178989. lajstromszámú szabadalom • Eljárás a 3-alkil-5-(2-hidroxi-sztiril)-izoxazolok aminoszk előállítására
7 178989 8 3. A magas vérnyomást csökkentő hatás vizsgálata spontán magas vémyomású patkányokon A hatóanyagot 8 spontán magas vémyomású, hím Okamoto-patkányból (súlyuk: 280—350 g) álló csoportoknak orálisan adtuk be. A beadás előtt és után két órával a szisztolés vérnyomást a patkányok farkán, vérzés nélkül, piezokristályos felvevőkkel mértük. ED 20% értéknek az az adag felel meg - a kezelést nem kapott kontroli-állatok vizsgálati eredményeit figyelembe véve —, amely a szisztolés vérnyomást 20%-kal csökkenti. 4. Egereken meghatározott akut toxicitás Az akut toxicitás meghatározásához (LD 50) a hatóanyagokat 10-10 nőstény NMRI-egérből (súlyuk: 19-20 g) álló csoportoknak intraperitoneálisan adtuk be. A megfigyelés időtartama 1 hét volt. A hatásos adagokat (lásd 1-3) az adagok és a hatás logaritmusai közötti lineáris összefüggésből határoztuk meg, regresszió-analízis segítségével. Az LD 50 (4) értéket a Probit-analízis segítségével határoztuk meg. Az összehasonlító hatóanyag az ismert ß-szimpatolitikus szer, a propranolol, volt. Az 1. táblázatból kitűnik, hogy a találmán szerinti hatóanyag (1., 3., 6. és 13. példa) ß-szimpatolitikus hatása 6,1-20-szor erősebb, mint az ismert ß-szimpatolitikus szeré, a propranololé. Az 5. példában a találmány szerinti hatóanyag hatásossága körülbelül azonos a propranololéval. A találmány szerinti hatóanyagnál ezt a hatást kiegészíti az artériás vérnyomás akut csökkenése. A 3. példa 0,4 mg/kg-os adagjának beadása után a patkányon átlagosan 20%-os vérnyomáscsökkenést figyeltünk meg. Hasonló módon csökkentik a vérnyomást az 1., 5., 6. és 13. példa szerinti vegyületek 0,65 és 1 mg/kg közötti adagjai (ED 20%). Ezzel szemben a propranolol a patkányoknál 2,15 mg/kg-os adagig, növeli a vérnyomást. Csak a 4,64 mg/kg-os szubletális adag csökkenti a vérnyomást átlagosan 36%-kal. A körülbelül kétszeres adag (10 mg/kg) 6 állat közül kettőt elpusztít. A 3. példa szerinti vegyület 10 mg/kg-os adagjának beadása után 6 állat közül 1 múlik ki. Ez az adag azonban a vérnyomást csökkentő adag (0,4 mg/kg) 25-szöröse. A 3. példa azt igazolja, hogy spontán magas vémyomású patkányoknál a találmány szerinti hatóanyag orális beadása után csökken a vérnyomás. Egy 14,5 mg/kg-os adag a megnövekedett vérnyomást átlagosan 20%-kal csökkenti. A propranolol ugyanennél a vizsgálatnál 100 mg/kg-os adagig hatástalan. A 3. példa szerinti vegyület (123 mg/kg) letális adagja (LD 50, egér, i.p.) valamivel nagyobb a propranolol adagnál (108 mg/kg), a 13. példa szerinti vegyületé több, mint kétszerese. Az 1., 5. és 6. példa szerinti vegyület toxikus hatása ugyanolyan vagy kissé nagyobb, mint a propranololé. Ha figyelembe vészük ezt a nagyfokú hatásosságot (1. és 6. példa), illetve a teljesen újszerű hatás-rendszert, akkor ez a felismerés egyedülálló. 1. táblázat Példa ß-szimpatolitikus hatást ED 50% R.W. Vérnyomáscsökkentő hatás2! ED 20% Letalitás4! LD 50 1. 0,0077 14,3 0,65 108 3. 0,0055 20,0 0,40 123 5. 0,12 0,9 0,83 95 6. 0,018 6,1 0,93 84 13. 0,017 6,5 1,00 247 Propranolol 0,11 1,0 3/ 108 1. Macska, hexabarbitál narkózis. Beadás: i.v. ED 50% = az az adag (mg/kg), amely az izoproterenollal kiváltott tachikardiát 50%-kal csökkenti. Relatív hatásosság = R.W. Propranolol = 1,00 2. Patkány, uretán narkózis. Beadás: i.v. ED 20%- = az az adag, (mg/kg), amely a vérnyomást 20%-kal csökkenti. 3. 2,15 mg/kg-ig vérnyomás-növekedés (11%), 4,64 mg/kg-os adagnál vérnyomáscsökkenés (36%), 10 mg/kg-os adagnál 6 állat közül 2 kimúlt. 4. Egér, beadás: ip. LD 50 mg/kg. A találmány felöleli azoknak a szereknek és készítményeknek az előállítását is, amelyek a szokásos hordozó- és hígítószerek mellett egy I általános képletű hatóanyagot is tartalmaznak, valamint az új vegyületek alkalmazását gyógykezelésre. A gyógyszerek, illetve készítmények a szokásos hordozóanyagokkal vagy hígítószerekkel és a szokásos gyógyszertechnikai segédanyagokkal, a kívánt alkalmazási célnak megfelelően, alkalmas adagban, ismert módon állíthatók elő. . A készítmények előnyösen perorálisan adhatók be. Ilyen készítmények például a tabletták, filmtabletták, drazsék, kapszulák, pirulák, porok, oldatok vagy szuszpenziók vagy a depóhatást elősegítő készítmények. Természetesen parenterális készítmények is előállíthatok, így például injekcióoldatok, továbbá kúpok. Alkalmas tabletták állíthatók elő például, ha a hatóanyagot ismert segédanyagokkal, például iners hígítószerekkel, így dextrózzal, cukorral, szorbittal, mannittal, polivinilpirrolidonnal, szétesést elősegítő anyagokkal, így kukoricakeményítővel, keményítővel vagy alginsawal, kötőanyagokkal, így keményítővel vagy zselatinnál, csúsztatóanyagokkal, így magnéziumsztearáttal vagy talkummal és/vagy a késleltető hatást elősegítő szerekkel, így karboxipolimetilénnel, karboximetilcellulózzal, cellulózacetátftaláttal vagy polivinilacetáttal összekeverjük. A tabletták több rétegből is állhatnak. Fentieknek megfelelően drazsék állíthatók elő úgy, hogy a tablettákkal analóg módon előállított drazsémagokat a szokásos drazsé-bevonószerekkel, 5 10 15 20 2"5 30 35 40 45 50 55 60 65 4
