179497. lajstromszámú szabadalom • Eljárás az inzulin-kiválasztást befolyásoló biológiailag hatásos anyag előállítására Bordetella-pertussis felhasználásával
179497 Ezért elvégeztük a következő kísérletet. A kísérlethez használt egerek KK-egerek, amelyeket eredetileg a Faculty of Agriculture, Nagoya University szállított, ugyanitt végezték a párosítást ezeknek hím és nőstény testvérei között, valamint a további tenyésztést. A kísérlet lefolytatása céljából a glükózt (0,15 g/20 g testsúly) orálisan adtuk be 20—25 hetes egereknek, majd kiválasztottunk 5 állatot, amelyek a normál csoporthoz (ddy-törzs) hasonlítva a glükóztoleranciában egyértelműen zavart mutattak. Amint a 14. táblázatból kitűnik, ezeknél az egereknél a glükóz eltűnése a glükóz beadása után nem figyelhető meg, és ezek az állatok nyilvánvalóan diabetikus állapotban lévőknek tekinthetők. A KK-egerek ezen csoportjának a találmány szerinti anyagnak a farokvénába történő injektálása után a harmadik napon újból adtunk be glükózt. Ennek következtében a glükóztolerancia a találmány szerinti anyag beadása előtti állapothoz viszonyítva erősen fokozódott. A glükóztolerancia továbbá sokkal jobban javult, mint a normál csoportban. így megállapíthatjuk, hogy a szigeteket-aktiváló-protein beadásának spontán diabetesnél kielégítő terápiás hatás a következménye. Az alábbi 14. táblázat szemlélteti a glükóztolerancia javítására irányuló kísérletek eredményeit KK-egerekben, szigeteket-aktiváló-proteinnal végzett kezeléssel. 25 7. A farmakológiai hatás időtartama A szigeteket-aktiváló-protein farmakológiai hatásai több órával a beadás után mutatkoznak, és 3—7 nap 5 múlva érik el a maximális értéket, majd fokozatosan csökkennek. Később közöljük a kísérletek eredményeit a hatás időtartamára vonatkozóan patkányokban (0,5 (ig) és kutyákban (1,0 /ag/kg). Kutyákon vizsgálatokat végeztünk a glükóztoleran- 10 ciára, mint a 15 nappal a szigeteket-aktiváló-protein alkalmazása utáni intravénás glükózbeadás reakciójára, továbbá a szigeteket-aktiváló-protein alkalmazását követő 29., ill. 42. napon az epinefrin- és glükagonadagolás reakciójaként fellépő inzulinkiválasztó 15 aktivitásra. A kapott eredmények azt mutatják, hogy kielégítő aktivitás volt megfigyelhető még a 42. napon is, amit a 15. táblázat szemléltet. Patkányoknál a maximális aktivitás (ami 3 nappal a beadás után jelentkezett) 50%-ban a kezelés után a 28. napon volt 20 megfigyelhető. Ezekből az eredményekből kitűnik, hogy a szigeteket-aktiváló-protein farmakológiai hatása több hétig, illetve több hónapig tart, emellett a hatás intenzitása az adagolás szerint változik. A 15. táblázat bemutatja annak a kísérletnek az 25 eredményeit, ahol a szigeteket-aktiváló-protein alkalmazása után a 42. napon kutyáknak az inzulinkiválas.'tás fokozására glükagont adtunk be. 26 14. táblázat A glükóz beadása után eltelt idő (perc) 0 30 60 120 180 Normál csoport (ddy-törzs) 98+ 7X 214 ± 16 339 ± 13 192± 9 144+ 14 Diabetikus csoport (KK törzs) Kezelés előtt Kezelés után 117+6 72+3 300 ± 33 150 ± 11 308 ± 21 118 ± 9 326 ± 40 90± 8 3101 39 63 + 11 Az eredmény minden egyes kísérletnél 5 állatból kapott középérték ± standard hiba. xVérglükóz (mg/dl) 15. táblázat A glükagon beadása után eltelt idő (perc) 0 5 15 30 Kontrollcsoport 6 ± lx 141 1 912 81 1 Kezelt csoport 6 ± 1 71 ±9 2818 7 + 1 13
