179145. lajstromszámú szabadalom • Eljárás sziszomicin előállítására mikrobiológiai úton, micromonospora danubiensis-szel
179.145 3. példa A Mioromonospora danubiens!s JMS-3 /MNG 00171/ törzsnek az 1. példa szerint, rázóasztalon előállított vegetativ tenyészetével beoltjuk a következő összetételű táptalajt: keményítő szójaliszt hidrolizátum ammóniumszulfát nátriumklorid oinkszulfát kálciurakarbonát c sapviz 25,0 g 15.0 g 2.0 g 3.0 g 0,5 S' 8.0 g 1000 ml-re. A táptalaj pH-ja sterilezés után 7,0-7,2, mennyisége 6 liter/10 literes üvegfermentorban/. A szójaliszt hidrolízisét NOVO Alcalase 06 L/NOVO INDUSTRIAS AS,Koppenhága/ bakteriális proteázzal végeztük, 60 C°-on, 30 percig, 7,5-ös pH-n. Beoltás után a tenyésztést 28 C°-on végezzük, *4-00 fordulat/ perc kevertetés, és 6 liter/perc levegőztetés mellett. Habzásgátlóként pálmaolajat alkalmazunk. A 40 óra alatt kifejlődött oltóanyag uOO ml-ét használjuk fel az alábbi összetételű fermentációs táptalaj oltásához: szójaliszt hidro-50.0 g 10.0 g 25.0 g 10.0 g 5.0 g 4, 5 mg 1000 ml-re. A táptalaj pH-ja sterilezés után 7,0-7,2, mennyisége 6 liter /10 literes üvegfermentorban/. A szójaliszt hidrolízisét NOVO Alcalase 06 L/NOVO INDUSTRIAS AS,Koppenhága/ bakteriális proteázzal végeztük, 60 C-on, 30 percig, 7,5-ös pH-n. Beoltás után a tenyésztést 31 C°-on végezzük, 600 fordulat/ perc kevertetés és 6 liter/perc levegőztetés mellett. Habzásgátlóként pálmaolajat alkalmazunk. Az antibiotikum termelés a fermentáció 26-30. órája között indul meg, s a maximális érté-4 két a fermentáció 100. órájára éri el. Ekkor a fermentlé öszszes antibiotikum tartalma sziszomicin standardra vonatkoztatva 430 E/ml. 4. példa A Mioromonospora danubiensis JMS-3 /MNG 00171/ törzsnek a 2. példa szerint előállított, üvegfermentorban kifejlődött vegetativ tenyészetével beoltjuk a következő összetételű inokulum’ táptalajt, 200 liter mennyiségben /az előfermentor térfogata 300 liter, saválló acél/: lizátura keményítő dextrin szacharóz kalciumkarbonát kobaltklorid csapviz szójaliszt keményítő szacharóz kaiciumkarbonát c sapviz 10.0 g 10.0 g 10.0 g 4,0 g 1000 ml-re A táptalaj pH-ja sterilezés után 7,0-7,2. Habzásgátlóként pálmaolajat alkalmazunk. A tenyésztést 31 C°-on végezzük, 180 fordulat/pere kevertetés, 200 liter/perc levegőztetés mellett. A 36 óra alatt kifejlődött oltóanyagot használjuk fel az alábbi összetételű fermentációs táptalaj oltásához: /a táptalaj térfogata 2000 1/ 7
