179457. lajstromszámú szabadalom • Eljárás dimer vinka-alkaloid andihro-származékok előállítására
5 179457 6 1. példa Anhidro-vegyületek előállítása vinkrisztin-szulfátból 147,6 mg vinkrisztin-szulfátot lassú ütemben hozzá adunk 877,1 mg hideg 18 mólos kénsavhoz. A hozzáadás befejezése után a reakcióelegyet (szobahőmérsékleten) keveijük fél óra hosszat, majd 13 ml száraz metanolt, ezt követően pedig 2,8193 g szilárd nátriumkarbonátot adunk hozzá. A keletkező elegyet körülbelül 45 percig keveijük, utána 40 ml telített, vizes nátriumkloridot adunk hozzá és a térfogatát desztillált vízzel 80 ml-re egészítjük ki. A keletkező vizes oldatot egyenlő térfogatú benzollal négyszer extraháljuk. A benzolos kivonatokat elkülönítés után egyesítjük, szárítjuk és a benzolt lepárlással eltávolítjuk. Ily módon 57,2 mg maradékot kapunk, amely a három anhidro-származékot tartalmazza, ahogy ez a vékonyrétegkromatográfián elkülönítve megjelenő három elkülönített folttal igazolható. A reakcióelegyet preparatív vékonyrétegkromatográfíával metanolban oldva választjuk szét szilikagélen és eluálószerként metanolt használunk. A preparatív kromatogramot kézzel három zónára osztjuk és az anhidro-származékokat az egyes zónákból a szilikagél adszorbensről úgy távolítjuk el, hogy azt etilacetát-metiléndiklorid-(l : 1 arányú) oldószereleggyel mossuk kétszer, amelyet két metanolos mosás követ. A vinkrisztinből kapott három anhidro-vegyületet, amelyet a fenti reakcióval állítottunk elő, így elkülönítjük és tisztítjuk. A kénsavas kezelés és az ezt követő elkülönítési folyamatok során a 4-es szénatomon levő acetil-csoport hidrolizálódott és a keletkezett anhidro-származékok valamennyien a 4-dezacetil-vinkrisztin-származékai. E vegyületek mindegyike a (II) általános képletű szerkezetnek felel meg, amelyben R metoxi-csoport, R’ hidroxil-csoport és R” formil-csoport. Ily módon 19,2 mg 3’,4’4zomert (Z = IUa) kapunk, amelynek a fizikai jellemzői a következők: Tömegspektrográf: molekuláris ion 764, más csúcsok 750, 736, 688, 676, 660, 554, 537, 494, 478, 336, 337, 279, 261, 247, 249, 219, 167, 149, 136, 120, 121, 111, 106 és egy átmetilezési csúcs 778 hossznál. (Részleges NMR spektrum (deuteriumos kloroformban) 5 = (ppm) 0,96, 3,58, 3,63, 3,74, 3,81, 3,87 és 5,41 (multiplet). 12,5 mg 4’,20’-anhidro4-dezacetil-vinkrisztin (1-es izomert) (Z = IHb) kapunk, amelynek a fizikai jellemzői a következők: molekuláris ion 764, más ion-csúcsok 734, 704, 705, 706, 688, 660, 646, 630, 601, 602, 576, 488, 472, 368, 351, 337, 293, 279, 223, 167, 149, 123, 111 és egy átmetilezési csúcs 778 hossznál. (Részleges) NMR (CDC13) spektrum: 5 = 0,94 (triplet), 1,65 (doublet), 3,58, 3,63, 3,75, 3,82,3,88 és 5,46 (multiplet) ppm-néL 8,7 mg 4’,20’-anhidro-C-4-dezacetil-vinkrisztin (2-es izomert) (Z = lile) kapunk, amelynek a fizikai jellemzői a következők: tömegspektrográfiás mérés: molekuláris ion 764, más