179788. lajstromszámú szabadalom • Eljárás új karbapeném-származékok előállítására
3 179788 4 hatású és ß-laktamäz gátló hatással rendelkező PS—6 és PS—7 antibiotikumok előállítása. A találmány második célja a PS—6 és PS—7 antibiotikumok észtereinek, elsősorban tritil-származékainak előállítása, melyek szintén erős antibiotikus hatásúak és rendelkeznek ß-laktamäz gátló hatással. A találmány célja, továbbá, hogy megmutassuk a PS—6 és PS—7, valamint ezek tritil-származékainak azon képességét, hogy szinergetikusan növelni képesek a penicillinek és cefalosporinok ß-laktamäz termelő rezisztens baktériumokkal szembeni antibiotikus aktivitását. A találmány célja a PS—6 és PS—7 antibiotikumok fermentációs eljárással történő előállítása is. A találmány célja ezen kívül eljárás kidolgozása a PS—6 és PS—7 antibiotikumok származékainak, különösen észter-származékainak, mindenekelőtt tritil-származékainak előállítására. A találmány célja a fentieken túlmenően, hogy preventív és terápiás eljárásokat dolgozzunk ki, valamint a PS—6 és PS—7 antibiotikumokból, illetve ezek trítilésztereiből kompozíciókat állítsunk elő azzal a céllal, hogy ezeket a kompozíciókat, illetve eljárásokat a Gram-pozitív és Gram-negatív baktériumok által okozott fertőző betegségek leküzdésére alkalmazzuk. A kompozíciók magukban foglalják a penicillineket, cefalosporinokkal és egyéb [i-laktamáz-érzékeny antibiotikumokkal készített szinergetikus kombinációkat is. A találmány szerinti eljárással előállított PS—6 és PS —7 antibiotikumoknak és ezek származékainak fizikai-kémiai jellemzőit, [i-laktamázzal szembeni viselkedésüket, biológiai hatásukat, valamint más antibiotikumokkal együtt kifejtett szinergetikus hatásukat az alábbiakban részletezzük. I. A PS—6 antibiotikum fizikai-kémiai tulajdonságai 1. Papírkromatográfia A PS—6 antibiotikum (nátrium-só) Toyo Filter Paper No. 50 (Toyo Roshi Kaisha Ltd.) papíron végzett leszálló papírkromatográfiás vizsgálat során a következő Rf értékeket mutatja az alább felsorolt oldószerek esetén: acetonitril(trisz)EDTA (1. számú megjegyzés: Rf= =0,41, etanol/víz [7/3]: Rr=0,65. [1. számú megjegyzés: az oldószerelegy 120 ml acetonitrilből, 30 ml 1/10 M trisz-(hidroximetil)-aminometán-hidroklorid pufferból (pH=7,5) és 1 ml 1/10 M vizes etiléndiamintetraecetsav-nátrium-só oldatból (pH =4,5) áll.] Amennyiben másként nem adjuk meg az oldószerek egymáshoz viszonyított arányait térfogatarányban fejezzük ki. 2. Vékonyrétegkromatográfia (TLC) A PS—6 antibiotikum (nátrium-só) Chromatogram Sheet 13254 Cellulose (No. 6065) (Trademark of Eastman Kodak Co., Ltd.) alkalmazásával végzett vékonyréteg-kromatográfiás vizsgálat során a következő Rf értékeket mutatja az alább felsorolt oldószerek esetén : n-butanol/etanol/víz [4/1/5] (fedőréteg): Rf=0,67 n-propanol/víz [8/2]: Rf=0,69 n-butanol/i-propanol/víz [7/7/6] : Rf=0,70 acetonitril/víz [8/2]: Rf=0,63 3. Nagyfeszültségű papír elektroforézis A PS—6 antibiotikum (nátrium-só) viselkedését a következő összetételű pufferban vizsgáljuk: 3000 ml víz, 3,3 g dietilbarbitursav és 25,5 g nátriumdietilbarbiturát, a puffer 8,6 pH értékű. A vizsgálatot Toyo Filter Paper No. 50 (Toyo Roshi Kaisha Ltd.) alkalmazásával nagyfeszültségű papír elektroforézis berendezésben (Savant Instrument Inc., High Voltage Power Supply HV3000 A, Flat Place Electrophoresis Chamber FP 18A) végezzük. Az antibiotikum 30 percen keresztül ható 42 V/cm feszültséggradiensű áram hatására legalább 5 mm, általában 10—40 mm távolságra migrál az anód irányába. 4. p-laktamázzal szembeni viselkedés A hatást a Bacillus cereus-ból származó ß-laktamäzzal dezaktiváljuk. 5. Savas, semleges vagy bázisos jelleg A PS—6 antibiotikum egybázisú sav, a molekulában egy karboxil-csoport van. 6. Ultraibolya (UV) abszorpciós spektrum A PS—6 antibiotikum (nátrium-só) jellemző ultraibolya abszorpciós maximuma a következő: *££=300 nm. 7. Infravörös (IR) abszorpciós spektrum A PS—6 antibiotikum (nátrium-só) jellemző infravörös abszorpciós maximuma káliumbromid tabletta alkalmazásával történő mérés alapján a következő: 1760 cm-1 (a ß-Iaktäm gyűrű —CO— csoportja), 1660 cm“1 (amid —CO— csoportja), 1600 cm“1 (—COO“-csoportja). 8. Proton magmágneses rezonancia (Proton NMR) spektrum A PS—6 antibiotikum (nátrium-só) a következő jellemzőket mutatja a 100 MHz-es proton magmágnescs rezonancia spektrumon, melyet nehéz vízben (D20) mérünk: (i) két dublett 0,94 és 0,98 ppm-nél, melyek kapcsolódási állandói 7,0 Hz-nél vannak. (ii) éles szingulett 1,92 ppm-nél (CHj—CO—) (ifi) multiplen 2,40—3,50 ppm-nél (—CH2—CH—) (iv) multiplen 3,90—4,20 ppm-nél ' N \ I {—<CH-j 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60
