179013. lajstromszámú szabadalom • Eljárás az A-35512 antibiotikum-keverék előállítására
179013 4 miatt a takarmányhasznosítás növelése egyre nagyobb fontossággal bír. A dietil-stilbestrol és más ösztrogének növelik a takarmány hasznosítását nagyszámú állat és baromfi esetében. Ugyanakkor gondolnunk kell arra a kockázatra, amelyet ezen takarmány adalékanyagoknak a húsban visszamaradó része okoz. Komoly gazdasági igény merül fel olyan új eljárások iránt, amelyek révén lehetségessé válik a kérődző állatok és a baromfiak etetésekor használt, korlátozott mennyiségben rendelkezésre álló takarmány hatásosabb felhasználására. A találmány szerinti eljárással előállított A—35 512 jelű antibiotikum-keverék, az egyes komponensek és ezek származékai előrelépést jelentenek ezen a téren. A találmány tárgya eljárás az A, B, C, E, F, G és H komponensekből álló, A—35 512 antibiotikum-keverék, az A, a B, a C, az E, az F, a G és a H komponensek, továbbá a B komponens aglikon-származékának előállítására. A fenti vegyületek előállítására a találmány értelmében úgy járunk el, hogy a) a Streptomyces candidus NRRL 8 156 törzset, vagy ennek egy A-35 512 jelű vegyületet termelő mutánsát felhasználható szénforrást, nitrogénforrást és szervetlen sókat tartalmazó táptalajon, süllyesztett, levegőztetett fermentációs körülmények között addig tenyésztjük, amig jelentős mennyiségű antibiotikum halmozódik fel a táptalajban, b) adott esetben az A-35 512 antibiotikum-keveréket elkülönítjük a táptalajból, c) adott esetben elkülönítjük az A, B, C, E, F, G, és H antibiotikum komponenseket az A—35 512 antibiotikum-keverékből, és végül d) adott esetben az A—35 512 B komponensből előállítjuk az A-35 512 B komponens aglikonját. A tenyészlében felhalmozódó egyes komponensek száma és aránya a fermentációs körülményektől függően változik. A találmány leírásakor használt A-35 512 jelet az előállított antibiotikumok kapcsán önkényesen választottuk. Az A-35 512 antibiotikum-keverék legnagyobb mennyiségben jelenlevő komponense a B komponens. Az A—35 512 antibiotikum-keverékben jelenlevő komponenseket hidrogénkloridos sókként különítjük el a keverékből. Az egyes komponenseket átalakíthatjuk szabad bázis alakká (ionos kloridtól mentes), például gyengén bázisos ioncserélő gyantán végzett kromatográfiával. Használhatjuk az A-35 512 komponensek más gyógyászati szempontból elfogadható sóit is a szabad bázisokon és a hidrogénkloridos sókon kívül. A rövidség kedvéért az „A—35 512 vegyület” kifejezést használjuk egy olyan vegyület és ennek gyógyászati szempontból elfogadható sójának jelölésére, amelyet az A, B, C, E és H komponensekből álló A—35 512 keverékből különítettünk el. A mellékletben megadott ábrákon a következő A—35 512 komponensek káliumbromid tablettában vizsgált infravörös abszorpciós spektrumát adjuk meg: 1. ábra. A—35 512 A komponens dihidrogénklorid só, 2. ábra. A-35 512 B komponens dihidrogénklorid se. 3 3. ábra. A-35 512 H komponens hidrogénklorid só, 4. ábra. A-35 512 C komponens dihidrogénklorid só, 5. ábra. A—35 512 E komponens hidrogénklorid só. A 6. ábrán adjuk meg az A—35 512 B komponens aglikonjának infravörös abszorpciós spektrumát (Najol). A találmány szerinti eljárással előállított A-35 512 komponensek nagyon hasonló rokonvegyületek. Nem kevesebb, mint hét komponenst különítettünk el az A-35 512 antibiotikum keverékből. Az egyes komponenseket elkülönítettük egymástól, az A, B, C, E és H vegyületeket mint különálló termékeket izoláltuk. Az A—35 512 keverék vízben oldódik, alkoholokban, például metanolban és etanolban részben oldódnak, de oldhatatlanok más szerves oldószerekben, mint például benzolban, kloroformban, acetonban, dietil-éterben, etilacetátban, toluolban, hexánban, acetonitrilben és dioxánban. A találmány szerinti eljárással előállított A—35 512 antibiotikum-keverék A komponense egy fehér színű, amorf, bázikus vegyület. A vegyület a következő közelítő elemösszetétellel rendelkezik: szén: 54,29%, hidrogén: 5,19%, nitrogén: 5,58%, oxigén: 33,76%. klór: 1,69%. Az A-35 512 A komponens dihidrogénkloridja egy fehér színű, amorf, higroszkópos vegyület. Az A-35 512 keverék A komponensének dihidrogénklorid sója a következő közelítő százalékos elemösszetételű: szén: 51,03%, hidrogén: 5,10%, nitrogén: 4,75%, oxigén: 34,20%, klór: 4,80%. A találmány szerinti eljárással előállított A-35 512 A komponens dihidrogénklorid sójának káliumbromidban vizsgált infravörös abszorpciós spektrumát a mellékelt 1. ábrán mutatjuk be. A legjellemzőbb abszorpciós maximumok a következő frekvenciákon látszanak (cm-1): 3 405 (erős), 3 300 (vállas), 2 950 (gyenge), 1 750 (gyenge), 1 670 (erős), 1 625 (vállas), 1 602 (erős) 1 520 (erős), 1 470 (gyenge), 1440 (gyenge), 1 405 (gyenge), 1 345 (vállas), 1 312 (közepes), 1 225 (közepes), 1 180 (gyenge), 1 130 (gyenge), 1080 (erős) és 1020 (vállas). Az A—35 512 antibiotikum-keverék A komponens dihidrogénklorid sójának ultraibolya abszorpciós spektruma savas és neutrális metanolban 282 nm-en (e = 11 700) és lúgos metanolban 292 nm-en (e = 14 000) mutat abszorpciós maximumokat, a számított molekulasúly 2 000. Az A komponens dihidrogénklorid sója végabszorpciót is mutat 225 nm-es hullámhosszon. Az A—35 512 A komponens dihidrogénklorid sójának deutériumoxidban vizsgált C13 mágneses magrezonancia spektruma a következő jellemzőket mutatja: 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 65 2
