179422. lajstromszámú szabadalom • Eljárás DL-5-metil-tetrahidrofólsav és sói előállítására
3 17942?. 4 —381 (1970)] a b) lépést elhagyják, és a redukció utáni reakcióelegyet amelyben a bór-hidrid feleslegét elbontották, közvetlenül formaldehiddel és egy másik alkálifém-bór-hidriddel kezelik. Nyilvánvaló, hogy az ismert eljárás ilyenfajta módosítása nem jelent lényeges tökéletesítést, mivel az a) lépés során továbbra is különféle komponensek elegye képződik, s a b) lépés elhagyása még összetettebb és nehezebben tisztítható végső reakcióelegyet eredményez. Ennek következtében a d) tisztító lépés még nagyobb nehézségekkel jár, és a tisztítás során 60%-os termékveszteség jelentkezik. Ezen túlmenően, nem állítható elő olyan nagy tisztaságú termék, amilyenre gyógyászati célokra szükség lenne. összefoglalva azt állapíthatjuk meg, hogy a fenti ismert eljárást, amely még a legjobb az ismert eljárások közül, csak laboratóriumi méretben alkalmazták, és segítségével csak kísérleti célokra szolgáló kis anyagmennyiségeket állítottak elő. Ehhez az eljáráshoz hasonló eljárást ismertet a Z. Naturforsch. Teil c. (11—12), 650—2 (1973) cikke. Az idézett cikk szerint a metií-tetrahidrofolsav tisztítását úgy végzik, hogy a metil-tetrahidrofolsavat báriumsója alakjában kicsapják majd ezután három különböző, ioncserélőgyantát tartalmazó oszlopon tisztítják. Ez a tisztítási módszer előnyösebb a már említett módszereknél, mivel kisebb oszlopok alkalmazhatók és töményebb metil-tetrahidrofolsav-oldatokat kapunk. A kromatográfiás tisztítás azonban ebből az eljárásból nem küszöbölhető ki, sőt további lépést jelent a báriumsó előállítása. Az ezzel az eljárással előállított tiszta termék kitermelése 31%. Meglepő módon azt találtuk, hogy a folsav (amely ipari méretben gazdaságosan előállítható kiindulási anyag) rendkívül jó termeléssel, költséges és körülményes kromatográfiás tisztítás nélkül átalakítható gyógyászati tisztaságú dl-5-metil-tetrahidrofolsawá, ha a foísavat olyan kritikus reakciókörülmények között redukáljuk,, hogy gyakorlatilag 100%-os szelektivitással képződik a tetrahidrofolsav.. A találmány szerinti eljárás lényegében a következő lépésekből áll: 1. A foísavat tetrahidrofolsawá redukáljuk vizes, 7-8 pH-értékű oldatban és inertgázatmoszférában, 60—80 °C közötti hőmérsékleten nátrium-bór-hidriddel. A redukció során a nátrium-bór-hidrid és a folsav aránya 0,5 : 1-3 : 1, és a reakcióidő 30 perc és 2 óra között van. A találmány szerinti redukció előnyös reakciókörülményei a következők: a nátrium-bór-hidrid és a folsav aránya 0,7 : 1-2 : 1, — a reakcióidő 1 óra — hőmérséklet 70 °C. 2. A képződött tetrahidrofolsavat 5-metil-tetrahidrofolsawá metilezzük 37%-os vizes formaldehid-oldattal és nátrium-bór-hidriddel. A reakció végén ismét adunk az elegyhez 37%-os vizes formaldehid-oldatot. A metilezés kritikus reakciókörülményei az alábbiak:-pH értéke 6-8 — hőmérséklet 25-30 °C — a 37%-os formaldehid-oldat és a tetrahidrofolsav aránya 0,8 : 1-2,5 : 1 — a nátrium-bór-hidrid és a tetrahidrofolsav aránya 0,25 : 1-1,5 : 1 — inertgázatmoszféra — redukálószer (cisztein, redukált glutation, pantotein) jelenléte a végső reakciólépésnél. A találmány szerinti metilezés előnyös reakciókörülményei: — pH értéke 6,5 — hőmérséklet 30 °C — a 37%-os formaldehid-oldat és a tetrahidrofolsav aránya 1,4 : 1 — a nátrium-bór-hidrid és a tetrahidrofolsav aránya 0,5 : 1-1 : 1 — redukálószer a reakcióelegyben: cisztein. 3. A képződött 5-metil-tetrahidrofolsav-nátriumsót elkülönítjük és tisztítjuk. Ezt a lépést két egyformán előnyös módon hajtjuk végre, annak következtében, hogy a metilezés utáni reakcióelegy gyakorlatilag csupán 5-metil-tetrahidrofolsav-nátriumsót tartalmaz. A) módszer: Elkülönítés aktív szénen történő adszorpcióval, majd pedig deszorpcióval. Az eredetileg kiindulási anyagnak alkalmazott folsavmennyiség 5-20-szorosának megfelelő mennyiségű aktív szenet vízzel péppé alakítunk és keverés közben hozzáadjuk a 6,5-6,8 pH-értékű, metilezés utáni reakcióelegyhez. Az aktív szenet ezután szűrjük, majd eluálószerben szuszpendáljuk. Az eluálószer valamely 1—4 szénatomos alkohol vagy 2-metoxi-etanol és víz 50 : 50-95 : 5 arányú elegye. Az eluáló elegy célszerűen redukálószert és ammóniumhidroxidot is tartalmaz. A redukálószer mennyisége például 0,2-1,5%, az ammóniumhidroxidé pedig 0,5—5%. Az aktív szén eluálószerrel készített szuszpenzióját szűrjük, és a szűrletből az 5-rnetil-tetrahidrofolsav-nátriumsót elkülönítjük. Az elkülönítés történhet vízzel elegyedő szerves oldószerrel történő kicsapással, vagy pedig az oldat bepárlásával és a maradék liofrlizálásával. A vegyületet alkáli földfémsó formájában is elkülöníthetjük, majd pedig a sóból az 5-metil-tetrahidrofolsavat felszabadíthatjuk. Az A) módszer szerinti elkülönítés és tisztítás előnyös körülményei a következők: — az aktív szén és a folsav aránya 7 : 1 — az eluálószer etanol, metanol vagy 2-metoxi-etanol és víz 80 : 20 térfogatarányú elegye — redukálószer az elegyben: cisztein, a teljes eluáló elegy 1%-ának megfelelő mennyiségben — 34%-os vizes ammóniumhidroxid-oldat, a teljes eluáló elegy 2%-ának megfelelő mennyiségben (0,7% ammónia). 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 65 2