ion-csúcsok 736, 705, 677, 634, 606, 413, 368, 351, 336, 337, 313, 279, 167, 149, 121, 111 és egy átmetilezési csúcs 778 hossznál. (Részleges) NMR (CDC13) spektrum: S = 090 (triplet), 1,71 (doublet), 3,59, 3,64, 3,75, 3,82, 3,86 és 5,30 (multiplet) ppm-nél. 2. példa Anhidio-vegyületek előállítása VLB-szulfátból Az 1. példában leírt módon járunk el és 560 mg VLB-szulfátot adunk hozzá fokozatosan keverés közben 2,9681. g hideg 18 mólos kénsavhoz. A reakciót lejátszatjuk és a három anhidro-4-dezacetil-VLB•származékok elegyét [(TI) általános képletnek megfelelő vegyületek, ahol R jelentése metoxi-csoport, R’ hidroxil-csoport, R” metil-csoport és Z jelentése a megadott (IIIa-c) részképlet, elegyét] a már megadott módon izoláljuk. A három anhidro-származékot preparatív vékonyrétegkromatográfiával szétválasztjuk, az egyes származékok sávját kézzel szétvesszük és a vegyületet metanollal kimossuk belőle. A frakciók teljes súlya 162,4 mg, amely 35%-os kitermelésnek felel meg. A két 4’,20’-anhidro-származék vékonyrétegkromatográfiás vizsgálata azt mutatja, hogy szennyezőket tartalmaznak, ezért a két izomer-frakciót elkülönítve az 1, példa szerint preparatív vékonyrétegkromatográfiás lapokra visszük és újra kromatografáljuk. A tisztított anyag végső hozama a következő: 55,3 mg 3’,4’-anhidro4-dezacetil-VLB (Z = IIIa), amelynek a fizikai jellemzői a következők: NMR spektrum (deutériumos kloroformban): 8 = (ppm) 1,00-2,00 (multiplet, 3,75 (N-metil), 3,60, 3,81, 3,85, 4,10, 5,46 (multiplet), 5,80 (etilénes hidrogének), 6,11, 6,61. Tömegspektrográf: molekuláris ion 750, más csúcsok 570, 427, 240, 188, 152, 136, 135, 122, 121, 107, 106 és átmetilezési csúcsok 764 és 778 hossznál. 4’,20’-anhídro-4-dezacetil-VLB (1-es izomer) (Z = Illb) 41,4 mg mennyiségben, amelynek a fizikai jellemzői a következők: (Részleges) NMR spektrum (deutériumos kloroform) ő = (ppm) 0,95 (doublet), 1,66 (doublet), 2,61, 2,76, 3,28 (multiplet), 3,60, 3,70, 3,81, 3,85, 4,09 (multiplet), 5,80 (etilénes hidrogének), 6,10, 6,57. Tömegspektrográf: molekuláris ion 750, más csúcsok 692, 691, 633 , 620, 533, 525, 524, 427, 336, 240, 171, 167, 149,136, 135,122 és átmetilezési csúcsok 764 és 778 hossznál. 4’,20’-anhidro4-dezacetil-VLB (2-es izomer) (Z = IIlc) 22,5 mg mennyiségben, amelynek a fizikai jellemzői a következők: (Részleges) NMR spektrum (deutériumos kloroform) 6 = (ppm) 0,95 (doublet) 1,71 (doublet), 2,60,2,75 (N-metil), 3,25'(multiplet), 3,60 (eszter), 3,79, 3,84,4,08 (multiplet), 5,28 (multiplet), 5,80 (etilénes hidrogén), 6,08, 6,55. Tömegspektrográf: molekuláris ion 750, más csúcsok 691, 633, 620, 553, 525, 427, 337, 336, 240, 171, 167, 149, 136, 135, 122, 121, 107, 106, és átmetilezési csúcs 754 és 778 hossznál. 3. példa Az 1. példában leírt módon járunk el, és 162,2 mg leurozidint lassú ütemben hozzáadunk 1,9391 g 18 3 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 $5
