179463. lajstromszámú szabadalom • Eljárás dexozi-narazin antibiotikum-komplex előállítására
179463 18 fém visszanyerése (Cussler, Evans és Matesick, Science, 172,377, 1971). A 20-dezoxi-narazin és sói gátolják az ATPáz enzimet. Az ATPáz enzim a sejtmembránban található alkálifém-szenzitív enzim, és az aktív transzport számára biztosítja az energiát. Az aktív transzport során energiafelhasználással biztosítja a sejt a sejten belüli és sejten kívüli folyadék összetételének állandóságát. Az ATPáz enzim gátlószerei csökkentik az aktív transport számára szükséges energiaszintet. In vitro vizsgálatok bizonyítják, hogy a 20-dezoxi-narazin nátriumsója gátolja az ATPáz függő kation-transzportot a máj mitokondriumokban. A hatásos dózis felének koncentrációja 0,065 jug/ml. A 20-dezoxi-narazin és sói hatásos kardiotonikus szerek. Izolált tengerimalac aortával végzett kísérletekben a 20-dezoxi-narazin növeli a kardiális összehúzódást. A kísérletben az eredményeket %-ban jegyeztük fel, 100%-nak véve 10~4M norepinefrinnel kiváltható legnagyobb összehúzódást. A 20-dezoxi-narazin nátriumsója 10'5M koncentrációban átlagosan 43,8±l,4%-os (n : 4) összehúzódást vált ki- Ezen vizsgálat részleteire vonatkozóan lásd a 3 985 893 számú Amerikai Egyesült Államok-beli szabadalmi lírást. A találmány feladata ezért módszer az emlős szívizom összehúzódásának fokozása melegvérű emlősök esetén, amely abban áll, hogy hatásos nem toxikus mennyiségű 20-dezoxi-narazint vagy ennek gyógyszerészeti szempontból elfogadható sóját adagoljuk. A hatásos nem toxikus dózis általában testsúlykilogrammra számítva 30 pg és 500 pg között változik. Előnyösen testsúlykilogrammra számítva 30 pg és 100 pg közötti mennyiséget adagolunk. A fenti hatás kiváltására az antibiotikumot parenterálisan, például intravénás infúzióval adagoljuk. Ebben az esetben az adagolás csepegtetéses módszerrel történik, oly módon, hogy az antibiotikumot sztenderd i.v. oldatban, például dextróz oldatban oldjuk. A 20-dezoxi-narazint testsúlykilogrammra számítva kevesebb, mint 100 pg mennyiségben adagoljuk mindaddig, míg a szív összehúzódásának megkívánt növekedése bekövetkezik. Ezután az adagolt 20-dezoxi-narazin mennyiségét az igényelt állapot megtartására szükséges mennyiségben adagoljuk tovább. A 20-dezoxi-narazin adagolásának módja más ionotrop szerek klinikai adagolásához hasonlóan függ az adott klinikai esettől, például a kezelendő egyén 20-dezoxi-narazin toleranciájától, a szívkatasztrófa természetétől, például a szívizom sérülésének mértékétől, továbbá a beteg korától és általános fizikai állapotától. A találmány szerinti eljárás szerint a pozitív ionotrop szert, a 20-dezoxi-narazint kardiogén sokknak jelölt klinikai helyzetekben használhatjuk. Ilyen helyzeteket jelent például a miokardiális infarktus, a halmozott szívsérülések és az operáció utáni sokk-állapot. A találmány szerinti eljárást a következőkben példákkal szemléltetjük. 17 A. Fermentáció rázott tenyészetben 1. példa 5 Előállítjuk a Streptomyces aureofaciens NRRL 11181 törzs tenyészetét a következő összetételű ferdeagaron: K2HP04 10 MgS04x7H20 nh4no3 CaC03 FeS04 x 7H20 MnCl2 x 7H20 15 ZnS04 x 7H2 O Glükóz Agár Desztillált víz A táptalaj pH-ja beállítás 20 nélkül 2 g 0,25 g 2 g 2,5 g 0,001 g' 0,001 g 0,001 g 10 g 20 g 1 literre feltöltve 7,7 25 30 35 40 45 50 55 60 A ferdeagart beoltjuk a Streptomyces aureofaciens NRRL 11 181 törzzsel, majd 7 napont át 30 °C hőmérsékleten inkubáljuk a tenyészetet. Az érett ferdeagar-tenyészetre steril marhaszérumot töltünk, majd steril kaccs segítségével felszabadítjuk a spórákat. Az így kapott marhaszérumos spóraszuszpenziot, amely micéliumdarabkákat is tartalmaz, legfeljebb 6 darabból álló készítményt előállítva fagyasztva szárítjuk. Egy fagyasztva szárított tenyészetdarabkával 50 ml térfogatú, az alábbiakban megadott összetételű vegetatív táptalajt oltunk: Glükóz 20 g Szójaliszt 15 g Kukoricalekvár 10 g CaC03 2 g Csapvíz 1 literre feltöltve. A táptalaj pH-ját 5N 6,5-re állítjuk be. nátriumhidroxid oldattal A 250 ml térfogatú Erlenmeyer lombikokba töltött beoltott vegetatív táptalajt 24-48 órán át 30 °C hőmérsékleten olyan rázóasztalon tenyésztjük, amely 5 cm átmérőjű kör mentén mozog percenként 250-et fordulva. Az így előállított vegetatív tenyészettel 250 ml az alábbiakban megadott összetételű táptalaj egyikét oltjuk: I táptalaj : Tápióka dextrin* 60 g Enzimesen hidrolizált kazein** 6g Enzimesen hidrolizált kazein*** 2 g CaC03 2 g MgS04 x7H20 0,5 g Melasz 15 g Finomított szójababolaj 5,0 ml Csapvíz 1 literre feltöltve 65 A táptalaj pH-ja beállítás nélkül 6.6. 9
