179788. lajstromszámú szabadalom • Eljárás új karbapeném-származékok előállítására
17 179788 18 ténő adszorpció és eluálás, mint például Dowex 1x2 (Dow Chemical Co.) vagy QAE-Sephadex A—25 (Pharmacia Fine Chemicals AB); gélszűrés Sephadex G—10-en (Pharmacia Fine Chemicals AB), Bio-Gel P—2-n (Bio-Rad Laboratories), Bio-Beads S—X3-on (Bio-Rad Laboratories) oszlop- vagy vékonyréteg-kromatográfia cellulózon, Avicel SF-n (American Viscose Corp.), DEAE-Cellulose-on, Whatman DE—32-n (Whatman Ltd.), DEAE—Sephadex A—25-on (Pharmacia Fine Chemicals AB), szilikagélen, alumíniumoxidon acetonnal történő kicsapás. A PS—7 antibiotikumnak a hozzá hasonló vegyületektől — melyeknek a kénatomhoz kapcsolódó oldallánca telített szénlánc, mint például a PS—5 és PS—6 antibiotikumok, és melyek együtt gyűlnek össze — történő elválasztása előnyösen az alábbi módszerrel hajtható végre. A telített szénlánccal rendelkező analóg vegyületeket általában anioncserélő gyanta-kromatográfiával választjuk el, melynek során az aktív komponens adszorbeálódik a polisztirol típusú anioncserélő gyantán, mint például Dowex 1 x 2 (Dow Chemicals Co.), Duolite A—101 (Chemical Process Co.), Amberlite 400 (Rohm and Haas Co.) vagy Diaion PA 306 (Mitsubishi Chemical Industries Ltd.) és az analóg vegyületeket valamely szervetlen só vizes oldatával eluáljuk, majd a PS—7 antibiotikumot poláros oldószerrel, mint például metanol vagy aceton, eluáljuk (koncentráció 1—80%, előnyösen 10—75%), mely 0,1—10%, előnyösen 1—5% szervetlen sót, mint például nátriumkloridot, káliumklorid vagy nátriumbromid, tartalmaz. A tenyésztési feltételektől függően a fermentációs talajban egyidejűleg keletkezhet az (V) képletű vegyület is, melyet PS—4 antibiotikumnak neveztünk. Amennyiben a PS—4 és PS—7 antibiotikumok egyidejűleg keletkeznek, ezek is elválaszthatók a fent leírt módszerek egyikével, azok kombinációinak alkalmazásával, vagy azok ismétlésével. Különösen előnyös az alábbi módszer alkalmazása. A PS—4 és PS—7 antibiotikumokat tartalmazó oldatot valamely adszorbens gyantán adszorbeáljuk, mint például Diaion HP—20AG (Mitsubishi Chemical Industries Ltd.) és az antibiotikumokat valamely 0—50%, előnyösen 0—10% gradiensű poláros oldószer, mint például aceton vizes oldatával eluáljuk. A PS—6 és/vagy PS—7 antibiotikumnak az izolálás közbeni viselkedését megállapíthatjuk, ha elvégezzük ezeknek az antibiotikumoknak biovizsgálatát és bioautográfiáját. így a fentiek alapján kinyerhetjük a megadott tulajdonságokkal rendelkező PS—6 és/vagy PS—7 antibiotikumot. Mivel a PS—6 és PS—7 antibiotikumok bizonyos mértékig labilisak, így az izolálást nagy gonddal kell elvégezni. Mivel a PS—6 és PS—7 antibiotikumok sóik alakjában sokkal stabilabbak, mint a szabad savak formájában, ezért gyógyászati alkalmazás céljára, valamint abban az esetben, ha ezeket az antibiotikumokat további szintézis céljára használjuk fel, vagy ha a fenti tisztítási folyamatokat akarjuk elvégezni, akkor előnyösen a sókat alkalmazzuk. Ezek a sók lehetnek például alkálifém-sók, mint nátrium-, kálium- vagy lítium-só; alkáliföldfém-sók, mint kalcium- vagy magnézium-sók; egyéb fém-sók, mint alumínium-só; ammóniurrt-sók; primer, szekunder vagy tercier aminokkal képzett sók, mint