179665. lajstromszámú szabadalom • Eljárás új ACTH-fragmensek és az azokat tartalmazó gyógyászati készítmények előállítására

179665 3

pszichofarmakológiai hatást, bár látens formában.

A 3 856 770 számú amerikai egyesült államokbeli szabadalmi leírásban leírtak alapján szakemberek felismerték, hogy az L-Phe-D-Lys-L-Phe képletű peptid láncának az N-terminális végén történő meghosszabbításával igen hatásos peptidet kapunk. Meghosszabbíthatjuk például az L-Met( —0)-L-Glu-L-His képletű peptid fragmentummal : L-Met( — 0)-L-Glu-L-His-L-Phe-D-Lys-L-Phe.

Meglepő módon azt találtuk, hogy igen hatásos pép- 10 tidet sikerül előállítani, ha az L-Phe-D-Lys-L-Phe képletű peptidet C-terminális végén hosszabbítjuk meg. Ezt a kifejezett hatáserősödést (legalább ezerszeres) a C-terminális láncvégen történő meghosszabbítás hatására nem lehetett előre látni. Sőt kimutatták, hogy az eredeti 4—10 vagy 4—9 ACTH C-terminális láncmeghosszabbítása nem mutatott semmilyen hatásnövekedést — lásd például European Journal of Pharmacology 2, 14 (1967), és kiderült, hogy a 7—9 ACTH peptid C-terminális láncmeghosszabbítása legfeljebb tízszeresére növelte a hatást. Ezt a meglepő hatást az alábbi táblázatban megadott példában illusztrálhatjuk:

1. táblázat

Peptid

A4—10 ACTH-hoz viszonyított hatásarány

1. H-Met-Glu-His-Phe-Arg-Trp—OH

(4—9 ACTH)

í

2. H-Phe-Arg-Trp—OH (7—9 ACTH)

0,1

3. H-Phe-Arg-Trp-Gly-Lys-Pro-Val-Gly-Lys-Lys—OH (7—16 ACTH)

i

4. H-Phe-D-Lys-Phe—OH

0,1

5. H-Phe-D-Lys-Phe-Gly-Lys-Pro-Val-Gly-Lys-Lys—OH

100

Azt is kimutattuk, hogy a fenti L-Phe-D-Lys-L-Phe képletű peptid C-terminális végén levő láncmeghosszabbítás nagyjelentőségűnek mutatkozik abban az értelemben, hogy egy minimális C-terminális lánchosszúság 40 szükséges. Meglepően ez a minimális láncmeghosszabbítás a 10—16 ACTH peptid rövidebb lánc esetében a hatás a változatlan 7—16 ACTH-nál látható szintre csökken le.

Azt találtuk még meglepően, hogy egy még intenzívebb hatáserősödést érünk el, ha a minimális 10—16 ACTH esszenciális C-terminális lánchosszabbításnál a 11-es helyzetben levő L-Lys aminosavat D-Lys aminosavval helyettesítjük. Ez a módosítás a peptid aktivitását még 100-szorosára növeli. Ezeket a tényeket világosan mutatja a II. táblázatban található következő példa:

II. táblázat

Peptid

A4—10

ACTH-hoz

viszonyított

hatásarány

1. H-Phe-Arg-Trp-Gly-Lys-Pro-Val-Gly-Lys-Lys—OH (7—16 ACTH)

í

2. H-Phe-D-Lys-Phe-Gly-Lys-Pro-Val-GIy-Lys-Lys—OH

100

3. H-Phe-D-Lys-Phe-Gly-Lys-Pro-Val-Gly-Lys OH

í

4. H-Phe-D-Lys-Phe-Gly-D-Lys-Pro-Val-Gly-Lys-Lys—OH

10 000

4

Az L-Phe-D-Lys-L-Phe képletű peptid hatását lényegesen növelhetjük, ha a C-terminális láncot meghoszszabbítjuk, de még tovább is növelhetjük a hatást, ha a 3 853 836 számú a 3 856 770 számú és a 3 842 064 szá- 5 mú amerikai egyesült államokbeli szabadalmi leírásokban leírt módon N-terminális iáncmeghosszabbításokat is végzünk. A kapott peptidek olyan pszichofarmakológiai hatást mutatnak, amely 106—107-szer olyan erős, mint a természetes 4—10 ACTH peptidé.

