178321. lajstromszámú szabadalom • Eljárás 9-hidroxidibenzo [b, d ] piránok előállítására
11 178321 12 II. Táblázat. Fájdalomcsillapító hatás (ED50 — mg/kg) (A) képletfl vegyület Q= C=0, R,=H, R5=CHj / R« —z—w PBQ TF HP RTC FJ TI CHj —(CH2)2—c6h5 N.T. N.T. N.T. N.T. CH, —CH(CHj)—(CH2)2—C6H5 N.T. CHj-CH(CHj)-(C3)j-C6Hs 6,0 5,6—10 >10 N.T. N.T. N.T. ch3 —CH(CH3)—(CH2)4—CgHj 10 >10 N.T. N.T. N.T. H -CH(CHj)—(CH2)j—QHjíb) 3,0 7,0—10 10—32 N.T. N.T. N.T. CHj —O—CH(CHj)—(CH2)2—C2H5 >10 >10 N.T. N.T. N.T. CHj —O—CH(CHj)—(CH2)j—C6H5 1,3 3,6 >10 N.T. N.T. N.T. CHj-CH(CHj)-(CH2)3-0-C6H5 10—15 >10 >10 N.T. N.T. N.T. CHj CHj —O—CH(CH3)—CjH„ —O—CeH,, 2,6 N.T. N.T. N.T. N.T. N.T. CHj CHj-CH(CH3)-(CH2)3—(4-CsH4N) —C5Hu 0,86 >56 1—3,2 >56 >5,6 N.T. N.T. N.T. CHj CHj (b) 2 —CH(CHj)—CH(CH3)—C5Hu —CH(CH3)—(CH^—0—c6h5 diasztereomer elegye 0,24 5—10 1,25 5,6 3.2 0,66 3,2 szerinti vegyületek esetében éjszakán át éheztetett, Heidenhain erszényes kutyákon tanulmányozzuk, és pentagasztrint, hisztamint vagy táplálékot használunk a savkiválás stimulálására. A pentagasztrint vagy a hisz- 30 tamint folyamatos infúzió alakjában visszük be a kutyák előre meghatározott felületi lábvénájába avégett, hogy a lehető legnagyobb mértékű savkiválást érjük el a gyomorban. A táplálék egy fél konzerv (körülbelül 220 g) kutyánként, amelyek súlya 9—12,5 kg. A gyo- 35 momedvet 30 perces időközökben gyűjtjük össze a hisztamin- vagy a pentagasztrin-infúziótól vagy az élelem bejuttatásától számítva. Az egész kísérlet alatt tíztíz gyűjtést végzünk minden egyes kutyánál. A hatóanyagot orálisan adjuk be 0,01—50 mg/kg mennyiség- 40 ben a harmadik gyomornedvlevétel után. Valamennyi levételnél kapott gyomomedv térfogatát megmérjük és titrálással meghatározzuk a savkoncentrációt úgy, hogy egyenlő mennyiségeket (1,0 ml) 7,4 pH-ig titrálunk 0,1 n NaOH-oldattal, a titrálásnál pH-mérőt (radiométer) és 45 önműködő bürettát használunk. A hatóanyagot orálisan adjuk be zselatinkapszulában. Az antitestelfojtó hatást kevert lymphocita-kultúra segítségével értékeljük. Ez a kísérlet a vizsgált hatóanyagoknak antigénnel stimulált lymphocita-burjánzásra 50 gyakorolt hatását méri. BALB/C és C57BL/6 egerekből származó lép-nyiroksejteket, 8 x 106 sejtet mindegyik törzsből, 2,0 ml olyan szérummentes közegben szuszpendálunk, amely a vizsgálandó hatóanyagot tartalmazza, és utána ezt 37 C°-on 10%-os széndioxid-légkör- 55 ben inkubáljuk. A tenyésztési körülményeket és a módszert R. W. Dutton írja le a J. Exp. Med., 122,759 (1965) irodalmi helyen, míg a sejtközeget W. T. Weber ismerteti a J. Retic. Soc., 8, 37 (1970) folyóiratban. A közeg felét, 1 ml-t, friss közeggel helyettesítünk minden 24 órá- 60 ban. Ezután meghatározzuk 3H-TdR bekebelezését (24 óra időköz) dezoxiribonukleinsavba a dezoxiribonukleinsavnak triklórecetsavval történő kicsapásával és megállapítjuk a radioaktivitást egy folyékony scintillátor számolóban. A gátlást százalékot úgy állapítjuk meg, 65 hogy összehasonlítjuk a kevert-táptalajjal kezelt vizsgált vegyületeket a kontroll kevert táptalajjal. A találmány szerinti eljárást a továbbiakban kiviteli példákon is bemutatjuk. 1. példa dl-5-hidroxi-2,2-dimetil-7-(l-metil-4-fenilbutil)-4-kromanon 9,6 g 2-(3,5-dihidroxifenil)-5-fenilpentán és 4,5 g 3-metilkrotonsav elegyét nitrogéngáz légkörben 125 C°-on melegítjük és 8,7 ml bórtrifluoréterátot adunk az elegyhez. A reakcióelegyet ezután 1 óra hosszat visszafolyatás közben melegítjük, majd lehűtjük és előbb 10 ml vizet, utána pedig 40 ml 6 n nátriumhidroxid-oldatot adunk hozzá. Az elegyet 5 percig vízfürdőn melegítjük, majd lehűtjük és 6 n sósavval megsavanyítjuk. A vizes réteget (3 x 100 ml) éterrel extraháljuk, utána az egyesített éteres kivonatokat először (1 x 25 ml) 10%-os nátriumhidrogénkarbonát-oldattal, utána pedig (1 x 25 ml) vízzel mossuk. A szerves fázist nátriumszulfát felett szárítjuk és vákuumban betöményítjük. Ily módon 12,7 g nyers olajat kapunk, amelyet szilikagélen kromatográfiásan tisztítunk és így 5,0 g dl-5-hidroxi-2,2-dimetil-7-(l-metil-4-fenilbutil)-4-kromanont kapunk színtelen olaj alakjában. IR: (CHClj) C=0 1635 cm"1. NMR: Scinch 1—1,7 (M, 7, a-metil, etilén), 1,5 (S, 6, gém. dimetil), 2,3—2,9 (M, 3, benzil-metilén, metinil), 2,65 (S, 2, a-metilén), 6,1—6,35 (M, 2, aromás), 6,9— 7,4 (M, 5, aromás), 11,53, 11,63 (d, 1, hidroxil). Hasonló módon alakítunk át 2-(3,5-dihidroxifenil)-6' -fenilhexánt dl-5-hidroxi-2,2-dimetil-7-(l-metil-5-fenilpentil)-4-kromanonná (olaj). NMR: 8Jih;13 1,2 (d, 3, a-metil, J=7 cps), 1,4 (S, 6, gém. dimetil), 1,0—1,9 [M, 6, 0—CH2—(CH^— —C(CH3)—Ar], 2,3—2,8 (M, 3, benzümetilén, metinil), 6
