatban diszpergálunk és a pH-t 7,0-re állítjuk be. A szuszpenziót 30 percig rázzuk, közben a pH-t a fenti értéken tartjuk. 30 perces 35 adszorpciós periódus után a gyanta-fehéije-komplexet centrifugáljuk és a felülúszót félretesszük. Az üledéket 3 x 1,0 mi vízzel mossuk (5 perc rázás, centrifugálás) és meghatározzuk az egyesített felülúszók fehérjetartalmát [Miller-Lowry, Anal. Chem. 31,964 (1959)]. Az albuminmegkötő kapacitást 40 az 1 g polimer termék által adszorbeált albumin mg-jainak számával adjuk meg. A 14. példában felsorolt preparálási változatokat a következő táblázatban ismét összegezzük, de itt a preparálási változatoktól függő albuminmegkötő kapacitást tüntetjük 45 fel. Táblázat — 14. példa Aggregált és nem-aggregált anyag összehasonlítása. Duzzadás a hozzáadott víz és a vízeltávolító műveletek számának függvényében. Minden termék 5 mól% MIBPA-t és 90 mól% DMAPA-t tartalmaz. Táblázat — 15. példa Aggregált és nem-aggregált anyag összehasonlítása. Albuminmegkötő kapacitás a hozzáadott víz mennyiségének és a vízeltávolító műveletek számának függvényében. Minden termék 5 mól% MIBPA-t és 90 mól% DMAPA-t tartalmaz. 50 Vízeltávolító műveletek Duzzadási index 55 Vízeltávolító műveletek Albuminmegkötő kapacitású Példa eljárása Hozzáadott összes víz Aggregált nem-aggregált Példa eljárása Hozzáadott összes víz aggregált nem-aggregált Nincs vízhozzáadása sem MIBPA-val, sem DMAPA-val 60 Nincs vízhozzáadás sem MIBPA-val, sem DMAPA-val 11 íi nincs 1 9,54 — nincs 1 1,53 í nincs 2 10,05 — 1 nincs 2 1,79 10 nincs 1 9,44 10 nincs 1 — 8 nincs 2 — 8,91 65 8 nincs 2 — 0,90 1,02 8
