180364. lajstromszámú szabadalom • Eljárás 9alfa,11béta-diklór-16alfa-metil-21-(diciklohexil-metoxi-karbonil oxi)-pregna-1,4-dién-3,20-dion előállítására
180.364 2 g 9&lfa, llbéta-diklór-16alfa~metil-21-hidroxi-pregna-1,4—dién-3»20-diont /amelyet; a 2 381 065 azámu közzétett francia pótszabadalmi bejelentésben ismertetett módon állítunk elő/ feloldunk 4 ml piridin és 8 ml dioxán keverékében. Az oldatot 0 °C éa + 5 °0 közötti hőmérsékletre hütjük le, majd hozzáadjuk 4 ml klórhangyasav-diciklohexll-metil-észter 12 ml dloxánnal készített oldatát. A hőmérsékletet 20-25 °C~ig hagyjuk emelkedni, majd az oldatot 5 órán át keverjük. Ezután jeges vízbe öntjük és kloroformmal extraháljuk. Az extraktumot 0,1 n kénaavval, majd vízzel mossuk, amlkorls 5,9 g nyers gyantaszerü terméket kapunk. Ezt szilikagélen ki ómatografáljuk. Előbb éter és 60-80 °C forráspontu petroléter ltl arányú elegyével, azután éter és petroléter 3:1 arányú elegyével eluálunk. Ekkor 3,288 g 0,16 Rf értékű gyantát kapunk, amelyet azután forró etanolban feloldunk. A kapott oldatot lehűtjük, amlkorls a termék kristályosán kiválik. A kristályos terméket d.különltjük az oldószertől, etanollal mossuk, és megszálltjuk. Ekkor 2,8 g óim szerinti terméket kapunk, amely 140 °G-on olvad. J?Q £ = + 133 1 2° /o s 1 % etanolban/. 2. példa Earmakológial vizsgálat A farmakológiai vizsgálatok kapósán a találmány szerinti vegyületet A vegyületnek, az összehasonlításhoz felhasznált 9alfa, 11b ét a-diklór-16alfa-me ti1-21-acet oxi-pregna-1,4-di én-3,20-diont B vegyületnek, a 9&lfa, llbéta-dlklór-16alfa-metil-21-pentanoiloxi-pregna-l,4-dién-3»20-diont C vegyületnek nevezzük. összehasonlító vegyületként használjuk még ezen felül a dexametazont• A/ Gyulladás gátló hatás vizsgálata orális beadással Ezt a kísérletet a klasszikus granulóma-teszt alkalmazásával végeztük. A kísérleteket a R. Meier és tsai /Expeiientia, 1950, 6, 469/ által Ismertetett módosítással végeztük. A kísérlethez Wlstar patkányokat használtunk, melyek átlagos súlya 100-110 g volt. A kísérleti állatok bőre alá a mellkasi részen két 10 mg-os gyapotpelletet helyeztünk Implantáció alakjában. Az orális kezelést rögtön az implantáció után elkezdtük éa két napig folytattuk. Az állatokat napi két dózissal kezeltük. Az utolsó gyógyszeradag bejuttatása után, vagyis a harmadik napon az állatokat levágtuk. A képződött granulóma-szövettel körülvett Delieteket lemértük frissen éa 60 °0-on 18 órán át való tárolás után. A granulóma súlyát úgy kaptuk meg, hogy a mérési eredményből kivontuk a gyapotpellet eredeti súlyát. Hasonló módon megmértük a csecsemőmirigy súlyát is, hogy kiértékeljük a vizsgálandó vegyületek timolitikus hatását. Az'eredményeket DA TM értékkel fejeztük ki*-Ez azt a dózist mutatja, amely a granulóma kifejlődését 50 %-ban gátolja, illetve amely a osecsemőmirigy 50 %—os^elkorcsosodását idézi elő. Eredményeinket az alábbi táblázatban foglaljuk össze. 3
