178756. lajstromszámú szabadalom • Eljárás tiolvédőcsoportok eltávolítására aminosavakból és peptidekből
17 178756 18 metil-formamidban oldjuk 6,04 g (0,026 mól) Boc-Asn-OH-val és 4,65 g (0,026 mól) HONB-vel együtt. Jeges hűtés közben 5,36 g (0,026 mól) didklohexil-karbodiimidet adunk hozzá és az elegyet 0°C-on 3 óráig és szobahó'mérsékleten 12 óráig keverjük. A képződött diciklohexil-karbamidot szűréssel eltávolítjuk és a szűrletet vákuumban bepároljuk, majd vizet adunk hozzá. A kapott kristályokat szűréssel összegyűjtjük és metanolból kétszer átkristályosítjuk. Kitermelés: 11 g (72,8%), olvadáspont: 163—-166 °C. [a]p7 = -28,9° (c = 0,85, dimetil-formamid). Hemzés C31H42 07N4 képlet alapján: számított: talált: C =63,90% N = 9,62%, C =64,12%, N = 9,90%. H =7,27%, H = 7,20%, (0,036 mól) trietil-amint számított: C = 54,28%, H = 4,79%, N = 6,66%, S =7,62%, talált: C =54,18%, H=4,74%, N =6,57%, S =7,56%. 5 PMBBoc I I 15. Z(N02 )—Cys—Lys-Asn— Phe—Phe-OH 10 szintézise Boc I 13. Z—Lys—Asn—Phe—OH szintézise 100 ml trifluor-ecetsavban 10,5 g (0,018 mól) Boc-Asn—Phe—Phe—0*Bu-t oldunk és az elegyet szobahőmérsékleten 1,5 óráig állni hagyjuk. A trifluor-ecetsavat csökkentett nyomáson lepároljuk és a maradékhoz étert adunk. A képződött csapadékot szűréssel összegyűjtjük, szárítjuk és 100 ml dimetil•formamidban oldjuk. Az oldathoz 5,04 ml Boc 15 20 25 30 és Z-Lys-OH oldatot Boc 35 adunk, mely utóbbit 8,2 g (0,0216 mól) Z—Lys— -OH-ból, 3,8 g (0,0216 mól) HONB-ből és 4,4 g (0,0216 mól) diciklohexil-karbodiimidből állítunk elő. Az elegyet szobahőmérsékleten 12 óráig kever- 40 jük, majd 10 ml ecetsavat adunk hozzá. Az oldószert vákuumban lepároljuk és a maradékhoz vizet adunk. A képződött csapadékot szűréssel összegyűjtjük és tisztítás céljából kétszer vizes metanolból, majd dimetil-formamid-/etil-acetátelegyből újra 45 kicsapjuk. Kitermelés: 11,1 g (78,1%), olvadáspont: 194-196 °C (bomlás). Md7 1 —26,9° (c = 0,59%, dimetil-formamid). Elemi analízis C4iH52OioN6 képlet alapján Boc I Szokásos eljárással 10,3 g (0,013 mól) Z-Lys—Asn—Phe—Phe—OH-t ecetsav-/víz (8 : 2 térfogatarány) elegyben katalitikusán redukálunk. Boc I A képződött H-Lys-Asn-Phe-Phe-OH-t tisztítás céljából etanolból kétszer kicsapjuk. Kitermelés: 7,0 g 100 ml dimetil-formamidban 6,55 g (0,01 mól) fenti vegyületet szuszpendálunk, hozzáadunk 1,40 ml (0,01 mól) trietil-amint, majd dimetil-form- PMB I amidban oldott Z(NQj)-Lys-ONB-t, mely utóbbit PMB I 5,05 g (0,012 mól) Z(N02 )-Cys-0H-ból, 2,15 g (0,012 mól) HONB-ből és 2,48 g (0,012 mól) diciklohexil-karbodiimidből állítunk elő. Az elegyet szobahőmérsékleten 12 óráig keverjük. 10 ml ecetsav hozzáadása után a dimetil-formamidot vákuumban lepároljuk és a maradékhoz vizet adunk. A képződött csapadékot szűréssel összegyűjtjük és kétszer átkristályosítjuk metanol-/víz (8 :2 térfogatarány) elegyből. Kitermelés: 9,6 g (92,3%), olvadáspont: 209- -210 °C (bomlás). [a]p7 = —24,6° (c = 0,74, dimetil-formamid). Elemi analízis C52H64Oi4N8S képlet alapján: számított: talált: C =59,08%, N = 10,60%, C =59,04%, N = 10,60%, H =6,10%, S =3,03%, H = 6,02%, S =3,19%. 50 16. Boc-Ala-Gly-OBzl szintézise számított: C = 62,42%, H = 6,64%, N = 10,65%, totöt: C = 62,27%, H = 6,66%, N = 10,72%. PMB 14. Z(NOj)—Cys—OH szintézise A vegyületet szokványos eljárással állítjuk elő. Kitermelés: 80%, olvadáspont: 163—165 °C. Wd3 = -51,2° (c = 0,61, dimetil-formamid). “kroi analízis C19H20O7N2S képlet alapján: 50 ml dimetil-formamidban feloldunk 8,10 g (0,024 mól) H-Gly-OBzl • p-Ts-OH-t és jeges hűtés közben 3,36 ml (0,024 mól) trietil-amint 55 adunk hozzá. Az elegyet Boc-Ala-ONB-t adunk, melyet 4,35 (0,023 mól) Boc-Ala-OH-ból, 4,12 g (0,023 mól) HONB-ből és 4,74 g (0,023 mól) diciklohexil-karbodiimidből állítunk elő. Az elegyet szobahőmérsékleten 12 óráig keverjük és vákuumban 60 ledesztilláljuk. A maradékot etil-acetátban oldjuk, szokásos módon mossuk és szárítjuk. Az etil-acetátot lepároljuk és a maradékot petroléterrel kristályosítjuk. A kristályokat szűréssel összegyűjtjük és etil-acetát-/petróleumbenzinelegyből átkristályosít- 65 juk. 9
