179990. lajstromszámú szabadalom • Eljárás polopeptidek előállítására
13 179990 14 át kristályosítjuk. 8,98 g dipeptidet kapunk. Kitermelés: 62%. Op.: 150—165 C° (bomlás). 28. lépés 9,2 g (20 millimól) N-benziloxikarbonil-L-leucil)-Nw-nitro)-L-arginin, 4,2 g (20 millimól) L-prolil-azaglicin-amid-hidroklorid, 5,4 g (40 millimól) 1-hidroxi-benzotriazol és 3 ml (20 millimól) trietilamin 200 ml dimetilformamiddal képezett oldatát 0 C°-ra hűtjük és 8,2 g (40 millimól) diciklohexilkarbodiimidet adunk hozzá. A reakcióelegyet egy éjjelen át szobahőmérsékleten keverjük. A kiváló diciklohexilkarbodiimidet szűrjük és a szűrletet szárazra pároljuk. A maradékot metanol-éter elegyből átkristályosítjuk. 12,2 g (98,3%) tetrapeptidet kapunk. Op. : 88—90 C°. Md —30,2° (c=l,6, dimetilformamidban), RfD 0,57, RfF 0,40, RfH 0,26, RfK 0,63. 29. lépés A hidrogénezést 5 súly%-os szénre felvitt palládium/szén katalizátor jelenlétében 2 ekvivalens sósavat tartalmazó vizes etanolban végezzük el. 30. lépés 6,484 g (11,0 millimól) N-benziloxikarbonil-O-benzil-L-tirozin-2,4,5-triklórfenil-észtert és 1,396 g (10 millimól) D-alanin-metilészter-hidrokloridot 50 ml dimetilformamidban oldunk, az oldathoz 1,4 ml (10,0 millimól) trietilamint adunk és egy éjjelen át szobahőmérsékleten keverjük. A reakcióelegyet szokásos módon dolgozzuk fel és a maradékot forró etilacetátból kristályosítjuk. Kitermelés: 3,782 g (77,2%). A kapott védett dipeptidmetilészter 163 C°-on olvad. [«Pd8 —12,84° (c=l,l, dimetilformamidban). 31. lépés 3,435 g (7,0 millimól) N-benziloxikarbonil-O-benzil-L-tirozil-D-alanin-metilésztert 400 ml meleg metanolban oldunk és az oldatot 10 ml (120 millimól) 62 súly/tf.%-os hidrazinhidráttal kezeljük. A reakcióelegyet 25 C°-on egy éjjelen át állni hagyjuk. A kiváló hídrazidot leszűrjük, metanollal és éterrel mossuk és forrásban levő metanolból kétszer kristályosítjuk. Kitermelés: 3,068 g (89,2%). Op. : 217 C°. Md —20,44° (c = l,l, dimetilformamidban), RfA 0,73, RfB 0,75, RfC 0,67, RfD 0,70, RfE 0,50, RfF 0,54, RfH 0,67, RfK 0,85, RfQ 0,25. 32. és 33. lépés 1,18 g (2,4 millimól) N-benzíloxíkarbonil-O-benzil-L-tirozil-D-alanin-hidrazid —20 C°-ra hűtött oldatához keverés közben előbb 1,6 ml (9,6 millimól) 6,02 mólos dioxános sósavat, majd 0,29 ml (2,52 millimól) tercier butilnitritet adunk. 15 perc elteltével 1,03 g (2,0 millimól) L-leucil-L-arginil-L-prolil-azaglícín-amíd-dihidroklorid és 1,62 ml (11,6 millimól) trietilamin 15 ml dimetilformamiddal képezett, —20 C°-ra előrehűtött oldatát adjuk hozzá. A reakcióelegyet további 24 órán át 4 C°on keverjük. A trietilamin-hidrokloridot szűréssel eltávolítjuk és a szflrletet vákuumban szárazra pároljuk. A maradékot szilikagél-oszlopra visszük fel és azeluálást 5 tf.% metanolt tartalmazó kloroformmal, 10 tf.% metanolt tartalmazó kloroformmal és 11: 8 : 2 térfogatarányú kloroform/metanol/víz eleggyel végezzük el. A cél-vegyületet tartalmazó frakciókat egyesítjük, bepároljűk és a pepiidet szilikagél-oszlopon ismét kromatografáljuk, eluálószerként 3: 1 tf.-arányú acetonitril/víz elegyet alkalmazva. Kitermelés: 890 mg (46,4%. Md —45,7° (c = l,l, metanolban), RfA 0,54, RfB 0,69, RfC 0,41. 34. lépés All. lépés szerint járunk el. 35. lépés A 15. lépés szerint járunk el. Kitermelés: 43%. Md —41,4° (c=l,3, metanolban) RfA 0,80, RfC 0,47, RfD 0,65, RfK 0,95. 38. lépés A 3. lépés szerint járunk el. Kitermelés: 69%. Op.: 135 C°. RfA 0,49, RfB 0,65, RfC 0,46, RfD 0,64, RfF 0,35, RfH 0,19, RfK 0,86. 39. lépés A 4. lépés szerint járunk el. 40. lépés (A =D-Phe) 7,41 g (24,8 millimól) N-benziloxikarbonil-D-fenil-alanin és 3,62 g (25 millimól) L-leucin-metilészter 100 ml etilacetáttal képezett oldatát 0 C°-ra hűtjük és 5,15 g (25 millimól) diciklohexilkarbodiimidet adunk hozzá. A reakcióelegyet egy éjjelen át 4 C°-on keverjük, majd a szokásos módon feldolgozzuk. A maradékot etilacetát és petroléter (fp.: 60—80 C°) elegyéből átkristályosítjuk. 9,1 g dipeptidet kapunk (86%). Op.: 123—124 C°. M d —18,7° (c=2,1, metanolban), RrD 0,76, RfE 0,65, RfF 0,74, RfH 0,73. 41. lépés (A=D-Phe) A katalitikus redukciót 5 súly%-os szénre felvitt palládium katalizátor jelenlétében, egy ekvivalens sósavat tartalmazó etanolban 5 órán át végezzük. 42. lépés (A=D—Phe) 4,89 g (8,36 millimól) N-benziloxikarbonil-O-benzil-L-tirozin-2,4,5-triklórfenil-észter és 2,5 g (7,6 millimól) D-fenilalanil-L-leucin-metilészter-hidroklorid dimetilformamiddal képezett oldatához keverés közben 1,1 ml (7,6 millimól) trietilamint adunk és a keverést szobahőmérsékleten egy éjjelen át folytatjuk. A trietilamin-hidrokloridot leszűrjük és a szűrletet vákuumban szárazra pároljuk. A maradékot vizes metanolból átkristályosítva 3,6 g (69,7%) tripeptid-származékot kapunk. Op.: 183—184 C°. RfD 0,82, RfE 0,69, RfH 0,78, RfP 0,71, RfQ 0,82. 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 65 7
