178485. lajstromszámú szabadalom • Eljárás antitestek immobilizálására akrilamid alapú polimermátrixban hormonok és gyógyszerek radioimmunlógiai meghatározásánál
MAGTAB SZABADALMI 178485 népköztársaság LEÍRÁS Nemzetközi osztályozás: $ Bejelentés napja: 1978. IV. 27. (CA-424) Német Szövetségi Köztáisaság-beli elsőbbsége: 1977. V. 11. (P 27 21 267.5) C07G 7/00, C 08 L 33/26 országos TALÁLMÁNYI Közzététel napja: 1981. IX. 28. HIVATAL Megjelent: 1983. Hl. 31. Feltaláló: Szabadalmas: Dt. Thoma Hans A., okleveles vegyész, München Chandon Investment Planning Német Szövetségi Köztársaság Ltd., Grand Cayman, Cayman Island, Brit-Nyugat-Indiai-Szigetek Eljárás antitestek immobilizálására akrilamid alapú polimermátrixban hormonok és gyógyszerek radioimmunológiai meghatározásánál 1 A találmány tárgya eljárás antitestek immobilizálására akrilamid alapú polimermátrixban hormonok és gyógyszerek radioimmunológiai meghatározásánál. Hormonok és gyógyszerek radioimmunológiai 5 meghatározásánál a hormonok illetve gyógyszerek és valamely antitest közötti reakció megy végbe. A reakció fajlagossága az immunológiai komplementaritástól függ, azaz hasonló kémiai konfigurációjú anyagok esetén keresztreakció léphet fel. Egy östri- 10 ol-Q konjugátumban az östriol immundetermináns konfigurációban van, melyben az östriol minden fontos funkciós csoportja az antitest kötőhelyéhez kapcsolódni tud. Ezzel szemben az antitestek nagymértékben megkötnek olyan östriol-konjugátu - 15 mókát, melyeknek szulfát illetve glukoronid-csoportja a fenol gyűrű C3 helyzetéhez kapcsolódik. Ez különösen akkor hátrányos a szabad szteroidok meghatározása szempontjából, ha a vizsgálandó anyag konjugátum-koncentrádója 10%-al nagyobb a sztereo- 20 id-koncentrádónál, mint az a terhességi szérumban levő östrogénnel is tapasztalható. A fentiek alapján eddig olyan eljárásokat alkalmaztak, ahol a radioimmunológiai vizsgálat előtt oldószeres extrakcióval biztosították a fajlagosságot. 25 Az oldószeres extrakció azonban megnehezíti a vizsgálandó anyagok sorozatban történő meghatározását. A radioimmunológiai eljárásoknak a szilárd-fázis•módszer «Uralmavám révén történő egyszerűsítésére irányuló kísérletek során az antitesteket különböző 30 2 mátrixokhoz kovalensen kötötték, mint például agarózhoz, cellulózhoz, üvegrészecskékhez, poliamidhoz és poliakrilamidhoz. Ha az antitestet valamely mátrix foglalja magában, annak az az előnye, hogy a nagyobb molekulasúlyú zavaró molekulák kizárhatók, nem szükséges pipettálás és centrifugálás beiktatása, valamint az immobilizált antitest hosszabb ideig tartható el szobahőmérsékleten. Az eredmények azt mutatták, hogy ha az antitestet valamely mátrixban ismert módon immobilizáljuk, úgy az nem felel meg a követelményeknek. A találmány feladatául tűzte ki, olyan polimermátrix előállítását, melynek alkalmazásával a mátrixba bezárt antitest kötésfajlagossága megnő és a nem kívánt keresztreakciók megakadályozhatok. Meglepő módon azt találtuk, hogy az antitestek kötésfajlagosságának változtatása és megnövekedése akrilamid kopolimerizátűmből álló polimermátrixok alkalmazásával érhető el. Különösen előnyösek akrüamidnak a következő vegyületek egyikével vagy közülük többel alkotott kopolimeijei, akrilsav, metakrilsav, metakrilamid, ezek származékai valamint az akrilsav és metakrilsav sói. Az akrilamid és a vele kopdimerizálható vegyületek kopolimerizádója révén befolyásolhatjuk a polimermátrix mikrokömyezetét. A hatás főként hidrofób és hidrofil, valamint elektrosztatikus hatásokon alapul. 178485
