179463. lajstromszámú szabadalom • Eljárás dexozi-narazin antibiotikum-komplex előállítására
11, 179463 12 Nagytérfogatú fermentlevek feldolgozása során különösen előnyösen az azeotrop desztillálóval való izolálás. Az azeotropból távozó víz és oldószer egyaránt elkülöníthető és ezután további használatra recirkuláltatható. Az így kapott víz szennyezőanyagokat nem tartalmaz, és nem igényel víztisztítási lépéseket. A dezoxi-narazin antibiotikumok további tisztítását újabb extrakcióval vagy adszorpciós módszerekkel végezzük. Adszorpciós anyagként például szilikagélt, aktívszenet, FlorosilR-t (magnézium-szilikát, Floridin Co., Po. Box 989, Tallahasse„ Florida, USA), vagy hasonlókat használunk. A dezoxi-narazin antibiotikum-komplex forrásaként használhatjuk a tenyészet szilárd halmazállapotú részeit, köztük a micéliumot és a táptalaj összetevőket, anélkül, hogy azokat extrahálnánk vagy elkülönítenénk. így például úgy járhatunk el, hogy a dezoxi-narazin termelésének befejezése után a tenyészetet fagyasztva szárítjuk, vagy dobszárítóban vízmentesítjük és ebben az alakban keverjük a takarmány premixhez. A találmány szerinti eljárás egy másik előnyös kivitelezési változata szerint, miután a táptalajban felhalmozódott a dezoxi-narazin, elkülönítjük a micéliumot és szárítjuk, ami után a takarmány premixben közvetlenül használható terméket kapunk. Ily módon elkülönítve a micéliumot előnyösen 10 g/litei kalciumkarbonátot aduek a tenyészethez, ami elősegíti a szűrést és szárazabb végtermékhez jutunk. A fentiekben ismertetett körülmények között a Streptomyces aureofaciens előzőekben ismertetett NRRL 11181 jelű törzsét tenyésztve 20-dezoxi-narazin és 20-dezoxi-epi-17-narazin halmozódik fel a táptalajban. A Streptomyces aureofaciens NRRL 11 181 jelű törzsének tenyésztésekor minor komponensek is elkülöníthetők a tenyészléből, ezek mennyisége azonban túl kicsi ahhoz, hogy jellemezni tudjuk őket. Bár az egyes komponensek egymáshoz viszonyított aránya a fermentáció körülményeitől és az elkülönítési eljárástól függ, általában több 20-dezoxi-epi-17-narazint kapunk, mint 20-dezoxi-narazint. A 20-dezoxi-narazint és a 20-dezoxi-epi-17-narazint elkülönítjük egymástól és ismert módszerekkel, mint például oszlopkromatográfiával, vékonyrétegkromatográfiával, ellenáramú megoszlással különkülön izoláljuk. A 20-dezoxi-narazint és a 20-dezoxi-epi-17-narazint például szilikagél oszlopon kivitelezett kromatográfiával különíthetjük el egymástól, az eluálást különböző oldószerelegyekkel végezzük. Ha például benzol és etilacetát oldószereleggyel végezzük az eluálást, a 20-dezoxi-epi-17-narazin eluálódik először, majd ezt követően a 20-dezoxi-narazin. Az eluálást szilikagél vékonyrétegkromatográfiával, a kifejlesztést 100%-os etilacetáttal végezve ellenőrizzük. A találmány szerinti eljárással előállított dezoxi-narazin antibiotikumok baktériumellenes hatású vegyületek. A 20-dezoxi-epi-17-narazin szabad sav alakjának mikrobiológiai hatásspektrumát a 4. táblázatban adjuk meg. A vizsgálatokat az ismert papírkorong-diffúziós módszerrel végeztük. 4. táblázat Gátlási zóna mm-ben Vizsgált mikroorganizmus 300 pg/korong 30 pg/korong Staphylococcus aureus 3055 16,9 13,8 Staphylococcus aureus 3074a 19,5 15,4 Staphylococcus aureus 3130b 19,0 17,0 Streptococcus pyogenes (A csoport) 12,0 10,0 Streptococcus sp. (D csoport) 17,0 14,6 Diplococcus pneumoniae 16,0 13,0 aG penicillin rezisztens bMeticillin rezisztens A dezoxi-narazin antibiotikumok gátolják az anaerob baktériumok növekedését is. A 20-dezoxi-epi-17-narazin szabad savas alakjának legkisebb növekedésgátló koncentrációit különböző anaerob baktériumokkal szemben a sztenderd agar-hígításos méréssel határoztuk meg, és az eredményeket az 5. táblázatban ismertetjük. A kísérlet eredményeit 24 órás inkubációs szakasz után jegyeztük fel. 5.táblázat Anaerob baktérium Legkisebb növekedésgátló koncentráció (hg/ml) Actinomyces israelii W 855 8 Clostridium perfringens 81 16 Clostridium septicum 1128 16 Eubacterium aureofaciens 1235 16 Peptococcus asaccharolyticus 1302 8 Peptococcus prevoti 1281 4 Peptostreptococcus anaerobius 1428 4 Peptostreptococcus intermedius 1264 4 Propionibacterium acnes 79 2 Bacteroides fragilis 111 >128 A dezoxi-narazin antibiotikumok egy másik előnyös tulajdonsága, hogy Mycoplasma ellen is hatékony. A Mycoplasma fajok pleuro-pneumonia-szer (PPLO) mikroorganizmusként is ismeretesek, és patogének az emberre és különböző állatokra. A PPLO mikroorganizmusokkal szemben aktív vegyületek különösen előnyösen használhatók a baromfitenyésztő iparban. A 20-dezoxi-epi-17-narazin szabad 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 65 6
