180723. lajstromszámú szabadalom • Eljárás fáldalomcsillapító hatású pentapeptid-származékok előállítására
29 180723 30 adunk 2,47 g (0,012 mól) N.N'-diciklohexü-karbodiimidet. 2 órán át 0 Cc hőmérsékleten, majd 24 órán át szobahőmérsékleten keverjük az elegyet. Utána megint 0 C° hőmérsékletre hütjük az elegyet, kiszűrjük a kivált csapadékot és a szűrletről csökkentett nyomáson ledesztilláljuk az oldószert. n-Butanolban feloldjuk a maradékot, 1 normál nátrium-hidrogén-karbonát-oldattal, majd vízzel mossuk a butanolos oldatot, vízmentes magnézium-szulfáton megszárítjuk, és csökkentett nyomáson ledesztilláljuk az oldószert. Etanolból átkristályosítjuk a maradékot, ily módon 4,95 g-nyi (85%) mennyiségben nyerjük a kívánt terméket, op.: 175—178 C“, |>.]o = = —35,1° (c-0,5, dimetil-formamid). Analízis a C25H3jNj05S képlet alapján (487,6): számított : C 6l',58% ; H 6,82% ; N 8,62% : talált: C 61,78%; H6,78%: N 8,28%. C) N'-Tercier-butoxi-karbonil-L-tirozü-D-alanil-g!icil-L-feni!-alani!-S-(p-metoxi-benzil)-L-ciszteinil-amid 1,3 g (0,027 mól), a B> pontban leírt módon nyert termék 40 ml jégecet, 4 ml anizoi és 4 ml irictil-sziián elegyével készült oldatába 20 percen át vízmentes sósavgázt vezetünk. Utána dietil-étert adunk az elegy hez és kiszűrjük, majd megszárítjuk a kivált csapadékot (1,1 g). 10 ml dimetil-formamidban feloldjuk ezt a sósavas sót, 0 C" hőmérsékletre hűtjük az oldatot és hozzáadunk 0,34 ml (0,0026 mól) trietil-amint. 10 perc múlva az elegyhez hozzáadunk 1,06 g (0,0026 mól) N’-tercier-butoxi-karbonil-L-tirozil-D-alar.ii-giicint, majd 0,35 g (0,0026 mól) l-hidroxi-benzotriazolt és végül 0,536 g (0,0026 mól) N,N'-diciklohexil-karbodiimídet. 0 C hőmérsékleten keverjük az elegyet 2 órán át, majd 4 C' hőmérsékleten 72 órán át. Kiszűrjük a kivált csapadékot és a szűrletről ledesztilláljuk az oldószert. Etil-acetátban feloldjuk a maradékot és egymás után ! normál nátrium-hidrogén-karbonát-oidattai, vízzel, 0,75 normál citromsav-oldattal és végül megint vízzel mossuk az etil-acetátos oldatot. Vízmentes magnézium-szulfáton megszárítjuk az oldatot, majd csökkentett nyomáson ledesztilláljuk az oldószert. Etil-aceíátban feloldjuk a maradékot és Grade 62 jelzésű Grace—Davidson-féle szilikagélen végzett száraz oszlopkromatográfiáva! tisztítjuk. A vékonyrétegkromatográfiás vizsgálatok alapján a megfelelő frakcióról egyesítve ledesztilláljuk az oldószert, és kis mennyiségű etil-acetátból átkristályosítjuk a maradékot, ily módon 1,1 g-nyi (52%) mennyiségben nyerjük a kívánt terméket, [«]“= — 4,3° (c —0,5, dimetil-szulfoxid). Analízis a CjçHif.N^OÿS képlet alapján (773,9): számított; C 60,14%; H 6,47%; H 10,79%; talált: C 59,95%; H6,24%; N 10,53%. Az aminosav-analizís talált értékei; tirozin: 0,98; alanin: 1,03: glicht: 1,01: fenil-alanin: 0,98; NH3: 0,99. D) L-Tirozil-D-alanil-gíici!