179663. lajstromszámú szabadalom • Eljárás D-alfa-aminosavak előállítására
3 179663 4 szont semmilyen figyelemre méltó növekedést nem mutatnak akkor, ha az 5-helyzetben szubsztituált hidantoin L-ízomerét kell nitrogénforrásként hasznosítaniuk, A baktériumokat legegyszerűbben az alábbi módszerrel készíthetjük elő. A mikroorganizmus mintáját szelektáló tápközegre oltjuk, amely deciliterenként 0,5 g glükózt, 0,01 g élesztőkivonatot, 0,1 g kálium-dihidrogénfoszfátot, 0,3 g dikálium-hidrogénfoszfátot, 50 mg magnéziumszulfát heptahidrátot, I mg ferroszulfát heptahidrátot, 1 mg mangánszulfát tetrahidrátot és 1,0 g 5-szubsztituált D- vagy L-hídantoint tartalmaz. A közeg pH-ját előnyösen kis értéken tartjuk, hogy megakadályozzuk az 5-helyzetben helyettesített hidantoin D- vagy L-izomerének racemizálódását. A beoltott tápközeget 1—10 napig inkubáljuk 30 “C hőmérsékleten. Az enzim előállításához használható mikroorganizmusok közül példaként megemlítjük az alábbiakat: Pseudomonas solanacearum AJ 11 149 (FERM—P4078, NRRL B—11 255) Pseudomonas caryophylli AJ 11 150 (FERM—P4079, NRRL B—11 256) Pseudomonas diminuta AJ 11 151 (FERM—P4080, NRRL B—11 257) Pseudomonas diminuta AJ 11 152 (FERM P4081, NRRL B—11 258) Achromobacter liquefaciens AJ 11 198 (FERM—P4228, NRRL B—11 259) Alcaligenes aquamarinus AJ 11 199 (FERM—P4229, NRRL B 11 260) Moraxella nonliquefaciens AJ 11 221 (FERM P4348, NRRL B—11 261) Paracoccus denitrificans AJ 11 222 (FERM—P4349, NRRL B—11 262) Arthrobacter fragilus AJ 11 223 (FERM—P4350, NRRL B—11 263) A felsoroltak közül új az Arthrobacter fragilus törzs, amelynek taxonómiai jellemzői az alábbiak (kísérleti meghatározásuk M. J. Pelczav: Manual of Microbiological Methods című könyvében leírt módszerrel, azonosításuk pedig a Bergey’s Manual of Determinative Bacteriology szerinti módszerrel történt): AJ 11 223^ AJ morfológiai jellemzők: 1. sejtforma: pálcikák, 0,5—0,9-szer 1,2—5,0 [ira méretűek 2. pleomorfizmus : nincs 3. motiütás, flageiiáció: mozgékony, a sejtet az ostorkák egyenletesen körülveszik 4. spóra: nincs 5. Gram-festés: gyengén pozitív 6. sav-tartósság: negatív B) a kultúra jellemzői: 1. tápagar lemez: mérsékelt növekedés, körkörös tenyészet, konvex, telt vagy hullámos, amorf, fakó színű, durva, színe vörösbarna és szalmasárga között változik 2. ferde agar kultúra: mérsékelten növekszik, kiömlő vagy kiemelkedő, fonalas vagy szétterjedő 3. tápoldat: gyűrűs, nem zavaros 4. zselatin: nem folyósodik 5. lakmusztej: nem folyósodik, enyhén lúgosodik C) fiziológiai jellemzők: 1. nitrát-redukció: pozitív 2. denitrifikálás: negatív 3. MR-teszt: negatív 4. VP-teszt: negatív 5. indol-termelés: negatív 6. hidrogénszulfid-termelés : negatív 7. keményítő-hidrolízis: negatív 8. citrátfogyasztás Kóser-féle citrátközegben: negatív Christensen-féle citrátközegben: negatív 9. szervetlen nitrogén asszimiláció nitrát: pozitív ammonium: pozitív 10. pigment-képződés: nincs 11. ureáz: negatív 12. oxidáz: pozitív 13. kataláz: pozitív 14. a növekedés mértéke: 37 °C-ig nő, növekszik 6 és 9 pH között 15. aerobiózis: aerob 16. O—F-teszt: 0 17. sav- és gázképződés szénhidrátokból L-arabinóz sav + (gyenge) gáz D-xilóz + (gyenge) — D-glükóz “h — D-mannóz + (gyenge) — D-fruktóz — — D-galaktóz 1 (gyenge)maltóz — — szacharóz + (gyenge) — laktóz — — trehalóz — D-szorbit — D-mannit ■ (gyenge) — inozit + (gyenge)glicerin + (gyenge) — keményítő— 18. glukonsav oxidációja (Haynes-féle módszerrel): negatív 19. malonsav-fogyasztás (Ewing-féle módszerrel): negatív 20. fenilanilin deaminálás (Ewing-féle módszerrel): negatív 21. dekarboxiláz (Moller-féle módszerrel) lizin, ornitin és arginin : negatív 22. arginin-dihidráz (Stanier-féle módszer): negatív 23. kazein-bontás: negatív 24. DNA-bontás: negatív 25. poli-béta-hidroxivajsav-akkumuláció: nincs 26. tápanyagszükséglet: biotin 27. szénhidrátok asszimilációja (Stainer-féle módszerrel): D-glükóz + szacharóz — trehalóz + propíonát — 2-keto-glukonát — butirát — m-inozit + adonit — L-valin — propiiénglíkol — béta-alanin + etanol — DL-arginin + D-xilóz + bétáin + D-ribóz — L-arabinóz + L-ramnóz + 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 65 2
