179677. lajstromszámú szabadalom • Eljárás 1-N-(omega-amino-alfa-hidroxi-alkanoil)-kanamicin-származékok előállítására
27 179677 28 anyagot vízzel mossuk. Az egyesített szűrlet és mosófolyadékok (150 ml) E. cotival szemben való mikrobiológiai meghatározása 1225 mcg/ml (31,5% kitermelés) amikacint mutat ki. 23. példa Amikacin előállítása poli(trimetil-szilii)-kanamicin A-t dikarbibenzil-oxi-AHBA-N-hidroxi-szukcinimidészterrel acilezve A) Dikarbobenzil-oxi-L-( —)-a-amino-a-hidroxi-vajsav-N-hidroxi-szukcinimid-észter előállítása DikarbobenziI-oxi-L-(—)-a-amino-a-hidroxi-vajsavat (8,0 g, 20,65 millimól) és N-hidroxi-szukcinimidet (2,37 g, 20,65 millimól) 23°-on feloldunk 50 ml vízmentes acetonban. 20 ml vízmentes acetonban oldott diciklohexil-karbodiimidet (4,25 g, 20,65 millimól) adunk hozzá és a keveréket 23°-on 2 óráig rázatjuk. A diciklohexil-karbamidot leszűrjük, a szűrőpogácsát 10 ml vízmentes acetonnal mossuk és a szűrletet és a mosófolyadékokat egyesítjük. B) Acilezés ~A 21. példa általános módszerével 10,0 g (20,639 millimól) kanamicin A-ból előállított poli(trimetil-szilil)-kanamicin A-t feloldjuk 100 ml vízmentes acetonban. Az oldatot lehűtjük 0—5°-ra, hozzáadunk 3,7 ml ionmentesített vizet, és az oldatot mérsékelt vákuumban 0—5°-on 30 percig keverjük. A fenti oldathoz hozzáadjuk az A) pont szerint előállított di-Cbz-blokkolt acilezőszert és a keveréket 0— 5°-on 30 percig keverjük, majd vízzel hígítjuk, a pH-t beállítjuk 2,2-re és az acetont vákuumban lepároljuk. A vizes oldatot a 22. példa általános módszere szerint redukáljuk és „Dicalite"-on átszűrjük. Kromatográfiával 40—45% amikacint, körülbelül 10% BB—K29-et, nyomokban BB—K6-ot, körülbelül 30% kanamicin A-t és kevés poliacilvegyületet mutatunk ki. 24. példa Poli(trimetil-sziIil)-kanamicin A előállítása HIVTDS-sel, imidazol-katalizátor jelenlétében Kanamicin A-t (11 g, 22,7 millimól) és 100 mg imidazolt molekulaszitával szárított 100 ml acetonitrilben, nitrogéngáz-átáramoltatás közben visszafogásig melegítünk. HMDS-t (18,48 g, 114,5 millimól, 5 mól per mól kanamicin A) adunk hozzá 30 perc alatt és a keveréket 20 óráig visszafolyatás közben forraljuk. 2 1/2 óra alatt teljes oldódás következik be. Az oldatot lehűtjük 23°-ra és az oldószert vákuumban lepárolva 21,6 g poli(trimetil-szilil)-kanamicin A-t kapunk habos maradék formájában [93,1% kitermelés, kanamicin (szilil)H-ként számítva]. 25. példa l-N-[L-(—)-y-amino-x-hidroxi-butiril]-kanamicin B (BB—K26) előállítása poli(trimetil-szilil)-kanamicin B SAE-val történő acilezéséve! A) Poli(trimetil-szili!)-kanamicin B előállítása HMDS-sel, TMCS-katalizátor jelenlétében Kanamicin B-t (25,0 g, 51,7 millimól) molekulaszitával szárított 250 ml acetonitrilben, nitrogénatmoszférában visszafogásig melegítünk. 30 perc alatt HIVfDS-t (62,3 g, 385,81 millimól, 7,5 mól per mól kanamicin B), majd 1 ml TMCS-katalizátort adunk hozzá. A keveréket visszafolyatás közben 21 óráig forraljuk; 1 óra alatt az anyagok teljesen feloldódnak. Az oldószert vákuumban 60°-on lepároljuk és az olajos maradékot 60°-on nagyvákuumban tartjuk 3 óráig. 53,0 g poli(trimetil-szilil)-kanamicin B-t kapunk [85,2% kitermelés, kanamicin B (szilil)l0-ként számítva], B) Acilezés A fenti A) pontban előállított poli(trimetil-szilil)-kanamicin B-t 0—5°-on 500 ml vízmentes acetonban oldjuk, metanolt (20,9 ml) adunk hozzá és a keveréket vákuumban 30 percig 0—5°-on keverjük. 200 ml előre lehűtött vízmentes acetonnal készült SAE-oIdatot (18,1 g, 51,67 millimól) adunk hozzá 1 percen belül és a keveréket 30 percig 0—5°-on keverjük. A keveréket a 22. példa általános módszerével feldolgozzuk és CG—50 (NH4 ) oszlopra(8 x 120 cm) visszük fel. 0,6—3nammónium-hidroxid-gradienssel eluáljuk. 38% BB—K26-ot, 5% megfelelő 6'-N-acilezett kanamicin B-t (BB—K22), 10% megfelelő 3-N-acilezett kanamicin B-t (BB—K46), 14,63% kanamicin B-t és kevés poliacilezett kanamicin B-t kapunk. 26. példa Po!i(trimetil-szilil)-kanamicin A előállítása HMDS-sel, kanamicin A-szulfát katalizátor jelenlétében Kanamicin A-t (19,5 g, 40,246 millimól) és kanamicin A-szulfátot (0,5 g, 0,858 millimól) (összmennyiség= = 20,0 g, 41,0 millimól) molekulaszitával szárított 200 ml acetonitrilben visszafolyásig melegítünk. Lassan HMDS-t (60,3 ml, 287,7 millimól, 7 mól per mól kanamicin A) adunk hozzá és a keveréket 28 óráig visszafolyatás közben forraljuk. Ezután forgó bepárlón szárazra pároljuk és gőzinjektor-vákuumban szárítjuk. 47,5 g poli(trimeti!-szilil)-kanamicin A-t kapunk halványsárga olaj alakjában [95,82% kitermelés, kanamicin A (szilil)10-ként számítva]. 27. példa Amikacin előállítása poli(trimetil-szilil)-kanamicin A acilezésével N-trifluor-acetil-blokkolt AHBA N-hidroxi-szukcinimid-észterét használva A) N-trifluor-acetil-AHBA előállítása és N-hidroxi-szukcinimid-észterré való átalakítása AHBA (5,0 g, 42 millimól) és 100 ml tetrahidrofurán szuszpenziójához keverés közben, 10 perc alatt trifluor-ecetsavanhidridet (40,0 g, 191 millimól) adunk. Az oldatot 18 óráig 23=-on keverjük, majd vákuumban 5 10 15 :;o 25 30 35 40 45 10 55 50 55 14
