179677. lajstromszámú szabadalom • Eljárás 1-N-(omega-amino-alfa-hidroxi-alkanoil)-kanamicin-származékok előállítására
29 17)677 30 50^-on szárazra pároljuk. A maradékot feloldjuk 100 ml vizes metanolban (1 : 1) és 1 óráig keverjük. Ezután vákuumban szárazra pároljuk és 50 ml vízben oldjuk. A vizes oldatot 3 x 50 mi MTBK-val extraháljuk és nátrium-szulfát felett megszárítva a kivonatot bepároíjuk. Az olajos maradék oldószer nyomainak eltávolítása céljából 4 ml vizet adunk hozzá és ledesztilláljuk. Álláskor az olaj viaszos, kristályos szilárd anyaggá alakul át (2,5 g, 28/0 kitermelés). Az N-trifluor-acetil-AHBA-t (2,4 g, 11,3 millimól) feloldjuk 50 ml vízmentes acetonban és az oldathoz N-hidroxi-szukcinimidet adunk (1,30 g, 11,31 millimól). Lassan 20 ml vízmentes acetonnal készült diciklohexil-karbodiimid (2,33 g) oldatot adunk hozzá. A reakciókeveréket 2 óráig 23”-on keverjük, a kivált diciklohexil-karbamidot szűréssel eltávolítjuk és kevés acetonnal mossuk. Az egyesített szűrletet és mosóoldatokat (N-trifluor-acetil-AHBA-N-hidroxi-szukcinimid-észter oldatot) a következő műveletekben izolálás nélkül használjuk. B) Acilezés A 26. példa szerint előállított poli(trimetil-szilil)-kanamicin A (11,31 millimól) 54 ml acetonnal készült oldatához 2,0 ml (113,4 millimól) vizet adunk és a keveréket vákuumban 0—5°-on 30 percig keverjük. A fenti A) pont szerint előállított N-trifluor-acetil-AHBA-N-hjdroxi-szukcinimid-észtert (11,31 millimól) hozzáadjuk a reakciókeverékhez és 1 óráig 5°-on tartjuk. 20%-os kénsavoldatta! a pH-t körülbelül 2,0-ra állítjuk be, a keveréket 30 percig keverjük és a pH-t ammónium-hidroxid-oldattal körülbelül 6-ig emeljük. A keveréket rotációs bepárlón szárazra párolva 14,4 g ragadós, szürkésfehér szilárd anyagot kapunk. Az utóbbit 100 ml vízben oldjuk, a pH-t lOn ammónium-hidroxidoldatta! 5,5-ről 11,0-ig emeljük és az oldatot olajfürdőn 70°-on 1 óráig melegítjük. A pH-t (9,5) sósavoldattal 7,0-ra csökkentjük, az oldatot leszűrjük a kevés oldatlan anyag eltávolítása céljából és a szűrőt vízzel mossuk. Az egyesített szűrletet és mosóoldatokat (188 ml) CG—50 (NH^ ) oszlopra (8x90 cm) visszük fel, 2 liter vízzel mossuk és ammónium-hidroxid-gradiensse! (0,6n— l,0n — tömény) eluáljuk. 28,9% amikacint, 5,0% BB—K6-ot, 5,7% BB—K29-et, 43,8% kanamicin A-t, 3,25% poliacilvegyületet és az oszlop utolsó frakciójából 14,3% nem azonosított vegyületet kapunk. 28. példa Amikacin előállítása poli(trimetil-szilil)-kanamicin A-ból terc-butil-oxi-karbonil-csoportta! blokkolt AHBA N-hidroxi-szukcinimid-észterével . acílezve A) terc-BOC-AHBA előállítása és N-hidroxi-szukcinimid-észterré való átalakítása 100 ml vízben és 20 ml acetonban AHBA-t (5,0 g, 42 millimól) oldunk és lOn NaOH-oldatta! a pH-t 10-re állítjuk be. 3—4 perc alatt hozzáadunk 11,6 g (53 miilimól) di-terc-butil-dikarbonátot és az oldatot 35 percig keverjük, miközben lOn NaOH-o!dat időnkénti hozzáadásával 10 pH-értéket