177646. lajstromszámú szabadalom • Eljárás új 1-(1,3-dioxolán-2-il-metil)-1h-imidazol-származékok előállítására
9 177646 10 meggátlásában és megelőzésében, illetve ilyen mikroorganizmusoktól szenvedő egyedek kezelésében. Az I általános képletü vegyületek erős antimikrobiális hatását az alábbiakban ismertetendő kísérletekben kapott eredmények igazolják. AJ kísérlet: I általános képletü vegyületek hatásának vizsgálata patkányok vaginális kandidózisa esetén 100 g körüli súlyú nőstény Wistar-patkányokat használunk kísérleti állatként. Az állatokat méheltávolításnak és petefészekeltávolításnak vetjük alá, majd a műtéti beavatkozás után három héttel szubkután, hetenként egyszer, három héten át 100 ug ösztradiolt adunk be szézámolajban oldva. Az így kiváltott pszeudociklust hüvelykenetek mikroszkóp alatti vizsgálatával ellenőrizzük. A kísérleti állatoknak tetszés szerinti mennyiségű táplálék és víz áll rendelkezésre. A patkányokat intravaginálisan 48 órán át 37 °C-on Sabouraud-féle táptalajon tenyésztett és nátrium-kloridoldattal hígított, 8 • 105 sejtet tartalmazó Candida albicans tenyészettel fertőzzük meg. A fertőzést a kiváltott pszeudociklus megjelenésére utaló jelektől függően a sebészeti beavatkozás utáni 25. és 32. nap közötti napon hajtjuk végre. A kísérleti vegyületeket orálisan adjuk be a fertőzés napjával kezdődően két napon át naponta. Mindegyik kísérletnél placébóval kezelt kontrollállatokat is alkalmazunk. Az eredményeket úgy értékeljük ki, hogy néhány nappal a kezelés után steril tamponokkal hüvelykeneteket veszünk, majd a tamponokat Petri-csészékben levő Sabouraud-féle táptalajra helyezzük és a csészéket 48 órán át 37 °C-on inkubáljuk. Ha a Candida albicans nem növekszik, azaz az állatok a kísérlet végén negatívnak tekinthetők, akkor ez a kísérleti vegyülettel végzett kezelés eredménye, minthogy a placébóval kezelt állatok egyiknél sem kapunk negatív eredményt, vagyis 5 mindegyik megfertoződik. Az I és II táblázatokban azoknak a kísérleti vegyülcteknek a legkisebb orális dózisát adjuk meg, amelyek 14 nappal a fertőzés után hatásosak. B) kísérlet: I általános képletü vegyületek hatásának vizsgálata pulykabegy-kandidózis esetén 14 napos pulykák begyét megfertőzzük 48 órán át 37 C-on Sabouraud-féle táptalajon növekedett és nátrium-klorid-oldattal hígított, 4 • 106 sejtet tartalmazó Candida albicans tenyészettel, 1 ml-nyi oltóanyagot használva. A kísérleti vegyületet előzetesen 500 mg laktonnal keverjük össze, majd az így kapott keveréket bármiféle adalék alkalmazása nélkül 1000 g liszthez keverjük. A kísérleti vegyület koncentrációját így a lisztre vonatkoztatva mg/kg-ban adjuk meg. A fertőzés napjától számítva 13 egymást követő napon át a kísérleti állatok a gyógyszerrel adagolt lisztet kapják. A kísérlet végén az összes állatot leöljük. A boncolásnál a begyeket eltávolítjuk, kiürítjük és Uítra-turrax típusú keverőben 15 ml steril nátrium-klorid-oldattal aprítjuk. Az esetleg létező tenyészetek számlálását Sabouraud-féle agar-agaron végezzük, és a kapott eredményeket szintén az I és II táblázatban adjuk meg EDJ0- ben, amely megfelel a kísérleti vegyület azon dózisának, mely a kísérleti állatok fele esetében a begyet a Candida albicans fertőzésétől megvédi. 10 15 20 25 30 I. táblázat Ij általános képletü vegyületek A Vaginális kandidozis begy-kandidózis , ■ patkányokon, pulykákon Szabad bázis vagy so legalacsonyabb ED*, mg/kg-ban a táphatásos dózis ra vonatkoztatva —N=C=S j szabad bázis ! 5 : 125 —nh2 szabad bázis ! 5 125-N(CH3)2 I 2(C00H)2H20 10 31 —NH—CHO 1 szabad bázis 2,5 31 —NH—CO—CH3 ; szabad bázis ; 5 31 —NH—CO—C2H5 i (COOH)2 : (CH3)2—choh ! io 31 —NH—CO—CH(C1)2 1 szabad bázis 10 125 fenil-karbonil-amino‘ szabad bázis 5 63 4-fluor-fenil-karbonil-amino! szabad bázis ; 5 16 4-klór-fenil-karbonil-amino! szabad bázis — 31 4-bróm-fenil-karbonil-aminoszabad bázis 10 31 4-metoxi-fenil-karbonilszabad bázis 40 16 —NH—CO—OCH3 hno3 5 31 —NH—CO—OC2H5 : szabad bázis ; 5 16 fenoxi-karbonil-atnino-; szabad bázis 10 125 —NH—CO—NH—CH3 1 szabad bázis 10 125 —NH—CO—NH—C2Hj ! szabad bázis 10 125 —NH—CS—NH2 1 szabad bázis 20 — —NH—CS—NH—CH3 ■ szabad bázis 1 10 125 —NH—CS—NH—C^Hj j szabad bázis 1 5 125 5