-L-fenii-alanil-S-(p-metoxí-benzil)-L-ciszieinil-amid-hidroklorid 20 ml jégecet és 0,5 ml anizoi elegyéhez 0,90 g (0,0012 mól), a Ci pontban leírt módon nyert iermékei adunk, majd fél órán át vízmentes sósavgázt vezetünk az elegybe. Utána fagyasztva szárítjuk az elegyes, ily módon 0,862 g-nyi (100%) mennyiségben nyerjük a kívánt terméket. [«]□ = + 2,6° (c - 0,5. 1 normál sósavoldat). Analízis a C34H43N607SC1 képlet alapján (715,2): számított: C 57,09%; H 6,06%; N 11,75%; Cl 4,96%; talált: C 56,85%: H6,06%; N 11,48%; Cl 5,21%. 9. példa L-TirozíI-D-alanii-glicil-L-fenil-alanil-N’-metil-L-metionil-amid-acetát A) N'-Tercíer-butoxi-karbonil-bF-metil-L-metionin-d( 1 )7.-metil-benzii-ammóniumsó 600 ml hideg dietil-éterben 86,13 g (0,2 mól) N’-tercier-butoxi-karbonil-L-metionin-diciklohexil-ammóniumsót szuszpendálunk. Négyszer 100—100 ml hideg. 1,5 normál citromsav-oldattal, majd vízzel kirázzuk a szuszpenziót, vízmentes magnézium-szulfáton megszárítjuk a dietil-éteres oldatot, majd csökkentett nyomáson ledesztilláljuk az oldószert. 150 ml tetrahidro-furánban feloldjuk a maradékot, és mechanikus keverés közben, fél óra alatt, 0 C hőmérsékleten 0,6 mól kálium-hidrid, 1,0 g 18-korona-6-éter és 1000 ml vízmentes tetrahidro-furán elegyéhez csepegtetjük a fenti letrahidro-furános oldatot. Utána az elegyhez csepegtetünk negyed óra alatt 25 ml (0,4 mól) metil-jodidot. 2 óra múlva hozzácsepegtetjük 20 ml ecetsav és 20 ml tetrahidro-furán elegyet, majd 40 ml etanolt. Fél óra utánkeverés után 2 liter jeges vízre öntjük az elegyet, és 2 normál káliurn-hidroxid-oldattal 7-re állítjuk be az elegy pH-ját. Háromszor 400—400 ml dietil-éterrel kírázzuk a vizes elegyet, majd szilárd citromsav adagolásával 3-ra állítjuk be a pH-ját. Háromszor 500 —500 ml dietil-éterrel kirázzuk, a dietil-éteres részeket egyesítve vízzel kirázzuk, vízmentes magnézium-szulfáton megszárítjuk, és csökkentett nyomáson ledesztilláljuk az oldószert. Ily módon 44,76 g (84%) szirupszerű anyagot nyerünk. 450 ml etil-acetátban feloldjuk ezt a szirupszerű anyagot, és hozzáadunk 25,78 ml (0,2 mól) d(-!-)a-metil-benzil-amint. Lehűtésre és dörzsölgetésre kikristályosodik a termék. Kiszűrjük, ily módon 51,05 g-nyi (66%) menynyiségben nyerjük a kívánt terméket, op.: 131—134 C', [z]d - — 18,9° (c = 1, etanol). Analízis a Cl9H,2N204S képlet alapján (384,54): számított: C 59,35%; H8,39%: N7,29%; talált: C 59,15%: H8,!2%: N 7,21%. B) N'-Tercier-butoxi-karbonil-N'-metil-L-metionil-amid 160 ml dimetil-formamidban feloldjuk az AJ pontban leírt módon nyert d( -)x-metil-benzil-ammónium-sóból savanyítás és dietil-éteres kirázás útján nyert 33,3 g (0,127 mól) NMercier-butoxi-karbonil-N^-metil-metionint, —15 C° hőmérsékletre hűtjük az oldatot és hozzáadunk 18,3 ml (0,14 mól) klór-szénsav-izobutil-észíert, majd 15,4 ml (0,14 mól) N-metil-morfolint. 10 percig — 15 C° hőmérsékleten keverjük az elegyet, majd egy órán át egy gázelosztócsövön keresztül vízmentes ammóniagázt vezetünk bele. További 4 órán át — 15 C: hőmérsékleten keverjük az elegyet, majd 300 ml 5 10 15 20 25 3C 35 40 45 50 55 6) 65 15
