179595. lajstromszámú szabadalom • Eljárás 1-azaxanton-3-karbonsav-származékok előállítására
35 179595 36 13. példa 27 mg 7-etil-l-azaxanton-3-karbonsav, 12 mg dietanolamin és 10 ml etanol elegyét melegítéssel oldatba visszük. A kapott oldatot betöményítjük, le- 5 hűtjük, a kivált kristályokat pedig szűréssel összegyűjtjük. A fenti eljárással 25 mg 7-etil-l-azaxanton-3-karbonsav-dietanolaminsót kapunk színtelen kristályok formájában, melyek olvadáspontja 162- -164 °C. 10 Analíziseredmények a Ci9H22N206 összegképlet alapján: Számított: C =60,95%, H =5.92%, N = 7,48%; 15 Talált: C = 60,70%, H=5,87%, N = 7,49%. Összehasonlító példa 2C A következő kísérlet eredményei világosan mutatják, hogy a találmány szerinti (I) általános képletű vegyületek közé tartozó 2-amino-l-azaxanton-3-karbonsav és 2-hidroxi-l -azaxanton-3-karbonsav patká- 25 nyoknál a 72 órás passzív kután anafilaxisra gyakorolt gátló hatásban lényegesen felülmúlják a technika állása szerint ismert 2-amino-l-azaxanton-3-karbonsav-etilésztert [Liebigs Ann. Chem. (1976) 1659- 1662j. 30 A kísérlet leírása ellenanyagot tartalmazó patkány-antiszérumot Mota módszerével állítottuk elő [Life Sei., 2, 917 (1963)]. Röviden, az állatokat úgy érzékenyítettük, hogy mindegyik hátsó végtagba intramuszkulárisan 1 ml fiziológiás só-oldatban egyenletesen eloszlatott 1 mg tojás-albumint, intraperitoneálisan pedig 2xl0‘° elölt Bordelia pertussis szuszpenziójának 1 ml-ét juttattuk. Az így érzékenyített állatokból a kezelés után 12 nappal összegyűjtött szérumot egyesítettük és a felhasználásig fagyasztva tároltuk. A homológ patkány passzív kután anafiiaxist (PCA) a következőképpen vizsgáltuk. A szérumból vett 0,05 ml-es alikvot mintákat fiziológiás só-oldattal négyszeres térfogatra hígítottunk, és ir.tradermálisan, altatás mellett a patkányok leborotvált háti bőrébe injektáltunk. Egy 72 órás látens periódus után az állatoknak intravénás injekció formájában 5 mg tojás-albumint és 10 mg Evans kéket tartalmazó 1 ml fiziológiás só-oldatot adtunk. Az állatokat 30 perccel az antigén reakció kiváltása után érvágással elpusztítottuk, bőrüket lenyúztuk és a PCA reakció intenzitását a megfestett terület legnagyobb átmérőjének és mm2-ben megadott felületének mérésével határoztuk meg. Az antiszérumot tartalmazó IgE PCA titere 1:16 volt. A gyógyhatású vegyületek hatását a PCA reakció átlagértékének %-os gátlásával vagy az 50%-os gátlást eredményező dózissal jellemeztük. Az utóbbit grafikusan. a dózis-gátlás összefüggésből határoztuk meg. Az 5%. gumiarábikumban szuszpendált gyógyhatású vegyületeket intraperitoneálisan adagoltuk, 5 perccel az antigén reakció kiváltása előtt. Az alkalmazott dózis 0.2 ml/100 g testsúly volt. (i) Kísérleti módszer 35 A kísérlethez 8 hetes, 220 320 g súlyú hím Sprague-Dawley patkányokat használtunk. Az IgE Eredmények A kapott eredményeket a következő táblázatban foglaljuk össze. Vegyület Az állatok száma Dózis (mg/kg) PCA (mm2 ) %-os gátlás kontroll 4 _ 215 ± 8 _ A 3 5 184 ± 6* 14.6 3 20 55± 8*** 74,3 B 3 20 213+ 9 0,9 3 50 185+ 6* 14,1 C 3 5 121 ± 16** 43.6 3 20 35 ± 18*** 83.7 D 3 5 212 ± 9 1.4 3 20 111 ±52 48,5 A vegyület: B vegyület: C vegyület: D vegyület: 2-amino-1 -azaxanton-3 -karbonsav 2-amino-l-azaxanton-3-karbonsav-etiiészter 2-hidroxi-l-azaxanton-3-karbonsav 2-hídroxi-l-azaxanton-3-karbonsav-etilészter * P < 0,05 ** P<0,01 Szignifikáns eltérés a kontrolitól *** P< 0,001 18
