179990. lajstromszámú szabadalom • Eljárás polopeptidek előállítására
3 179990 4 A „Tyr(Me)” jelölés a tirozin metiléterét jelenti, míg a „MeLeu” jelölés a nitrogénatomon hidrogénatom helyett metilcsoportot hordozó leucinrá vonatkozik. Az (I) általános képletű vegyületek előnyös képviselőiben A jelentése D-Tyr(Me), D-Ser(Bul) vagy D-Phe; B jelentése Leu vagy MeLeu; E jelentése Azgly és F jelentése aminocsoport. Az (1) általános képletű vegyületek három különösen előnyös képviselőjének képlete a következő : Glu-His-Trp-Ser-Tyr-D-Phe-Leu-Arg-Pro-Azgly-NH2 Glu-His-Trp-Ser-Tyr-D-Tyr(Me)-Leu-Arg-Pro-Azgly-NH2 Glu-His-Trp-Ser-Tyr-D-Ser(Bul)-Leu-Arg-Pro-Azgly-NH2 Az (I) általános képletű vegyületek humán- vagy állatgyógyászati szempontból alkalmas sói, pl. hidrokloridok, foszfátok, citrátok vagy acetátok lehetnek. Az (I) általános képletű vegyületeket kémiailag analóg vegyületek készítésére önmagukban ismert eljárásokkal állíthatjuk elő. A találmányunk tárgyát képező eljárást az jellemzi, hogy a) valamely megfelelő védett, egyébként az (I) általános képletnek megfelelő polipeptidből (ahol A, B, E és F a fenti jelentésű) egy vagy több szokásos pepiid-védőcsoportot eltávolítunk — előnyösen hidrogenolízissel vagy savas kezeléssel; vagy b) valamely Glu-OH, Glu-His-OH, Glu-Hís-Trp-OH, Glu-His-Trp-Ser-OH, Glu-His-Trp-Ser-Tyr-OH, Glu-His-Trp-Ser-Tyr-A-OH, Glu-His-Trp-Ser-Tyr-A-B-OH, Glu-His-Trp-Ser-Tyr-A-B-Arg-OH vagy Glu-His-Trp-Ser-Tyr-A-B-Arg-Pro-OH általános képletű vegyületet vagy megfelelő aktivált származékát valamely H-His-Trp-Ser-Tyr-A-B-Pro-E-F, H-Trp-Ser-Tyr-A-B-Arg-Pro-E-F, H-Ser-Tyr-A-B-Arg-Pro-E-F, H-Tyr-A-B-Arg-Pro-E-F, H-A-B-Arg-Pro-E-F, H-B-Arg-Pro-E-F, H-Arg-Pro-E-F, H-Pro-E-F vagy H-Azgly-NH2 általános képletű vegyülettel vagy megfelelő aktivált származékával reagáltatunk a peptid-kémiában használatos kapcsolási reakció szerint, majd kívánt esetben egy, az a) vagy b) eljárással előállított (I) általános képletű vegyületet a megfelelő savval történő reagáltatással humán- vagy állatgyógyászati szempontból alkalmas savaddíciós sóvá alakítunk. Az a) eljárásnál felhasznált kiindulási anyagok annyi védőcsoportot tartalmazhatnak ahány megvédésre szoruló csoport jelen van a molekulában (pl. néhány vagy az összes szabad —OH csoport vagy bázikus =NH csoport alakjában jelenlevő csoport), Az a) eljárás szerint felhasznált kiindulásianyagok, pl. az alábbi általános peptid-kémiai művekben felsorolt védőcsoportokat tartalmazhatják: M. BodanskyésM. A. Ondetti „Peptide Synthesis”, Interscience, New York, 1966, IV. fejezet; F. M. Finn és K. Hofmann, „The Proteins”, Vol. II., kiadó H. Neurath és R. L. Hill, Academie Press Inc., New York, 1976,106. oldal; „Amino-acids, Peptides and Proteins” (Specialist Periodical Reports), The Chemical Society, London, Vol. 1—8. A fenti művekben a védő-csoportok eltávolításának számos módszerét is ismertették. Az a) eljárás során kiindulási anyagként különösen előnyösen alkalmazhatunk =NH védőcsoportként benziloxikarbonil-csoportot és —OH védőcsoportként benzol-csoportot tartalmazó vegyületeket. Mindkét fenti védőcsoportot hidrogenolízissel — pl. szénre felvitt palládium katalizátor jelenlétében — könnyen eltávolíthatjuk. Az a) eljárás során előnyösen alkalmazhatunk továbbá =NH védő-csoportként tercier butoxikarbonil-csoportot, illetve —OH védőcsoportként tercier butil-csoportot tartalmazó kiindulási anyagokat. A fenti két védő-csoport eltávolítása valamely savval (pl. sósavval vagy trifluorecetsavval) történő kezeléssel könnyen elvégezhető. Az a) eljárásnál továbbá előnyösen alkalmazhatunk =NH védőcsoportként benziloxikarbonil- vagy tercier butoxikarbonil-csoportot, illetve —OH védőcsoportként tercier butil-csoportot tartalmazó kiindulási anyagokat. Ezen védőcsoportok hidrogénbromid-ecetsav elegygyel történő kezeléssel könnyen eltávolíthatók. Ab) eljárás a peptid-kémiában ismert bármely kapcsolásos reakcióval elvégezhető — lásd pl. Bodánszky és Ondetti V. fejezetében és a Specialist Periodical Reports of the Chemical Society 1—8. kötetében leírt reakciókat. A b) eljárást előnyösen azid-kapcsolásos, aktívészterkapcsolásos vagy N,N'-diciklohexiIkarbodimid és 1- -hidroxi-benzotriazol felhasználásával történő kapcsolásos módszerrel végezhetjük el. Előnyösen alkalmazhatjuk az azid-kapcsolásos módszert, különösen His-Trp vagy Ser-Tyr peptidkötés kialakítása esetén. A találmányunk tárgyát képező eljárásnál felhasznált kiindulási anyagok ismert vegyületekből a szakember által jólismert standard peptid-kapcsolási reakciókkal, standard peptid védőreakciókkal vagy standard peptidvédőcsoport eltávolítási módszerekkel állíthatók elő (lásd pl. 1—10. példa). A találmányunk szerinti eljárással előállítható új vegyületek — mint már említettük — luliberin agonista tulajdonságokkal rendelkeznek, azaz a luliberin hatásait utánozzák; a luliberin a hipothalamus által kiválasztott hormon, mely a hipofízis hormonra fejt ki hatást és azt luteinizáló hormon (LH) és tüszőt serkentő hormon (folliculus stimuláló hormon — FSH) leadására készteti. E két hipofízis hormon a szaporodási (reproduktív) folyamatok szabályozásában vesz részt; az FSH a petefészekre hatva elősegíti a tüszőérést, míg az LH az ovulációt idézi elő. Az (I) általános képletű vegyületek meglepő módon erősebben idézik elő az LH felszabadulását mint a luliberin és ezért állatok szaporodásának szabályozására és/vagy elősegítésére alkalmazhatók. Az (I) általános képletű vegyületek különösen hasznosnak bizonyultak nagy háziállatok nemzésénél az anösztrus alatt és bármely mesterséges nemzési szakaszban az ovulációs idő pontosabb szabályozása céljából. E vegyületek továbbá férfiaknál és nőknél a meddő állapotok megszüntetésére is alkalmazhatók. A találmányunk szerinti eljárással előállítható vegyületek luliberin agonista hatását pl. androgén sterilizált állandó ösztrusban levő patkányok ovulációjának előidézése vagy azon képességük igazolja, hogy éretlen hímpatkányok vérplazmájába vagy anösztrusos vagy diösztrusos anyajuhok vérplazmájába LH-t és FSH-t szabadítanak fel — e hatásokat kettős antitest-radioimmuno-teszttel mérjük. Az androgén sterilizált patkányokon a következőképpen hajtjuk végre a fenti tesztet. 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 65 2