monoetilaminnal, dietilaminnal, trietilaminnal, monoetanolaminnal vagy dietanolaminnal képzett sók; valamint szerves bázisokkal, mint benzatinnal vagy prokainnal képzett sók. A sók közül a gyógyászati szempontból megfelelő sók alkalmasak. Különösen alkalmasak az alkálifém-sók, mint a nátrium- és kálium-sók. Mint már említettük a találmány szerinti PS—6 és PS—7 antibiotikumok egybázisú savak, melyek egy karboxil-csoporttal rendelkeznek. Alkoholokkal, merkaptánokkal vagy ezek származékaival az ismert antibiotikumokhoz, mint klavulánsav vagy tienamycin, hasonlóan előállíthatok a különböző észterek. A találmány magában foglalja ezeknek az észtereknek az előállítását is. Ezeket az észtereket a (II) általános képlettel jellemezhetjük — ahol a képletben R31 jelentése kisszénatomszámú alkil-csoport vagy trifenilmetil-csoport és R, és R2 jelentése a fenti—. A kisszénatomszámú alkil-csoport lehet egyenes vagy elágazó szénláncú, különösen 6 vagy annál kisebb szénatomszámú, de leginkább 1—4 szénatomszámú. Ezek példáiként a következőket soroljuk fel: metil-, etil-, n-propil-, i-propil-, n-butil-, i-butil-, n-pentil-, i-pentil- és n-hexil-csoport. A (II) általános képletű észtereket — ahol R,, R2 és R3 jelentése a fenti — az (I) általános képletű vegyületekből — ahol Rj, R2 és R3 jelentése a fenti — (azaz a PS—6 vagy PS—7 antibiotikumból) vagy ezeknek sójából állíthatjuk elő a (III) általános képletű vegyülettel, ahol a képletben R31 jelentése a fenti és Y jelentése valamely lehasítható atom vagy csoport. A (II) általános képletű észtereket — ahol R,, R2 és R3 jelentése a fenti — előállíthatjuk az (I) általános képletű vegyületekből — ahol R], R2 és R3 jelentése a fenti — vagy ezek sóiból valamely kisszénatomszámú diazoalkánnal is. A (III) általános képletű vegyületben Y jelentésében a lehasadásra képes atom vagy csoport, bármely olyan atom vagy csoport lehet, mely lehasad, ha a PS—6 vagy PS—7 antibiotikumokat a (III) általános képletű vegyületekkel reagáltatjuk, mint például klór-, bróm-, jódatom, hidroxil-, tiol-, szulfoniloxi-, —COH-csoport, reakcióképes karboniloxi-csoport, mint —O—CO— —CF3-csoport. Különösen előnyösek a halogénatomok. A (III) általános képletű vegyületek példáiként a következőket soroljuk fel: Metilalkohol, metiljodid, dimetilszulfonát, metilmerkaptán, etanol, etilbromid, etiljodid, etilmerkaptán, n-propilklorid, n-propiljodid, propilalkohol, i-propilalkohol, i-propilbromíd, i-propiljodid, n-butilalkohol, n-butilbromid, n-butiljodid, n-pentilalkohol, n-pentilklorid, n-pentilbromid, n-pentiljodid, n-hexilalkohol, n-hexilbromid, n-hexiljodid, tritilalkohol, tritilmerkaptán, tritilklorid és tritilbromid. A kisszénatomszámú diazoalkánok példájaként a diazometánt említjük meg. A PS—6 vagy PS—7 antibiotikumoknak a (III) általános képletű vegyülettel — ahol R31 és Y jelentése a fenti — vagy a kisszénatomszámú diazoalkánnal végbemenő reakcióját az észterezés valamely ismert módszerével hajthatjuk végre. A reakciót lefolytathatjuk külön reakcióközeg alkalmazása nélkül is, bár általában inert folyadékban hajtjuk végre. Az inert folyadék lehet szénhidrogén, mint benzol, toluol, n-hexán vagy ciklohexán, 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 65 9
