177586. lajstromszámú szabadalom • Új eljárás stabilis d-vitamin ciklodextrin zárcány-komplexek előállítására
7 177586 8 vitamin és 93% ß-ciklodextrin egyszerű Összekeverésével állítottunk elő, lényegileg a tiszta ß-ciklodextrin termikus analitikai görbéit eredményezte. A megfigyelhető változás mindössze annyi volt, hogy 170 °C körül már súlycsökkenés volt észlelhető, amit valószínűleg a D3- vitamin bomlása okoz. 300 °C körül ez a keverék éppúgy meggyullad, mint a tiszta ß-ciklodextrin. A ß-ciklodextrin-D3-vitamin zárványkomplex termikus analízise során 255 °C-on egy jellegzetes minimum észlelhető a differenciál termogravimetrikus görbén, ugyanebben a tartományban a DSC görbe is csökkenést mutat. Az anyagkeverék 290 °C-nál minimumot mutat, de nem gyullad meg, hanem 4—500 °C között lassan krakkolódva ég el. Más ciklodextrin zárványkomplexek vizsgálati eredményeivel összevetve ez a viselkedés egyértelműen bizonyítja azt, hogy az anyag valóban a D3- vitamin zárványkomplexe volt. A komplex hővel szembeni stabilitásának vizsgálata A D3-vitamin és ß-eiklodextrin keverékét a 76,128,417 számú japán nyilvánosságrahozatali iratban leírt módon előállított D3-vitamin-ß-ciklodextrin zárványkomplexet, illetve a találmányunk szerinti, az 1. példa szerint előállított terméket 80 °C-on 1 mm vastag rétegben levegőn hőterhelésnek vetettük alá. A különböző időpontokban vett mintákat kevés dimetilformamidban történő oldás, és 96%-os etanollal való hígítás után fotometráltuk. A következő táblázatban látható, hogy a komplexbe nem zárt vitamin már 24 óra után ki sem mutatható a keverékben, az említett japán irat szerint előállított termékben a D3-vitamintartalomnak 25,7%-a, a jelen találmányunk szerint előállított termékben pedig a D3-vitaminnak 49,1%-a maradt meg változatlanul 43 nap után. Hőterhelés hatása (80 °C) D3-vitaminra (az eredeti hatóanyag-tartalom százalékában) Idő nap i 1 1 Dj'keverck ! 6,7% Ds-vitamin j 92,3% j3-ciklodext- j rin keveréke i i ! l A 76, 128,417 számú japán nyilvánosságrahozatali irat szerint előállított termék (Dí—7,1%) Az 1. példa szerint előállított termék (D3=7,6%) 2 Az első 24 óra ! 80,2 94,7 5 után már : 74,9 88,9 8 nem | 68,5 81,0 10 mérhető 1 63,0 76,0 13 60,4 72,3 17 i 51,3 67,3 20 I i 42,0 64,1 24 1 1 43,7 57,9 28 31,5 54,8 43 1 25,7 49,1 A D3-vitamin vízoldékonysága ß-ciklodextrin zárványkomplex formájában igen jellemző módon megnövekszik. 100 ml 37 °C-os pH=7 Britton—Robinson pufferbe vibrációs keverés mellett beleszórunk 50 mg kristályos D3-vitamint, illetőleg 200 mg, az 1. példa szerint előállított kristályos ß-ciklodextrin zárványkomplexet, illetve egy harmadik kísérletben 200 mg, a 2. példa szerint előállított liofilezett D3-vitamin-ß-ciklodextrin zárványkomplexet. Az intenzív keverés közben mintákat veszünk, azokat azonnal leszűrjük, majd etanollal történő hígítás után spektrofotometriásán 265 nm-nél meghatározzuk az oldatok extinkcióját és ebből számítjuk az oldatba ment D3-vitamin mennyiségét. Az alábbi táblázat szemlélteti az eredményeket. A D3-vitamin esetében csak igen csekély extinkciónövekedést észlelünk, de ez nem D3-vitamin, hanem valamilyen nem azonosított bomlástermék. Ezt igazolta a teljes spektrum felvétele. Végeredményben a D3-vitaminból egyáltalán nem is tudtunk kimutatni oldatba ment anyagot, míg a kristályosított, illetve liofilizált komplexből 0,22—0,34 mg/100 ml D3-vitamin került oldatba, ami az in vivo felszívódás szempontjából fontos tényező. idő perc D8-vitamin Az 1. példa szerint előállított kristályosított zárványkomplex A 2. példa szerint előállított liofilezett zárványkomplex Oldatba ment Da-vitamm mg/100 ml-ben 5 0 0,210 0,232 10 0 0,180 0,252 20 0 0,192 0,270 30 0 0,220 0,234 40 0 0,204 0,336 50 0 0,214 0,238 60 0 0,202 0,312 75 0 0,212 0,336 90 0 0,220 0,340 A D3-vitamin ß-ciklodextrin zárványkomplexnek az oxigénnel szembeni stabilitását Warburg készülékben 37 °C-on vizsgáljuk tiszta oxigén atmoszférában. A következő táblázat szemlélteti az 1 mg D3-vitaminra jutó oxigénfelvétel mennyiségét az idő függvényében. Mint látható, a D3-vitamin egy kezdeti indukciós periódus után egy S-alakú görbe szerint veszi fel az oxigént és határértékben körülbelül 140 ;xl. oxigént fogyaszt milligrammonként. A 76,128,417 számú japán nyilvánosságrahozatali irat szerint előállított kristályos ß-ciklodextrin zárványkomplex ennek az értéknek a 39,5%-át veszi fel. A jelen találmány szerint az 1. példának megfelelő módon előállított komplex minössze a 11,2%-át veszi fel ennek az értéknek. Az alábbi táblázat szemlélteti a mérési adatokat. idő órákban Dt-Yitamin A 76, 128, 417 számú japán nyilvánosságrahozatali irat szerint előállított termék Az 1. példa szerint előállított termék Oxigénfelvétele pl/mg D3-vén itaminban kifejezve 50 6 17 6 100 14 31 9 150 48 38 12 200 83 44 14 250 125 50 16 300 132 52 16 350 140 55 16 A fénystabilitás vizsgálata: A D3-vitamin és a ß-ciklodextrin keverékét, a 76,128,417 számú japán nyilvánosságrahozatali iratban leírt módon előállított D3-vitamin- ß-ciklodextrin zárványkomplexet, illetve az 1. példa szerint előállított tér-5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 65 4