tartunk fenn. Az acetont vákuumban lepároljuk és a vizes oldat pH-ját 3tíjHCloldattai 2-re csökkentjük és 3 x 30 ml MIBK-vál 'ejüraháljuk. Az egyesített iVílBK-kivonatokat nátrium-szulfát felett szárítjuk. Bepárolva áttetsző maradékot kapunk (8,2 g, 89%). • -A terc-BOC-AHBA-t (4,25 g, 19,4 millimól) 50 ml acetonban oldjuk és N-hidroxi-szukcinimidet (2í23 g, 19.4 millimól) adunk hozzá. A keverékhez, lassât) 20 ml acetonban oldott diciklohexil-karbodiimidet (4,0 g, 19.4 millimól) adunk és 2 óráig 23°-on keverjük.-;A kivált diciklohexil-karbodiimidet szűréssel eltávolítjuk és kevés acetonnal mossuk. Az egyesített szűrletet és.mosófolyadékokat (terc-BOC-AHBA-N-hidroxi-szükcinimid-észter oldat) a következő műveletbert izolálás ..nélkül dolgozzuk fel. : f / -B) Acilezés A 26. példa szerint előállított ,poli(trimetii-szilil)-kanamicin A (41,28 millimól) 94 ml acetonnal készült oldatához 3,5 ml (194 millimól) vizet adunk és a keveréket vákuumban, 0—5°-on 30 percig keverjük. A fenti A) pontban előállított terc-BOC-.AHBA-N-hidroxi-szukcinimid-észtert (19,4 millimól) a fenti keverékhez adjuk és 5°-on 1 óráig állni hagyjuk. Vizet (200 ml) adunk hozzá és a pH-t (7,0) 20%-os kénsavoidattal.2-re csökkentjük. 30 perc keverés után ammónijim-hidroxidoldattal a pH-t körülbelül 6-ig emeljük és.a keveréket vákuumban szárazra párolva 36,3 g- aranyszínű olajat kapunk. Az olajat 200 ml trifluor-ecctsavban oldjuk, 15 percig állni hagyjuk és forgó bepárlón szárazra pároljuk. Az olajat vízzel mossuk és a vizet elgőzölögtetjük. Tömény ammónium-hidroxidot adunk hozzá és elgőzöl ögtetjük. A kapott szilárd anyagot vízben oldjuk, szűrjük és a szűrőt vízzel mossuk. Az egyesített szűrletet és mosóoldatokat (259 ml) CG—50 (NH\ ) oszlopra (8 x92 cm) visszük fel, 4 liter vízzel mossuk és ammónium-hidroxid-gradienssel (0,6n—l,0n —tömény)eluáljuk. 40,32% amikacint, 4,58% BB—K6-ot, 8,32% BB—K29-et, 30,50% kanamicin A-t és 7,43% poliacilvegyületet kapunk. 29. példa BB—K8 előállítása poli(trimetilszilil)-3,6'-di-N-karbobenziloxi-kanamicin A vízmentes dietilketonban végzett acilezésével - • A) 3,ó'-di-N-karbobenziloxi-kanamicin A 7,26 g (15 mmól) kanamicin A szabad bázis és 18,6 g (75 mmól) nikkelacetát-tetrahidrát 300 ml dimetil-szulfoxiddal készített szuszpenzióját 100 °C hőmérsékleten 30 percig melegítjük keverés közben, mialatt átlátszó zöld oldat keletkezik. Lehűtés után ehhez 11,8 g (37,6 mmól) N-karbonbenziloxi-5-norbornén-2,3-dikarboximid 50 ml dimetil-szulfoxidos oldatát adjuk hozzá. Az elegyet szobahőmérsékleten egy éjszakán át keverjük, 100 mi tömény, vizes ammónia-oldattal és 1 liter vízzel kezeljük, szobahőmérsékleten 1 órán át folytatjuk a keverést, majd az elegyet 300 ml-es Diaion HP—10 oszlopra visszük fel. Az oszlopot szakaszosan eluáljuk, először 7n ammónium-hidroxid-oldattal, utána metanol—vízeleggyel (1 : 1), majd metanol—víz (10 : 1) 5 :o 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 65 15