Azt találtuk továbbá, hogy az eredeti L-Phe-D-Lys-L-Phe peptidben levő első Phe aminosavnak nem kell szükségképpen jelen lennie, hanem számos más aminosavval lehet helyettesítve, úgy, hogy ennek az aminosavnak az előnyei nyilván elsősorban a meghosszabbított, 15 helyes hosszúságú láncból erednek.

A találmány tárgya tehát eljárás új és stabil A-L-B-D-Lys-L-Phe-Gly-(L vagy D)-Lys-L-Pro-L-Val-Gly-L-Lys-L-Lys-X

T általános képletű peptidek — ahol 20 A jelentése hidrogénatom,

H-Met-Ala-Ala, H-Met-Glu-His,

H-Ala-Ala-Ala, H-Val-Ala-Ala,

H-Met-Gly-AIa, H-Met-Glu-Ala,

H-Ala-Ala, H-Ala,

25 H-Met-Glu-D-His, H-Va!-D-Glu-His,

H-Gly-Glu-His,

H-D-Met-Glu-His, H-(a-Me)-Ala-Glu-His,

H-( ß-Ala)-Glu-His, H-Met-Gln-His,

H-Met-Ser-His, H-Met-Lys-His 30 ha B jelentése Phe:

ha B jelentése Trp, Leu, Val vagy Tyr, akkor A jelenthet H-Met-Glu-His csoportot; ha B jelentése Leu, akkor A jelenthet Leu-Glu-His csoportot is és 35 ha B jelentése Alá, akkor

A jelenthet H-met-Ala-Ala, Met-GIy-Ala csoportot vagy hidrogénatomot és

A jelentésében az N-terminális helyzetű L-Met-csoport helyett minden esetben Met(—02), Met(—O), tíezamino-Met, dezamino-Met(^O), dezamino-Met(-^02) csoport vagy rövidszénláncú N-alkanoilcsoport állhat és X jelentése hidroxil-, 1—4 szénatomos alkoxi-, aminocsoport vagy;

X jelenthet -Arg-Arg-Pro—NH2, -Arg-Arg-Pro-Val-Lys- 45 -Val-Tyr-Pro—OH-csoportot ha A jelentése hidrogénatom és B jelentése Phe- és fémkomplexei valamint savaddíciós sói előállítására.

A találmány tárgya továbbá olyan gyógyszerkészítmények előállítása is, amelyek hatóanyagként szellemi 50 fogyatékosságú emberek kezelésére alkalmas pszichofarmakológiai anyagokat tartalmaznak. Ez a szellemi fogyatékosság főleg az agy elégtelen működésében mutatkozik meg, különösen szenilitás esetén. A gyógyszerkészítményekben egy vagy több hatóanyagot gyógyá- 55 szatilag elfogadható hordozókkal keverünk össze.

Az I képletű vegyületben X jelentése például alkoxicsoport, például 1—4 szénatomos metoxi-, etoxi-, propoxi- vagy butoxicsoport.

A D-Lys-L-Phe-Gly-(L vagy D)-Lys-L-Pro-L-Val- 60 -Gly-L-Lys-L-Lys I képletű vegyületröl a továbbiakban, mint láncmeghosszabbítás nélküli egységről beszélünk. Ebben a láncmeghosszabbítás nélküli egységben négy lizin egység van és az N-terminális láncvégtől a C-terminális vég felé számítva az első lizinnek D-formában, a 65 harmadik és negyedik lizinnek L formában és a máso2