179990. lajstromszámú szabadalom • Eljárás polopeptidek előállítására
17 179990 18 roformmal és 5 tf% metanolt tartalmazó kloroformmal eluáljuk. Kitermelés: 0,91 g (34,4%). Op.: 139—140 C° (bomlás). RfA 0,67, RfB 0,72, RfC 0,58, RfD 0,62, RfH 0,34, RfK 0,95. 56. lépés [A=D-Tyr(me)] 3,17 g (9,64 millimól) Z-D-Tyr(Me)-OH, 1,92 g (10,6 millimól) H-Leu-OMe.HCl, 2,6 g (19,2 millimól) 1- -hidroxi-benzotriazol és 1,6 ml (11 millimól) trietilamin 30 ml dimetilformamiddal képezett oldatát 0 C°-ra hűtjük és 2,29 g (11,1 millimól) N,N'-diciklohexilkarbodiimidet adunk hozzá. A reakcióelegyet egy éjjelen át 4 C°-on keverjük, majd a szokásos módon feldolgozzuk. Forró ciklohexánból történő átkristályosítás után 1,41 g (95,2%) védett dipeptid-származékot kapunk. RfD 0,83, RfE 0,69, RfP 0,72, RfQ 0,76. 57. lépés [A=D-Tyr(Me)j A katalitikus reakciót 5 súly%-os palládium/szén katalizátor jelenlétében, 1,2 ekvivalens sósavat tartalmazó 8:1:1 arányú metanol/dimetilformamid/víz elegyben 3 órán át végezzük. 58. lépés [A=D-Tyr(Me)] 8,2 millimól Z-Tyr(Bzl)OCp, 8,2 millimól H-D-Tyr (Me)-Leu-OMe.HCl és 8,2 millimól trietilamin 60 ml dimetilformamiddal képezett oldatát egy éjjelen át szobahőmérsékleten keverjük és a reakcióelegyet a szokásos módon feldolgozzuk. A terméket éterrel szűrjük, éterrel mossuk és szárítjuk. Kitermelés: 81,2%. Op.: 191—192 C°. RfD 0,85, RfE 0,73, RfF 0,72, RfQ 0,78. 59. lépés [A=D-Tyr(Me)j 12,9 millimól hidrazinhidrátot 4,59 g (6,4 millimól) Z-Tyr(BZl)-D-Tyr(Me)-Leu-OMe, 25 ml dimetilformamid és 50 ml metanol oldatához adunk és a reakcióelegyet egy éjjelen át szobahőmérsékleten állni hagyjuk. A metanolt vákuumban eltávolítjuk, a terméket vízzel kicsapjuk, szűrjük, vízzel mossuk és szárítjuk. Op.: 212—213 C°. RfE 0,49, RfF 0,66, R{H 0,69, RfQ 0,70 60. és 61. lépés [A=D-Tyr(Me)j 3,54 g (5,0 millimól) az 59. lépésnél kapott hidrazidot 10 ml dimetilformamidban oldunk és az oldatot keverés közben —20 C°-ra hűtjük. Ezután előbb 3,38 ml 5,92 mólos dioxános sósavat (20 millimól), majd 0,6 ml (5,25 millimól) tercier butilnitritet adunk hozzá. 2 perc elteltével 2,04 g (5 millimól) H-Arg(N02)-Pro-Azgly-NH2.HC1 és 3,55 ml (25 millimól) trietilamin 10 ml dimetilformamiddal képezett előhűtött oldatát adjuk hozzá és a keverést egy éjjelen át 4 C°-on folytatjuk. A reakcióelegyet a szokásos módon dolgozzuk fel. A nyersterméket szilikagél-oszlopon történő kromatografálással tisztítjuk, az eluálást kloroformmal, 5 tf% metanolt tartalmazó kloroformmal és 10 tf% metanolt tartalmazó kloroformmal végezzük el. Kitermelés: 3,72 g (70,9%). R,A 0,64, RfB 0,72, RfC 0,55, RfD 0,66, RfF 0,40, RfH 0,52. 62. lépés [A =D-Ser(Bu*)j Az 56. lépés szerint járunk el. A terméket vizes metanolból kristályosítjuk. Kitermelés: 90,4%. Op.: 107— 108 C°. RfD 0,80, RfE 0,68, RfF 0,73, RfH 0,72, RfP 0,72, RfQ 0,74. 63. lépés [A =D-Ser(But)] A katalitikus redukciót 5 súly%-os palládium/szén katalizátor jelenlétében, 8 : 2 arányú dimetilformamid/ víz elegyben 5 órán át végezzük. 64. lépés [A=D-Ser(Bu1)] 19,17 g (32,7 millimól) Z-Tyr(Bzl)-OCp és 32,7 millimól H-D-Ser(Bul)-Leu-OMe 100 ml dimetilformamiddal képezett oldatát szobahőmérsékleten 72 órán át állni hagyjuk. A reakcióelegyet a szokásos módon dolgozzuk fel, majd a nyert szilárd anyagot szűrjük, éterrel mossuk és szárítjuk. Kitermelés: 17,6 g (79,4%). Op.: 135—137 C°. RfD 0,80, RfH 0,77, RfQ 0,81. 65. lépés [A^D-SerfBu4)] Az 59. lépés szerint járunk el. A terméket vizes metanolból átkristályosítjuk. Kitermelés: 56,2%. Op.: 134— 136 C°. RfD 0,66, RfH 0,64, RfQ 0,64. 66. és 67. lépés [A=D-Ser(But)j A 60. és 61. lépés szerint járunk el. A terméket szilikagél-oszlopon történő kromatografálással tisztítjuk, eluálószerként kloroformot és 5 tf% metanolt tartalmazó kloroformot alkalmazunk. Kitermelés: 38,5%. Op.: 142—145 C°. RfA 0,64, RfB 0,71, RfC 0,55, RfD 0,65, RfF 0,46, RfH 0,43, RfQ 0,16. 68. lépés [A=D-Tyr(me)] 5,13 g (24,9 millimól) diciklohexilkarbodiimidet keverés és 0 C°-ra való hűtés közben 22,6 millimól Z-DTyr(Me)-OH, 5,98 g (24,9 millimól) H-MeLeu-OMe. HBr, 3,5 ml (24,9 millimól) trietilamin és 6,12 g (45,2 millimól) 1-hidroxi-benzotriazol 50 ml dimetilformamiddal képezett oldatához adunk és a keverést egy éjjelen át 4 C°-on folytatjuk. A reakcióelegyet a szokásos módon dolgozzuk fel. A terméket szilikagéloszlopon történő kromatografálással és kloroformos eluálással tisztítjuk. Kitermelés: 55,2%, olaj. RfD0,83, RfE 0,78, RfH 0,79, RfP 0,80, RfQ 0,79. 69. lépés [A—D-Tyr(Me)] A katalitikus redukciót 5 súly%-os palládium/szén katalizátor jelenlétében, egy ekvivalens sósavat tartalmazó 8 : 2 térfogatarányú metanol-víz elegyben 6 órán át végezzük. 70. lépés [A=D-Tyr(Me)j Az 58. lépés szerint járunk el. A terméket szilikagéloszlopon történő kromatografálással tisztítjuk, eluálószerként étert alkalmazunk. 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 65 9
